WS/T 491-2016 梅毒非特异性抗体检测操作指南

ICS11020

C50.

中华人民共和国卫生行业标准

WS/T491—2016

梅毒非特异性抗体检测操作指南

Guidelineoftestmethodofnon-specificantibodiesfor

treponemalpalliduminfection

2016-07-07发布2016-12-15实施

中华人民共和国卫生和计划生育委员会发布

WS/T491—2016

目次

前言

…………………………Ⅲ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

缩略语

4……………………1

检测原理

5…………………1

原理

5.1…………………1

方法

5.2…………………2

仪器耗材

6…………………2

微量移液器

6.1…………………………2

水平旋转仪

6.2…………………………2

样品采集器

6.3…………………………3

样品容器

6.4……………3

反应板

6.5………………3

专用抗原滴针

6.6………………………3

样品采集和保存

7…………………………3

采集处理

7.1……………3

样品检查

7.2……………4

保存

7.3…………………4

试验操作步骤

8……………4

总述

8.1…………………4

定性试验

8.2RPR/TRUST-……………5

半定量试验

8.3RPR/TRUST-…………5

试验

8.4VDRL…………………………5

结果描述和表示

9…………………………7

定性试验

9.1……………7

半定量试验

9.2…………………………7

报告格式

9.3……………7

质量控制

10…………………7

基本要求

10.1……………7

对照品

10.2………………8

质控品

10.3………………8

反应板

10.4………………8

专用滴针

10.5……………9

结果判定

10.6……………9

室内质量控制和室间质量评价

10.7……………………9

临床意义

11…………………9

辅助诊断

11.1……………9

Ⅰ

WS/T491—2016

疗效监测

11.2……………9

局限性

12…………………10

概述

12.1………………10

假阳性反应

12.2………………………10

假阴性反应

12.3………………………10

前带现象

12.4…………………………10

血清固定

12.5…………………………10

血浆样品

12.6…………………………10

附录规范性附录抗干扰性能初步评估

A()……………11

附录规范性附录抗干扰性能评估验证厂家声明

B()———……………12

参考文献

……………………13

Ⅱ

WS/T491—2016

梅毒非特异性抗体检测操作指南

1范围

本标准规定了梅毒非特异性抗体检测的方法试验操作步骤结果描述与表示质量控制等

、、、。

本标准适用于开展梅毒非特异性抗体检测的各类实验室

。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

移液器

JJG646—2006

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

血清固定serofast

少数患者经过足量驱梅治疗梅毒非特异性抗体维持在相对恒定的低滴度状态

,。

注1判断血清固定应具备个要素流行病学病史和临床表现排除复发重新感染连续个随访周期月

:,3:、;2(≥6)

血清抗体维持在滴度范围之内的低滴度水平一般即变化趋势方向不明无实验室的技术性和

±1(≤1∶8),;

方法学误差

。

注2个别患者可终生存在血清固定现象

:。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

脑脊液

CSF:(cerebrospinalfluid)

相对离心力

RCF:(relativecentrifugalforce)

快速血浆反应素环状卡片试验

RPR:(rapidplasmareagincirclecardtest)

甲苯胺红不加热血清试验

TRUST:(toluidineredunheatedserumtest)

性病研究实验室试验

VDRL:(venerealdiseaseresearchlaboratorytest)

5检测原理

51原理

.

感染梅毒螺旋体后被损害的宿主细胞及梅毒螺旋体本身释放的类脂质物质引起宿主产生

,,IgA、

和抗类脂质抗体这种抗体在体外与人工按一定比例配置的含心磷脂卵磷脂和胆固醇的抗

IgMIgG,、

原溶液发生作用产生絮状凝集现象不同反应强度的凝集现象与抗体浓度成正相关在一定程度上反

,,,

映了梅毒感染的活动状态

。

1

WS/T491—2016

52方法

.

521VDRL

..

商品化试剂盒包含抗原缓冲液和说明书

VDRLVDRL、VDRL。

抗原是含有心磷脂卵磷脂和胆固醇的无水乙醇溶液缓冲液含氯化钠甲醛

VDRL、。VDRL、40%

水溶液中性溶液磷酸氢二钠无水和磷酸二氢钾的磷酸盐溶液用缓冲液配置的

()、(),pH6.0±0.1。

抗原工作液与样品中的抗体发生反应在显微镜下观察到絮状凝集

VDRL,。

522RPR

..

