DB31/T 954-2015 犬瘟热病毒和犬细小病毒荧光PCR检测方法

ICS6502030

B42..

备案号49128—2016

:

上海市地方标准

DB31/T954—2015

犬瘟热病毒和犬细小病毒荧光PCR

检测方法

MethodofthePCRforthedetectionofcaninedistempervirusand

canineparvovirus

2015-12-11发布2016-03-01实施

上海市质量技术监督局发布

DB31/T954—2015

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由上海市畜牧兽医办公室提出

。

本标准由上海市畜牧业标准化技术委员会归口

。

本标准起草单位上海市动物疫病预防控制中心

:。

本标准主要起草人刘佩红周锦萍鞠厚斌王建刘健葛菲菲杨德全李凯航杨显超邓波

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

DB31/T954—2015

犬瘟热病毒和犬细小病毒荧光PCR

检测方法

1范围

本标准规定了犬瘟热病毒和犬细小病毒荧光的检测方法

PCR。

本标准适用于犬瘟热病毒和犬细小病毒核酸的检测

。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

基因检验实验室技术要求

SN/T1193

3缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

犬瘟热病毒

CDV:(CanineDistemperVirus)

犬细小病毒

CPV:(CanineParvovirus)

值荧光信号量达到设定的阈值时所经历的循环数

Ct:(CycleThresholdValue)

4原理

根据犬瘟热病毒犬细小病毒各特定序列的保守片段分别合成一对特异性引物和一条特异性探

、,

针荧光探针的端标记荧光报告基团端标记荧光淬灭基团端淬灭基团在近

。5’FAM,3’TAMRA,3’

距离内能吸收端报告荧光基团发出的荧光信号但在扩增时由于Taq酶的的外切活性

5’。,5’→3’,

在延伸到荧光探针时将其切断两基团分离淬灭作用消失荧光信号产生因此可通过检测荧光信

,,,,。,

号对核酸模板进行检测

。

5设备与试剂

51仪器

.

511实时荧光仪

..PCR。

512仪

..PCR。

513台式冷冻离心机离心力g以上

..(12000)。

514水浴锅

..。

515冰箱和两种

..(2℃~8℃-20℃)。

516可调移液器及配套带滤芯吸头

..(2μL、10μL、100μL、200μL、1mL)。

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