DB37/T 3474-2018 土壤中12种有机磷农药及代谢物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法

ICS13.080

B10

DB37

山东省地方标准

DB37/T3474—2018

土壤中12种有机磷农药及代谢物残留量的

测定液相色谱-质谱/质谱法

Determinationof12organophosphorouspesticidesandmetabolitesresiduesinsoil

Liquidchromatography-massspectrometry

2018-12-29发布2019-01-29实施

山东省市场监督管理局发布

DB37/T3474—2018

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由山东省农业农村厅提出并监督实施。

本标准由山东省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：山东省农药检定所。

本标准主要起草人：周力、韩帅兵、张耀中、李向阳、姜士聚、吴亚玉、迟归兵、鞠易明、杨扬、

林得平、于淼。

I

DB37/T3474—2018

土壤中12种有机磷农药及代谢物残留量的测定液相色谱-质谱/质

谱法

1范围

本标准规定了土壤中12种有机磷农药及代谢物残留量的液相色谱-质谱/质谱检测方法。

本标准适用于土壤中甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧乐果、噻唑磷、甲拌磷、甲拌磷砜、甲拌磷亚砜、三

唑磷、二嗪磷、辛硫磷、丙溴磷、毒死蜱残留量的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

土壤样品中残留的有机磷农药及代谢物经乙腈提取，盐析离心，分散固相萃取净化，用液相色谱-

质谱/质谱仪检测，外标法定量。

4试剂与材料

除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水。

4.1试剂

4.1.1甲醇（CH3OH，65-56-1）：色谱纯。

4.1.2乙腈（CH3CN，75-05-8）：色谱纯。

4.1.3甲酸（HCOOH，64-18-6）：色谱纯。

4.1.4乙酸铵（CH3COONH4，631-61-8）：色谱纯。

4.1.5氯化钠（NaCl，7647-14-5）。

4.2溶液配制

0.02%甲酸水溶液（含5mmol/L乙酸铵）：准确移取0.2mL甲酸和称取0.385g乙酸铵于1000mL

容量瓶中，用水定容至刻度，现配现用。

4.3标准品

12种有机磷农药及代谢物标准物质，纯度≥95%。

4.4标准溶液配制

1

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4.4.1标准储备溶液

分别准确称取适量（精确至0.1mg）12种有机磷农药及代谢物标准品于10mL容量瓶中，用甲醇溶

解并定容至刻度，配制成浓度约为100mg/L的标准储备溶液，0～4℃保存，保存期为6个月。

4.4.2中间标准溶液

准确吸取适量标准储备溶液（4.4.1），用甲醇稀释配制成10mg/L的中间标准溶液，0～4℃保存，

保存期为1个月。

4.4.3混合标准工作溶液

准确吸取适量中间标准溶液（4.4.2），用甲醇稀释配制成所需浓度的混合标准工作溶液，现配现

用。

4.5材料

4.5.1有机滤膜：0.22μm。

4.5.2分散固相萃取净化管（DispersiveSPE15mL，RruitsandVeg，EN1))。

5仪器和设备

5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。

5.2分析天平：精度0.01g和0.0001g。

5.3回旋式振荡器。

5.4离心机：最大转速为6000r/min。

5.5旋转蒸发仪。

5.6旋涡混合器。

5.7真空泵。

5.8具塞离心管：100mL。

5.9量筒：50mL。

5.10鸡心瓶：25mL。

5.11刻度离心管：10mL。

6试样制备

取土壤样品约500g，除去土壤中的碎石、杂草和植物根茎等杂物后，过1mm试验筛，均分成三份

作为试样，分装至洁净的容器内，密封并做好标识，于-18℃以下冷冻保存。在试样制备过程中，应防

止样品污染或发生残留物含量的变化。

7分析步骤

7.1提取

1)DispersiveSPE15mL，FruitsandVeg，EN净化管为Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方

便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

2

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称取10g试样（精确至0.01g），置于100mL离心管中，加入5mL水，再准确加入20.0mL乙腈，

