T/ZHCA 015-2022 化妆品紧致功效评价 斑马鱼幼鱼弹性蛋白基因相对表达量法

ICS7110070

Y42..

团体标准

T/ZHCA015—2022

化妆品紧致功效评价

斑马鱼幼鱼弹性蛋白基因相对表达量法

Firmnessefficacyevaluationofcosmetics—

Methodforrelativeexpressionofelastingeneinzebrafishlarvae

2022-01-25发布2022-03-15实施

浙江省健康产品化妆品行业协会发布

T/ZHCA015—2022

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由杭州环特生物科技股份有限公司提出

。

本文件由浙江省健康产品化妆品行业协会归口

(ZHCA)。

本文件主要起草单位杭州环特生物科技股份有限公司云南贝泰妮生物科技集团股份有限公司

:、、

浙江养生堂天然药物研究所有限公司广东立创检测技术服务有限公司

、。

本文件参与起草单位国珍健康科技北京有限公司杭州睿道医药科技有限公司杭州希科检测

:()、、

技术有限公司华测检测认证集团股份有限公司纳爱斯浙江科技有限公司片仔癀上海生物科技研

、、、()

发有限公司完美广东日用品有限公司浙江雅露生物科技有限公司

、()、。

本文件主要起草人沈佳琪周示玉安晓虹丁雪盈罗志焕万洁李海龙厉昌海刘涛权琰

:、、、、、、、、、、

赵玥高业成张立发

、、。

Ⅰ

T/ZHCA015—2022

化妆品紧致功效评价

斑马鱼幼鱼弹性蛋白基因相对表达量法

1范围

本文件规定了一种用于评价化妆品紧致功效的方法

。

本文件适用于化妆品及其原料紧致功效的评价

。

本文件仅适用于能溶解于水或能均匀分散成悬浮水溶液的受试物

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

化学品鱼类延长毒性天试验

GB/T2180814

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

受精后天数daypost-fertilizationdpf

;

斑马鱼受精卵受精后的天数

。

32

.

最大耐受浓度maximumtoleratedconcentrationMTC

;

的斑马鱼幼鱼未出现死亡无心跳和其他毒性效应心包水肿躯干弯曲肌肉纹理不清晰

5dpf()(、、、

对机械刺激无反应等的最高浓度

)。

4方法原理

弹性蛋白是皮肤组织中弹性纤维的主要成分能为肌肤提供结构性支撑与皮肤的紧致和弹性密切

,,

相关弹性蛋白的两种肽段分别由基因elneln编码这两种基因的表达水平将影响皮肤紧致程度

。1、2,。

斑马鱼具有与人类相似的弹性蛋白基因elneln用荧光定量法检测斑马鱼体内的elneln

(1、2),PCR1、2

基因表达量采用-△△Ct法比较受试物测试组与空白对照组的弹性蛋白基因表达变化从而评价受试

,2,

物的紧致功效

。

5材料和试剂

除非另有说明所用试剂均为分析纯实验用水应符合对水质的要求

,。GB/T21808。

51斑马鱼幼鱼野生型品系斑马鱼的幼鱼

.:AB。

52标准稀释水按附录中描述的方法配制

.:A。

1

T/ZHCA015—2022

53肌肽纯度

.(L-Carnosine,CAS:305-84-0,≥98%)。

54阳性对照样品的肌肽称取肌肽加入标准稀释水溶解

.(20mg/mL):0.200g(5.3),10mL(5.2),

必要时进行超声处理完全溶解后备用

,。

55助溶剂二甲亚砜

.:(Dimethylsulfoxide,DMSO,CAS:67-68-5)。

56荧光染料试剂盒

.SYBRGreen。

57反转录试剂盒

.。

58快速提取试剂盒

.RNA。

59引物序列

.(10μmol/L):

β-actin上游

:5’-TCGAGCAGGAGATGGGAACC-3’,

下游

5’-CTCGTGGATACCGCAAGATTC-3’;

eln上游

1: