GA/T 1905-2021 法庭科学 生物检材中溴敌隆等14种抗凝血鼠药检验 液相色谱-质谱法

ICS13310

CCSA.92

中华人民共和国公共安全行业标准

GA/T1905—2021

法庭科学生物检材中溴敌隆等14种

抗凝血鼠药检验液相色谱-质谱法

Forensicsciences—Examinationmethodsfor14anticogulantrodenticides

includingbromadioloneinbiologicalsamples—LC-MS

2021-10-14发布2022-05-01实施

中华人民共和国公安部发布

GA/T1905—2021

法庭科学生物检材中溴敌隆等14种

抗凝血鼠药检验液相色谱-质谱法

1范围

本文件规定了法庭科学生物检材血液尿液中种抗凝血鼠药的液相色谱质谱检验

(、)14-(LC-MS)

方法

。

本文件适用于法庭科学生物检材血液尿液中种抗凝血鼠药的定性分析和定量分析其他检

(、)14。

材可参照使用

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

毒物分析名词术语

GA/T122

3术语和定义

界定的术语和定义适用于本文件

GA/T122。

4原理

以空白样品和添加样品作对照按平行操作的要求对生物检材中种抗凝血鼠药见附录进

,,14(A)

行提取后采用液相色谱三重四极杆串联质谱或液相色谱高分辨质谱检测用外标法进行定量

,--,。

5试剂和材料

51试剂

.

实验用水应符合中规定的一级水除非另有说明在分析中使用的试剂均为色谱

GB/T6682。,

纯试剂包括

,:

乙腈

a);

甲醇

b);

甲酸铵

c);

甲酸铵溶液称取甲酸铵加水溶解稀释至

d)5mmol/L:0.315g,1000mL;

标准溶液

e):

单一标准物质储备溶液根据种抗凝血鼠药标准物质纯度和盐型换算

1)0.1mg/mL:14

后各称取适量用甲醇分别配制成单一标准物质储备溶液混匀密封

,,0.1mg/mL,,,

1

GA/T1905—2021

以下保存有效期个月或采用市售单一标准溶液

-18℃,12;;

单一标准物质工作溶液移取的种抗凝血鼠药的单一标准物质储备溶

2):0.1mg/mL14

液用甲醇分别配制成单一标准物质工作溶液密封保存有效期

,1.0μg/mL,,0℃~4℃,

个月实验中所用其他浓度的单一标准工作溶液均由单一标准物质储备

6;,0.1mg/mL

溶液用甲醇稀释得到

;

混合标准物质工作溶液分别移取的种抗凝血鼠药的单一标准物质储备

3):0.1mg/mL14

溶液用甲醇配制成浓度分别为

,500.0ng/mL、250.0ng/mL、125.0ng/mL、50.0ng/mL、

的混合标准物质工作溶液密封保存有效期个月实验中所用

25.0ng/mL,,0℃~4℃,3;

其他浓度的混合标准物质工作溶液均由单一标准物质工作溶液用甲醇配制得到

,;

质控标准溶液分别移取杀鼠灵噻鼠灵和敌鼠的单一标准物质储备溶液用甲醇配制成

4):、,

浓度为的质控标准溶液密封保存有效期个月

1.0g/mL,,0℃~4℃,3。

注可根据实际需要选择μ质控标准溶液中抗凝血鼠药的种类

:。

52材料

.

材料包括

:

具盖离心管

a);

玻璃试管

b);

量筒

c);

容量瓶

d);

有机微孔滤膜

e):0.22μm。

6仪器和设备

仪器和设备包括

:

液相色谱高分辨质谱仪配有电喷雾离子源

a)-:(ESI);

液相色谱三重四极杆串联质谱仪配有电喷雾离子源

b)-:(ESI);

振荡器

c);

电子天平实际分度值d

d):≤0.01mg;

离心机

e);

移液器

f)。

7操作方法

71定性分析

.

711样品前处理

..

7111蛋白沉淀

...

移取血液等液体检材样品于具盖离心管中加入乙腈振荡不低于

0.5mL,1.5mL,5min,

离心取上清液经有机微孔滤膜过滤作为检材样品提取液供仪器检测必要时

8000r/min10min,,,,。

可将滤液挥干用等体积初始流动相溶解

,。

注检材样品取样量和乙腈体积可根据实际情况调整

:。

2

GA/T1905—2021

7112质控样品制备

...

取等量相似基质的空白样品若无相似基质空白样品可用血液替代两份于具盖离心管中一份作

(),

为空白样品一份添加质控标准溶液使其中杀鼠灵噻鼠灵和敌鼠的浓度均为作为添加

,,、10.0ng/mL,

样品与检材样品平行操作得到空白样品提取液和添加样品提取液供仪器检测

,,,。

注可根据实际需要选择质控标准溶液中抗凝血鼠药的种类

:。

712仪器检测

..

7121仪器条件

...

71211液相色谱-高分辨质谱仪条件

....

以下为参考条件可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整

,:

色谱柱或其他等效柱

a):HypersilGold(2.1mm×100mm,1.9μm)C18;

注柱为公司产品的商品名称给出这一信息是为了方便本文件的使用者并不是表示对该

:HypersilGoldThermo,,

产品的认可如果其他等效产品具有相同的效果则可使用这些等效产品

。,。

柱温

b):30℃;

流动相流动相为甲醇流动相为甲酸铵溶液

c):A,B5mmol/L;

流速

d):0.2mL/min;

洗脱梯度洗脱梯度洗脱条件见表

e):,1;

表1梯度洗脱条件

时间

流动相流动相

AB

min

0.020%80%

3.020%80%

14.0095%5%

20.0095%5%

20.0020%80%

25.0020%80%

扫描方式负离子扫描2

f):(FullMS,TargetMS);

采集范围

g):50Da~750Da;

一级质谱分辨率

h):70000;

二级质谱分辨率

i):17500;

喷雾电压

j):2.5kV;

电压

k)S-lensRF:60V;

毛细管为温度

l):350℃;

鞘气压力氮气

m):()40Arb;

辅助气体压力氮气

n):()5Arb;

辅助气温度

o):105℃;

进样量

p):5μL;

3

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质谱定性定量离子和归一化碰撞能量条件见表

q)、2。

表2质谱定性定量离子和归一化碰撞能量条件

、

定性离子理论精确质荷比

定量离子理论

目标物归一化碰撞能量

-二级质谱特征离子精确质荷比

[M-H]

eV

溴敌隆250.0632

525.070745525.0707

272.9920

溴鼠灵135.0436

521.075845521.0758

187.0389

杀鼠灵161.0229

307.097640307.0976

250.0631

氯灭鼠灵284.0239

341.058640341.0586