在回旋式振荡器上震摇30min。加入3g～5gNaCl，再剧烈震荡30s，在离心机中以4500r/min离心5

min，待净化。

7.2净化

移取约7mL上层提取液至分散固相萃取净化管（4.5.2）中，在旋涡混合器上涡旋1min，在离心机

中以4500r/min离心3min。准确移取4.00mL上层清液至鸡心瓶中，于40℃水浴减压浓缩至干，用甲

醇定容到1.0mL，经0.22μm滤膜过滤，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。

7.3测定

7.3.1液相色谱-质谱/质谱参考条件

7.3.1.1色谱柱：Shim-packXR-ODSⅢ2.0mm（i.d）×75mm，1.6μm，或相当者。

7.3.1.2流动相及梯度洗脱条件见表1。

表1流动相及梯度洗脱条件

时间/min流速/（mL/min）流动相A（甲醇）/%流动相B（0.02%甲酸+5mmol/L乙酸铵水溶液）/%

0.000.351090

0.500.351090

2.000.356040

5.000.356040

9.000.35955

11.500.35955

12.000.351090

7.3.1.3柱温：40℃。

7.3.1.4进样量：0.5μL。

7.3.1.5质谱仪参数：参见附录A。

7.3.1.6监测离子对、碰撞电压：参见附录B。

7.3.2定性测定

在相同实验条件下，试样中被测物的色谱峰保留时间与标准工作液相同，并且在扣除背景后的试样

谱图中，所选择的离子对均出现，各定性离子的相对丰度与标准品离子的相对丰度相比，偏差不超过表

2规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。

表2定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差

相对离子丰度>50%>20%至50%>10%至20%≤10%

允许的相对偏差±20%±25%±30%±50%

7.3.3定量测定

本标准中液相色谱-质谱/质谱采用外标法定量测定。为减少基质对定量测定的影响，本方法采用空

白样品溶液配制基质混合标准工作溶液，并且应保证所测样品中农药及代谢物的响应值均在仪器的线性

范围以内。对混合基质标准溶液和样液等体积参插进样测定。12种有机磷农药及代谢物多反应监测

3

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（MRM）色谱图参见附录C。

7.4平行试验

按以上步骤对同一试样进行平行试验。

7.5空白试验

除不称取试样外，均按上述步骤进行。

8结果计算

液相色谱-质谱/质谱测定结果可由计算机按外标法自动计算，也可按式(1)计算：

VA×××VV

1X35.................................(1)

ωρ=×S

V24×AVmS××

式中：

ω——试样中每种被测组分残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；

ρS——标准溶液质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；

V1——提取溶液总体积，单位为毫升（mL）；

V2——净化后吸取出用于浓缩的提取溶液体积，单位为毫升（mL）；

V3——样品定容体积，单位为毫升（mL）；

V4——待测液进样体积，单位为微升（μL）；

V5——标准溶液进样体积，单位为微升（μL）；

AS——标准溶液的峰面积；

AX——待测液的峰面积；

m——试样质量，单位为克（g）；

注：计算结果应扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。

9精密度

9.1在重复性条件下，两次独立测定结果的绝对差不大于重复性限（r），重复性限（r）的数据按照

附录D。

9.2在再现性条件下，两次独立测定结果的绝对差不大于再现性限（R），再现性限（R）的数据按照

附录E。

10定量限和回收率

10.1定量限

本方法中12种有机磷农药及代谢物在土壤中定量限均为0.001mg/kg。

10.2回收率

本方法的添加水平和回收率范围见附录F。

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AA

附录A

（资料性附录）

质谱仪参数2)

液相色谱-质谱/质谱仪的质谱仪参数：

a)扫描方式：正离子扫描；

b)检测方式：多反应监测；

c)离子源：电喷雾离子源（ESI）；

d)电离电压：4.0kV；

e)加热块温度：400℃；

f)DL管温度：250℃；

g)检测器电压：1.74kV；

h)碰撞气：氩气；

i)碰撞气压力：0.23Mpa；

j)雾化气流速：3.0L/min；

k)干燥气流速：10.0L/min；

l)加热气流速：10.0L/min。

2)非商业性声明：所列参数是在岛津LCMS-8050液相色谱串联质谱仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为

了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。

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