T/ZHCA 012-2021 化妆品美白功效测试 斑马鱼胚胎黑色素抑制功效测试方法

ICS7110070

Y42..

团体标准

T/ZHCA012—2021

化妆品美白功效测试

斑马鱼胚胎黑色素抑制功效测试方法

Whiteningefficacytestofcosmetics—

Zebrafishembryostestmethodofmelanininhibition

2021-04-28发布2021-06-01实施

浙江省健康产品化妆品行业协会发布

T/ZHCA012—2021

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由杭州环特生物科技股份有限公司提出

。

本文件由浙江省健康产品化妆品行业协会归口

(ZHCA)。

本文件主要起草单位杭州环特生物科技股份有限公司广东完美生命健康科技研究院有限公司

:、、

云南贝泰妮生物科技集团股份有限公司浙江养生堂天然药物研究所有限公司浙江省食品药品检验研

、、

究院

。

本文件参与起草单位国珍健康科技北京有限公司杭州百芮生物科技有限公司杭州睿道医药

:()、、

科技有限公司启迪禾美生物科技嘉兴有限公司浙江方圆检测集团股份有限公司广东立创检测技

、()、、

术服务有限公司

。

本文件主要起草人周示玉朱晓宇毛新亮安晓虹方国珊匡荣万洁蒋水萍李海龙李钧翔

:、、、、、、、、、、

胡丹罗志焕

、。

Ⅰ

T/ZHCA012—2021

化妆品美白功效测试

斑马鱼胚胎黑色素抑制功效测试方法

1范围

本文件规定了一种用于评价化妆品美白功效的快速检测方法

。

本文件适用于化妆品产品和原料美白功效的快速检测要求受试物能溶解于水或能制备成能在水

,

中均匀分散的悬浮液

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

化学品鱼类延长毒性天试验

GB/T2180814

3术语及定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

受精后小时数hourpost-fertilizationhpf

;

是指斑马鱼受精卵受精后的小时数

。

32

.

最大耐受浓度maximumtoleratedconcentrationMTC

;

以的斑马鱼胚胎未出现任何死亡无心跳卵凝结眼芽缺失对机械刺激无反应尾部未分

51hpf(、、、、

离等和其他毒性效应心包水肿躯干弯曲肌肉纹理不清晰等的浓度

)(、、)。

4方法原理

斑马鱼胚胎在发育初期全身透明胚胎发育至时黑色素开始从视网膜上皮细胞处生长色素

,24h。

细胞起源于背部外胚层分化的神经嵴细胞然后增殖迁徙分化成色素母细胞用受试物干预斑马鱼

,、、。

的黑色素形成过程可抑制黑色素的生成将恒温孵育至终点的受试物组与空白对照组进行比较以光

,。,

密度值表示斑马鱼头部黑色素信号强度计算受试物对于黑色素的抑制效率评

(OpticalDensity,OD),,

价化妆品产品或原料的美白功效

。

5试剂和材料

除非另有说明所用试剂均为分析纯水为新制蒸馏水或去离子水为电导率

,。,pH6.5~8.5,

≤10μS/cm。

51斑马鱼胚胎野生型品系斑马鱼的胚胎

.:AB。

1

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52甲基纤维素

.(Methylcellulose,CAS:9004-67-5)。

53甲基纤维素称取甲基纤维素缓慢加入到沸水中边加边搅拌待甲基纤维

.3%:3.0g(5.2),97.0g,,

素完全溶解后停止加热继续搅拌冷却至室温用铝箔纸密封烧杯口放在冰箱保存

,,,,4℃。

54标准稀释水按附录中描述的方法配制

.:A。

55阳性对照样品的熊果苷纯度

.:3.0mg/mLβ-(Arbutin,CAS:497-76-7,≥98%)。

56助溶剂二甲亚砜

.:(Dimethylsulfoxide,DMSO,CAS:67-68-5)。

6仪器和设备

61生化培养箱带有温控和进风装置温度控制范围精度

.:,5℃~50℃,±0.1℃。

62电子天平分度值为

.:0.001g。

63六孔细胞培养板平底

.,。

64体视显微镜自带白光光源最小放大倍数为倍

.:,20。

65显微镜拍照系统像素不低于万

.:2000。

66图像分析软件或相当者

.:ImageJ。

67一般实验室常用器皿和设备

.。

7试验准备

71受试物储备液制备

.

根据受试物的自身特性用标准稀释水配制成一定浓度的受试物储备溶液