DB37/T 4050-2020 中兽药散剂中添加磺胺类药物的测定 超高效液相色谱-串联质谱法

ICS11.220

B41

DB37

山东省地方标准

DB37/T4050—2020

中兽药散剂中添加磺胺类药物的测定

超高效液相色谱-串联质谱法

Determinationofsulfonamidesaddedtochineseveterinarydrugpowder

—Ultra-highperformanceliquidchromatographytandemmassspectrometry

2020-07-09发布2020-08-09实施

山东省市场监督管理局发布

DB37/T4050—2020

目次

前言................................................................................II

1范围..............................................................................1

2规范性引用文件....................................................................1

3原理..............................................................................1

4试剂或材料........................................................................1

5仪器设备..........................................................................2

6试验步骤..........................................................................2

6.1阴性样品......................................................................2

6.2提取..........................................................................2

6.3仪器参考条件..................................................................2

6.4测定..........................................................................3

7试验数据处理......................................................................3

8精密度............................................................................4

附录A（资料性附录）磺胺类药物特征离子参考质量色谱图................................5

I

DB37/T4050—2020

前言

本标准按照GB/T1.1－2009给出的规则起草。

本标准由山东省畜牧兽医局提出并组织实施。

本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：山东省兽药质量检验所、威海市畜牧业发展中心。

本标准主要起草人：魏秀丽、徐恩民、张传津、张志民、尹伶灵、刘霄飞、陈玲、王燕、陈志强、

赵国清。

II

DB37/T4050—2020

中兽药散剂中添加磺胺类药物的测定超高效液相色谱-串联质谱

法

1范围

本标准规定了中兽药散剂中磺胺类药物的超高效液相色谱-串联质谱测定方法。

本标准适用于中兽药散剂（白头翁散，黄连解毒散、清瘟败毒散）中添加磺胺嘧啶、磺胺甲基异噁

唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺喹噁啉的测定。

本方法的检出限为0.2mg/g，定量限为0.5mg/g。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

中兽药散剂中添加的磺胺类药物经提取后，超高效液相色谱-串联质谱测定，依据保留时间和离子

丰度比定性，外标法定量。

4试剂或材料

除非另有规定，所用试剂均为色谱纯。

4.1水符合GB/T6682一级水的规定。

4.2乙腈（CH3CN）：色谱纯。

4.3甲酸（HCOOH）：色谱纯。

4.4甲醇（CH3OH）：色谱纯。

4.5流动相：

——流动相A（0.1%甲酸水溶液）：吸取甲酸（4.3）1.0mL，加水稀释至1000mL，过0.22µm

微孔滤膜备用；

——流动相B(0.1%甲酸乙腈)：吸取甲酸（4.3）1.0mL，加乙腈（4.2）稀释至1000mL，过

0.22μm微孔滤膜备用；

——初始流动相：量取0.1%甲酸乙腈50mL与0.1%甲酸水溶液450mL，混匀，备用。

4.6五种磺胺类药物对照品：磺胺嘧啶，磺胺甲基异噁唑，磺胺间甲氧嘧啶，磺胺二甲嘧啶，磺胺喹

噁啉，纯度≥95.0%。

4.7混合标准储备液：称取五种磺胺类药物对照品（4.6）各10mg（准确至0.01mg），分别置10mL

容量瓶中，加甲醇（4.4）溶解并稀释至刻度，摇匀，得五种磺胺类药物对照品溶液。准确吸取五种磺

1

DB37/T4050—2020

胺类药物对照品溶液各1.0mL，置10mL容量瓶中，加甲醇（4.4）稀释至刻度，摇匀，得混合标准储

备液，4℃冰箱保存，有效期3个月。

4.8标准曲线制备：吸取混合标准储备液适量，用初始流动相稀释，制备成系列浓度为：10ng/mL、

20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL的标准工作液，作标准曲线。100ng/mL工作液作为超高

效液相色谱－串联质谱（UPLC-MS/MS）的对照品溶液。

4.9有机微孔滤膜：0.22μm。

5仪器设备

5.1超高效液相色谱串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。

5.2分析天平：感量0.01g，0.00001g。

5.3离心机：5000r/min。

5.4超声波清洗机。

6试验步骤

6.1阴性样品

未添加五种磺胺类药物的样品。

6.2提取

取试样1g（准确至0.01g），置离心管中，加10mL甲醇，提取5min，5000r/min离心10min，

取上清液，逐级稀释10000倍，用滤膜（4.9）过滤，得UPLC-MS/MS供试品溶液，待测。

6.3仪器参考条件

6.3.1高效液相色谱参考条件

色谱柱：C18，50mm×2.1mm，粒径1.7μm，或性能相当者。

流动相A：0.1%甲酸水溶液。

流动相B：0.1%甲酸乙腈。

流速：0.25mL/min。

进样量：10μL。

柱温：35℃。

液相色谱梯度洗脱条件见表1。

表1液相色谱梯度洗脱条件

时间AB