GB/T 15400-2018 饲料中色氨酸的测定

ICS65.120

B46

国

中华人民共和国国家标准

G!J/T15400-2018

代替GB/T154001994

饲料中色氨酸的测定

Determinationoftryptophaninfeeds

2018-09-17发布2019-04-01实施

国家市场监督管理总局峪非

中国国家标准化管理委员会0(..'I(J

GB/T15400-2018

目lj昌

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准代替GB/T15400-1994《饲料中色氨酸的测定分光光度法儿

本标准与GB/T154001994相比，除编辑性修改外，主要技术内容的变化：

增加了高效液相色谱法，修改了适用对象，增加了两个方法的定量限（见第1章，1994年版的

第1章）。

一一修改了分光光度法原理的表述（见4.1,1994年版的第3章）。

一一修改了精密度的表述（见4.7,1994年版的8.3）。

本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）提出井归口。

本标准起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所［国家饲料质量监督检验中心

（北京）］、通戚股份有限公司。

本标准主要起草人：李兰、贾铮、赵艳、赵根龙、宋军、张凤抨。

本标准的历次版本发布情况为：

一一－GB/T15400-1994。

I

GB/T15400-2018

饲料中色氨酸的测定

1范围

本标准规定了饲料中色氨酸含量测定的高效液相色谱法和分光光度法。

本标准适用于饲料原料、配合饲料、、浓缩饲料和精料补充料中色氨酸的测定。

高效液相色谱法的定量限为0.02%；当试样最大称样量为700mg，水解液稀释倍数为25倍时，分

光光度法的定量限为0.04%。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6433饲料中粗脂肪的测定

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1饲料果样

GB/T20195动物饲料试样的制备

3高效液相色谱法（仲裁法）

3.1原理

试样中的色氨酸经氢氧化组溶液水解，用高效液相色谱法分离，紫外或荧光检测器检测，外标法

定量。

3.2试剂或材料

除特殊注明外，本标准所用试剂均为分析纯。

3.2.1水：符合GB/T6682中一级水的规定。

3.2.2甲醇：色谱纯。

3.2.3氢氧化押溶液（0.1mol/L）：称取0.56g氢氧化掷，熔解于100mL水中，即得。

3.2.4氢氧化埋陪液（4mol/L)：称取83.9g氢氧化钮，溶解于500mL水中，即得。

3.2.5乙酸铀缓冲溶液（0.0085mol/LNa+,pH=4.5）：称取0.70g元水乙酸纳，溶解于1000mLJj(

中，用冰乙酸调节pH为4.5。

3.2.6流动相：乙酸纳缓冲、溶液（3.2.5）十甲醇（3.2.2)=95+50

3.2.7L－色氨酸标准储备溶液：准确称取25mg（精确到0.0001g）色氨酸对照品（纯度大于99%），置

于25mL烧杯中，用滴管滴力11氢氧化押榕液（3.2.3）使其溶解，将其定量地转移至250mL棕色容量瓶

中，用水定容，浓度为1001,g/mL2℃～8℃保存，有效期为1个月。

3.2.8L－色氨酸标准系列溶液：准确移取L－色氨酸标准储备溶液（3.2.7)5.00mL、7.50mL、

10.00mL、12.50mL、15.00mL、17.50mL分别置于25mL棕色容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。其

溶液放度分别为20µg/mL、30µg/mL、40µg/mL、50µg/mL、60µg/mL和70µg/mL。2℃～8℃保

存，有效期为2用。

GB/T15400-2018

3.3仪器设备

3.3.1天平：感量0.0001g、感量0.001g。

3.3.2聚四氟乙烯水解管：配衬管和密封垫。

3.3.3恒温干燥箱：可达到110。C土2。C。

3.3.4离心机：转速不低于4000r/min

3.3.5高效掖相色谱仪：配紫外检；则器或者荧光检测器。

3.4样品

按GB/T14699.1的规定，抽取有代表性的饲料样品，用四分法缩减取样。按GB/T20195制备试

样，磨碎，全部通过0.25mm孔筛，混匀，装入密闭容器中，备用。取适量试样，按照GB/T6433测定试

样脂肪含量。