商品化试剂盒包含抗原阴阳性反应对照滴针反应板和说明书

、、、。

是一种改良的试验将抗原结合到作为示踪物质的炭颗粒上当抗原与样品中的抗

VDRL,VDRL,

体发生凝集反应肉眼可以观察到黑色的凝集颗粒抗原溶液中添加氯化胆碱起到化学灭活效

,。RPR,

果添加起到稳定试剂性能的作用

,EDTA。

523TRUST

..

商品化试剂盒包含抗原阴阳性反应对照滴针反应板和说明书

、、、。

的检测原理同将抗原结合到作为示踪物质的甲苯胺红染色粒子上当抗原

TRUSTRPR,VDRL,

与样品中的抗体发生凝集反应肉眼可以观察到红色的凝集颗粒抗原溶液中含有氯化胆碱

,。TRUST,

和的作用同

EDTARPR。

6仪器耗材

61微量移液器

.

611基本要求

..

6111宜使用固定式的微量移液器吸取血清血浆和样品以及半定量试验中的无菌生

...50μL,、CSF

理盐水

。

6112宜使用微量移液器吸取和滴加抗原滴加抗原量应符合和或的技术要求

...,6.6.2()6.6.3。

612维护校准

..

6121应定期对微量移液器进行保养和校准保存相应记录

...,。

6122可由生产厂商对微量移液器进行校准并出具报告

...,。

6123可自行制定标准化文件对微量移液器进行比对最大允许误差应符合

...,JJG646—2006。

62水平旋转仪

.

621基本要求

..

6211水平状态转速符合或的要求

...100r/min±2r/min、180r/min±2r/min。

6212时间控制精度符合的要求

...±1s/min。

6213数字化电子控制部件可预设和试验的固定反应程序

...RPR/TRUSTVDRL。

6214水平样品托盘附有夹槽用于固定反应板避免在旋转时反应板滑出水平旋转仪

...,。

6215不应使用旋钮式调节装置的水平旋转仪

...。

2

WS/T491—2016

622维护和校准

..

6221应定期对水平旋转仪进行保养和校准保存相应记录

...,。

6222可由生产厂商对水平旋转仪的转速和时间控制进行校准并出具报告

...,。

6223可自行制定相应的标准化文件进行日常维护

...,。

63样品采集器

.

631采集血液样品时宜使用无添加剂或内壁经硅化处理的真空采集器

..,。

632含有添加剂促凝剂抗凝剂的真空采集器使用前应进行抗干扰性能评估见附录和附录

..(、),(A

B)。

64样品容器

.

641宜采用密闭无菌容器

..、。

642以及分离的血清和血浆样品可使用玻璃试管塑料试管离心管存放

..CSF,、、。

643新鲜全血样品不应直接注入普通塑料试管收集否则将导致血块收缩不良

..,。

65反应板

.

651VDRL反应板

..

6511宜使用专用反应板进行试验替代反应板应符合和的反应圆圈直径和

...VDRL,

防溢要求

。

6512用于血清样品检测的反应板上有直径的反应圆圈沿圆圈边缘的胶漆或陶瓷防溢环可

...14mm,

防止旋转时液体溢出反应孔中间透明便于直接在显微镜下观察

,,。

6513用于样品检测的反应板上有直径的反应圆圈反应孔中间为深度凹面

...CSF16mm,1.75mm,

防止旋转时液体溢出

。

652RPR/TRUST反应板

..

6521商品化试剂盒中的反应板上有若干个直径的反应圆圈

...18mm。

6522沿反应圆圈内侧边缘可呈凹面防止旋转时液体溢出

...,。

66专用抗原滴针

.

661专用抗原滴针的内外壁宜经硅涂层处理

..。

662用于血清和血浆样品检测时专用抗原滴针每次滴出的抗原量是或符合滴

..,17μL,59/mL±

滴的技术要求

1/mL。

663用于样品检测时专用抗原滴针每次滴出的抗原量是或符合滴滴

..CSF,10μL,100/mL±2/mL

的技术要求

。

7样品采集和保存

71采集处理

.

711血清

..

血清样品适用于的定性试验和半定量试验采集步骤如下

RPR、TRUST、VDRL。:

用真空采集器或一次性注射器抽取静脉血液

a)(),3mL~5mL;

3

WS/T491—2016

待血液凝固血块收缩后g