T/CAICC 05-2021 中药材中水胺硫磷的快速检测 胶体金免疫层析法

范围:本方法规定了中药材中水胺硫磷的胶体金免疫层析快速检测方法。 本方法适用于柴胡、当归、党参、板蓝根、甘草、黄芪等中药材中水胺硫磷的快速测定; 主要技术内容:3原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的水胺硫磷经提取后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体和试纸条中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与质控线（C线）颜色深浅比较，对样品中水胺硫磷进行定性判定。4试剂与材料4.1试剂除另有说明外，所有试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T 6682中二级水的要求。4.1.1甲醇（CH3OH）。4.1.2提取液：由胶体金免疫层析试纸条配套提供，或按照其说明书配制。4.1.3参考物质：水胺硫磷参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度≥98%。表1水胺硫磷参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量水胺硫磷Isocarbophos24353-61-5C11H16NO4PS289.3注：或等同可溯源物质。4.2溶液配制4.2.1水胺硫磷标准储备液（100 μg/mL）：准确称取水胺硫磷参考物质（4.1.3）1 mg，置于10 mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为100 μg/mL的水胺硫磷标准储备液。4℃避光保存，有效期6个月。4.2.2水胺硫磷标准工作液（1 μg/mL）：精密移取水胺硫磷标准储备液（100 μg/mL）（4.2.1）0.1 mL，置于10 mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1 μg/mL的水胺硫磷标准工作液。临用新配。4.3材料水胺硫磷胶体金免疫层析试纸条，适用基质为中药材。需在阴凉、干燥、避光条件下保存。5仪器与设备5.1电子天平：感量为0.01 g。5.2均质器。5.3离心机。5.4氮吹仪。5.5涡旋仪。5.6移液器：10 μL~200 μL、100 μL~1000 μL。6分析步骤6.1试样制备取适量代表性样品，充分均质混匀。6.2试样提取6.2.1党参、板蓝根、黄芪、甘草样本称取1 g试样（精确至0.05 g）放入离心管中，加入6 mL提取液（4.1.2），上下振荡30 s，3000 r/min以上离心3 min，上清液即为待测液。6.2.2柴胡、