GB/T 36809-2018 可可丛枝病菌检疫鉴定方法

ICS65.020.01

B16

国

中华人民共和国国家标准

GB/T36809-2018

可可丛枝病菌检疫鉴定方法

DetectionandidentificationofMoniliophthoraperniciosα

2018-09-17发布2019-04-01实施

国家市场监督管理总局啦告

中国国家标准化管理委员会保叩

GB/T36809-2018

目lj昌

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271）提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国海南出入境检验检

疫局。

本标准主要起草人：冯黎霞、王卫芳、何日荣、魏霜、刘福秀、何瑞芳。

I

GB/T36809-2018

附录C

（资料性附录）

可可丛枝病菌与可可链使抱英腐病菌的比较

可可丛枝病菌与可可链疫抱英腐病菌异同见表C.l。

表C.1可可丛枝病菌与可可链擅抱英腐病菌异同

项目

可可丛枝病菌可可链疫于包英瓜；）病菌

M川口＇liot1h1l11J/U户们niciosa(Stabel)八ime8,ιPhillipsM.,or!'ri(Cif.)H.C.Evans,Stalpers,Samson

学名Mora(2005)=Marimni11s户’rnicios11sStahel(l915)=&Benny(1978)=（＇川，1i户’llisroreri(Cif.)

(‘,·i11i卢Pl/isρ川·11iciosa(Stabel)SingerCl942)H.C.Evans=.Mo11i/ioror问·iCif.

菌丝均有单核和双核两种形式。单核菌丝肿胀、弯曲缠单核菌丝，不具锁状联合，菌丝体有肿胀，相互

统、不具有锁状联合，比较宽大，宽度为5pm~20pm,缠绕，菌丝层或假子应串生有念珠状分生于包

无性态存在于细胞问。侵染组织25d~40d后，顶端组织死子，分生抱子壁厚，淡黄色至棕色，球形或近球

亡，双核菌丝出现，菌丝直，常具锁状联合，茵丝宽度变形，分生抱子具柄孔隔膜，大小为（5pm~

窄，宽度为lpm~3pm，存在于细胞内llpm)×(8pm~20pm)

有位态有位态为担袍子，由伞盖状担子果产生不具有性态

菌落在PDA平板上初为纯白色，后为奶油色，圆形，不

菌落在PDJ\平极上初为白色，后为奶油色至

菌落特征隆起，菌丝致密，平铺于培养基表面形成毡状菌丝层，打

深褐色

开培养肌蒜，菌落有蘑菇气味

最合适泪度为25'C适宜生长温度22'C～33℃

生长温度

巴西、巴拿马、秘鲁、哥伦比亚、玻利维亚、厄瓜多尔、委分布范围较小，巴西、巴拿马、秘鲁、哥伦比亚、

分布内瑞拉、伯里兹、多米尼加、格林纳达、三在文特森、特立尼玻利维亚、厄瓜多尔、委内瑞拉、哥斯达黎加l、

达与多巴哥、圭亚那、苏里南尼加拉瓜、洪都拉斯、危地马拉、墨西哥

可可t丁.cacao）、失叶异翅木（Hl'lvroj)frrysαrnt,Ji,l1川、

红木（/Ji.rao,·p//ana）、辣椒（（。ρsicum111u1111on）、番茄

侣。iα1111111lycoρ川、icum）、茄子（S.melo111sP11a）、洋茄（S.

ly川rαr卢um）、锥花茄（S.问，1irn／αtum）、S.CP川1/l//}1、可可（T.cacao）、野生H川Y川1iaspp.、野生

寄主

n阳！PlouaPriopoda、八rrahidα叫＇Ul'ITUCO吨，以及哥哥！虱Thn,b’“mu1sil俨n、ThPobromaspp.

(ThPobrom(Solanaceae）、紫葳科

(Bignoniaceae）、金虎尾科（Malpighiaceae）、梧桐科

(Sterculiaceae）、Hl'IT(I川μ周其他一些棉物

在可可开花期、果实生长期、幼苗期都可以危害，可恒’染

危害果英，不但染梢物的嫩芽等分生组织

为害

梢株的叶片、嫩枝、花序、幼嫩果肉、种子和果芙

病菌侵染后，寄主一般经过30d~50d后显

病菌侵染后，寄主一般经过14d~21d后显症。在茎、症。果芙变形、早熟，表面形成棕色病斑，形成

症状

有奶油色至黑色粉状的抱子堆。英果内部具

日｜片等部位产生丛枝症状，腋芽丛生。感病相株枝条干

枯坏死后，会长出菌盖为粉红色至深红色的大班子实体

典刻的组织坏死，周围包固有一阁腐烂水湿

物质

9

GB/T36809-2018

附录D

（规范性附录）

PCR检测鉴定方法

D.1DNA提取一一－CTAB法

采用常规CTAB法提取病菌基因组DNA作扩增模板，分离材料可选寄主病部的菌丝体、担子果或

担抱子堆，也可选分离物菌落边缘新鲜菌丝（PDA培养基、25℃、黑暗条件下培养5d)20mg。加入

570vL2%CTAB提取液，30vL10%SDS溶液，充分研磨，65℃水浴30min，加入600vL酣氯仿液

（酣：三氯甲：皖：异戊醇25:24:1）抽提2次，11000K常温离心5min，取上清液，加入1/10体积

3mol/L醋酸铀溶液和2倍体积元水乙醇混匀，室温静置20min,11000g4℃离心10mi丑，弃上清液，

沿离心管壁力II入1mL70%乙醇溶液清洗DNA沉淀，11000g4℃离心5min，弃上清液，加入40vL

Tris-EDTA缓冲液梅解，置于一20℃备用。也可用商品化的适合其菌基因组DNA提取民剂