DB22/T 2929-2018 转基因玉米种cry3类基因定性检测 PCR法

ICS65.020.20

B05

DB22

吉林省地方标准

DB22/T2929—2018

转基因玉米中cry3类基因定性检测PCR法

Qualitativedetectionofcry3typegenesingeneticallymodifiedmaize—PCRmethod

2018-11-12发布2018-12-30实施

吉林省市场监督管理厅发布

DB22/T2929—2018

前言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。

本标准由吉林省农业农村厅提出并归口。

本标准起草单位：吉林省农业科学院。

本标准主要起草人：李飞武、李葱葱、夏蔚、龙丽坤、闫伟、董立明、邢珍娟、谢彦博、刘娜。

I

DB22/T2929—2018

转基因玉米中cry3类基因定性检测PCR法

警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验，本标准并未指出所有可能的安全问

题，使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。

1范围

本标准规定了PCR方法定性检测转基因玉米中cry3类基因的原理、试验条件、试剂或材料、仪

器设备、样品、试验步骤、试验数据处理、检出限、质量保证和控制、试验报告。

本标准适用于转基因玉米MIR604、MON863、MON88017等转化体及其衍生品种的玉米植株、籽粒等

初级产品中cry3类基因的PCR定性检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

NY/T672转基因植物及其产品检测通用要求

DB22/T2527-2016转基因玉米中cry1A基因定性检测PCR法

农业部1485号公告-4-2010转基因植物及其产品成分检测DNA提取和纯化

农业部1861号公告-3-2012转基因植物及其产品成分检测玉米内标准基因定性PCR方法

农业部2031号公告-19-2013转基因植物及其产品成分检测抽样

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

zSSIIb基因zSSIIbgene

编码玉米淀粉合酶异构体zSTSII-2的基因。

3.2

Cry3类基因cry3typegenes

编码苏云金芽孢杆菌（Bacillusthuringiensis）Cry3类杀虫晶体蛋白的一类基因，在本标准中

包括cry3A基因和cry3Bb基因。

4原理

根据转基因玉米中cry3类基因的保守序列设计特异性引物，对试样进行PCR扩增。依据是否扩

增获得预期232bp的DNA片段，判断样品中是否含有cry3类基因成分。

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DB22/T2929—2018

5试验条件

常温条件下。DNA提取、PCR体系配制、PCR扩增、电泳等功能区宜采取物理隔离措施，避免产生

交叉污染。

6试剂或材料

除非另有说明，仅使用分析纯试剂。

6.1水：重蒸馏水或符合GB/T6682规定的二级水。

6.2琼脂糖。

6.310g/L溴化乙锭（EB）溶液：称取1.0g溴化乙锭，溶解于100mL水中，避光保