GB/T 22332-2025 鸭病毒性肠炎诊断技术

ICS11220

CCSB.41

中华人民共和国国家标准

GB/T22332—2025

代替GB/T22332—2008

鸭病毒性肠炎诊断技术

Diagnostictechniquesforduckvirusenteritis

2025-08-29发布2026-03-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T22332—2025

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

缩略语

4……………………1

临床诊断

5…………………2

样品采集保存与处理

6、……………………3

病毒分离鉴定

7……………3

中和试验固定病毒稀释血清法

8(-)………………………5

直接免疫荧光

9……………6

间接

10ELISA……………7

11PCR……………………9

疫苗株与野毒株鉴别

12PCR……………11

荧光定量

13PCR…………………………12

综合判定

14………………13

附录规范性溶液配制

A()………………14

附录资料性原代细胞制备方法

B()……………………16

附录资料性组织培养半数感染量测定方法法

C()(TCID50)(Reed-Muench)………17

附录资料性中和试验加样示意图

D()…………………18

附录资料性及荧光定量结果图

E()PCRPCR………19

Ⅰ

GB/T22332—2025

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件代替鸭病毒性肠炎诊断技术与相比除结构调

GB/T22332—2008《》,GB/T22332—2008,

整和编辑性改动外主要技术变化如下

,:

增加了缩略语见第章

———(4);

更改了临床诊断的相关要求见第章年版的第章

———(5,20082);

更改了样品采集保存与处理的相关要求见第章年版的第章

———、(6,20083);

更改了病毒分离鉴定的相关要求见第章年版的第章

———(7,20083);

增加了中和试验见第章

———(8);

增加了直接免疫荧光法见第章

———(9);

增加了间接方法见第章

———ELISA(10);

更改了方法的相关要求见第章年版的第章

———PCR(11,20084);

增加了疫苗株与野毒株鉴别方法见第章

———PCR(12);

增加了荧光定量方法包含疫苗株与野毒株鉴别诊断方法见第章

———PCR()(13);

增加了诊断结果的综合判定见第章

———(14)。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出

。

本文件由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本文件起草单位中国动物卫生与流行病学中心浙江省农业科学院山东省农业科学院家禽研究

:、、

所华南农业大学山东中新食品集团有限公司

、、。

本文件主要起草人蒋文明刘朔陈柳张存李玉峰云涛崔雪志王静静叶伟成于晓慧李阳

:、、、、、、、、、、、

郭宵峰刘华雷

、。

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为

:

年首次发布为

———2008GB/T22332—2008;

本次为第一次修订

———。

Ⅲ

GB/T22332—2025

引言

鸭病毒性肠炎又称鸭瘟是由疱疹病毒科甲型疱疹病

(Duckvirusenteritis,DVE),(Duckplague),

毒亚科马立克病毒属鸭疱疹病毒型引起的鸭鹅和天鹅雁形目的一种急性热性接触性传染病

1、()、、。

病原鸭疱疹病毒型又称鸭肠炎病毒鸭瘟病毒

1(Duckenteritisvirus,DEV)、(Duckplaguevirus,DPV)

和病毒本病以高热血管损伤致使组织体腔出血消化道黏膜的疹性损害淋巴器官

DVE(DVEV)。,、,,

病变和实质器官退行性变化为特征本病传播迅速发病率和病死率都很高严重威胁养鸭业的发

。,,

展对野生水禽存在潜在威胁尚未见其他禽类哺乳动物或人类感染的报道病原只有一个血清

,。、。

型不同毒株在致病性上存在差异目前主要依靠弱毒活疫苗进行防控

,。,。

本病诊断综合考虑临床诊断病原学诊断血清学诊断和分子生物学诊断等方法作为疱疹病毒科

、、。

的其基因组容易发生重组与变异因此在鉴别诊断的时候参考多个靶基因对疫苗株与野毒株进

DEV,,,

行区分

。

Ⅳ

GB/T22332—2025

鸭病毒性肠炎诊断技术

1范围

本文件描述了鸭病毒性肠炎临床诊断和病毒分离鉴定中和试验直接免疫荧光间接酶联免疫吸

、、、

附试验聚合酶链式反应疫苗株与野毒株鉴别诊断荧光定量等实验室诊

(ELISA)、(PCR)、PCR、PCR

断方法

。

本文件适用于鸭病毒性肠炎的诊断检测监测和流行病学调查

、、。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

兽医诊断样品采集保存与运输技术规范

NY/T541、

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

绒毛尿囊膜

CAM:(ChorioallantoicMembrane)

鸡胚成纤维细胞

CEF:(ChickenEmbryoFibroblastCell)

细胞病变

CPE:(CytopathicEffect)

鸭胚成纤维细胞

DEF:(DuckEmbryoFibroblastCell)

鸭胚肾细胞

DEK:(DuckEmbryoKidneyCell)

鸭肠炎病毒

DEV:(DuckEnteritisVirus)

鸭瘟病毒

DPV:(DuckPlagueVirus)

鸭病毒性肠炎

DVE:(DuckVirusEnteritis)

酶联免疫吸附试验

ELISA:(EnzymeLinkedImmunosorbentAssay)

磷酸盐缓冲液

PBS:(PhosphateBufferSaline)

磷酸盐吐温缓冲液

PBST:(PhosphateBufferSalinewithTween-20)

聚合酶链式反应

PCR:(PolymeraseChainReaction)

无特定病原

SPF:(SpecificPathogenFree)

三羟甲基氨基甲烷乙酸乙二胺四乙酸

TAE:--(TrihydroxymethylAminomethane-aceticAcid-eth-

yleneDiaminetetraAceticAcid)

组织细胞半数感染量

TCID50:(MedianTissueCultureInfectiveDose)

1