DB34/T 3300-2018 生活饮用水源水中11种藻毒素的测定 高效液相色谱串联质谱法

ICS65.100

B25

DB34

安徽省地方标准

DB34/T3300—2018

生活饮用水源水中11种藻毒素的测定

高效液相色谱串联质谱法

Determinationof11kindsofalgaltoxinsofdrinkingwatersourceHPLC/MS/MS

method

文稿版次选择

2018-12-29发布2019-01-29实施

安徽省市场监督管理局发布

DB34/T3300—2018

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由安徽省环境监测中心站提出。

本标准由安徽省动植物检验检疫标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：安徽省环境监测中心站、安徽省检验检疫科学技术研究院

本标准主要起草人：赵彬、张付海、张敏、王昭、丁磊、胡雅琴、唐晓菲、田丙正、朱超、王鑫、

杨晓冉、郑平。

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DB34/T3300—2018

生活饮用水源水中11种藻毒素的测定高效液相色谱串联质谱法

1范围

本标准规定了生活饮用水源水中11种藻毒素的高效液相色谱-串联质谱法。

本标准适用于城乡集中式生活饮用水和分散式生活饮用水源水中9种微囊藻毒素（MCs，包括

MC-RR、MC-YR、MC-HtyR、MC-LR、MC-WR、MC-LA、MC-LY、MC-LW和MC-LF）、一种节球藻毒素(NOD)和一

种拟柱胞藻毒素(CYN)共11种藻毒素的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

HJ/T91地表水和污水监测技术规范

HJ/T164地下水环境监测技术规范

3方法原理

水中藻毒素经固相萃取柱富集、净化后，用甲醇甲酸溶液洗脱，高效液相色谱串联质谱法测定，外

标法定量。

4试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。

4.1乙腈（C2H3N）：色谱纯。

4.2甲醇（CH3OH）：色谱纯。

4.3甲酸（CH2O2）：色谱纯。

4.4洗脱液：甲醇-0.2％甲酸水溶液（9/1，V/V）。

——取0.2ml甲酸（4.3）用水稀释至100ml，再加入900ml甲醇（4.2），混匀。

4.5盐酸（HCl）：ρ（HCl）=1.19g/ml优级纯。

4.6氢氧化钠（NaOH）：优级纯。

4.7盐酸（1+1）溶液：

——用盐酸（4.5）和实验用水按体积比1:1配制。

4.8氢氧化钠溶液：ρ（NaOH）=0.05g/mL。

——取50g氢氧化钠（4.5）溶于少量水中，稀释至1L。

4.9无水硫酸钠（Na2SO4）：优级纯。

——在400℃下灼烧4h，冷却后装入磨口玻璃瓶中，置于干燥器中保存。

4.10抗坏血酸（C6H8O6）。

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4.11固相萃取柱：填料为二乙烯苯和N-乙烯基吡咯烷酮共聚物（HLB）或同等柱效的萃取柱，规格为

6mL/500mg。

4.1211种藻毒素标准物质：纯度≥95％。

4.13标准物质储备溶液

——分别称取适量（精确至10mg）标准物质（4.9）于10mL容量瓶中，用乙腈配制成浓度为10

mg/L的标准储备溶液。

——在0℃-4℃冰箱中可以保存12个月。

4.14有机滤膜：0.22μm或其它等效滤膜。

4.15氮气（N2）：纯度≥99.99％。

5仪器和设备

5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)。

5.2采样瓶：1L或2L具塞棕色磨口玻璃瓶。

5.3分析天平：感量0.1mg和0.01g。

5.4浓缩装置：氮吹仪、旋转蒸发仪或者其它等效装置。

5.5固相萃取装置：手动或自动，流速可调。

5.6超声波清洗器。

5.7超纯水系统。

6样品的采集、保存和制备

6.1样品的采集和保存

按HJ/T91和HJ/T164的相关规定进行水样的采集和保存。用采样瓶（5.2）采集样品，采样瓶

要完全注满，不留气泡。用甲酸（4.3）调至pH≤2，若水中有余氯存在，要在每升水中加入50mg抗

坏血酸（4.5）除氯。样品采集后应避光于5℃以下冷藏，在7天内萃取。

6.2试样的制备

6.2.1萃取

先依次用5mL甲醇（4.2）、5mL水清洗平衡活化固相萃取柱（4.11）。量取1000mL水样，

用氢氧化钠溶液（4.8）或盐酸溶液（4.7）调节pH值至中性后加入10mL甲醇（4.2）。水样通过活

化后固相萃取柱（4.11）的流速为10mL/min左右，水样富集后，用氮气（4.15）干燥固相萃取柱（4.11）。

再用15mL洗脱液（4.4）洗脱富集后的小柱，收集洗脱液，用无水硫酸钠（4.9）脱水，待浓缩。

6.2.2浓缩

用浓缩装置（5.5）浓缩萃取液（6.2.1），准确用流动相定容至1.00mL，待测。

注：萃取洗脱液如果不能及时进行测定，应在5℃下避光保存，30天内完成分析。

6.3空白试样的制备

用实验用水代替实际样品，按与试样制备（6.2）相同步骤制备实验室空白试样。

7分析步骤

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7.1仪器参考分析条件

7.1.1液相色谱参考条件

其中：

a)色谱柱：C18,50mm×2.1mm，1.7µm或相当者；

b)样品室温度：10℃。柱温箱温度：40℃；

c)进样量：10μL；

d)流动相A：乙腈，流动相B：超纯水-0.2％甲酸。

采用线性梯度洗脱及流速条件见表1。

表1液相色谱线性梯度洗脱条件

时间乙腈超纯水-0.2％甲酸流速