GB/T 29566-2013 蚊类对杀虫剂抗药性的生物学测定方法

ICS65.100

G25

中华人民共和国国家标准

/—

GBT295662013

蚊类对杀虫剂抗药性的生物学测定方法

’

Thebioassamethodsformosuitoesresistancetoinsecticides

yq

国家标准ㅤ可打印ㅤ可复制ㅤ无水印ㅤ高清原版ㅤ去除空白页

2013-07-19发布2013-12-06实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

发布

中国国家标准化管理委员会

/—

GBT295662013

前言

本标准按照/—给出的规则起草。

GBT1.12009

国家标准ㅤ可打印ㅤ可复制ㅤ无水印ㅤ高清原版ㅤ去除空白页

Ⅰ

/—

GBT295662013

蚊类对杀虫剂抗药性的生物学测定方法

1范围

、。

本标准规定了蚊类对杀虫剂抗药性的成蚊接触法幼虫浸液法和区分剂量法三种生物学测定方法

本标准适用于蚊类对杀虫剂的抗药性监测和群体抗药性程度的测定。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

抗药性resistancetoinsecticides

蚊种的某些群体对某种杀虫剂的耐受量较该蚊种的敏感群体明显增高的能力。

2.2

半数致死剂量medianlethaldosae

g

LD50

杀死测试蚊群体中50%的个体所需要的杀虫剂剂量。

2.3

半数致死浓度国家标准ㅤ可打印ㅤ可复制ㅤ无水印ㅤ高清原版ㅤ去除空白页

medianlethalconcentration

LC

50

杀死测试蚊群体中50%的个体所需要的杀虫剂浓度。

2.4

抗性系数resistantindex

抗性群体的半数致死剂量或半数致死浓度的值()与敏感群体的半数致死剂量或半数致死浓度的

R

()(/)。

值二者之比值

SRS

2.5

成蚊接触法contactmethod

,,,

蚊在接触不同剂量杀虫剂处理的表面后发生中毒或死亡依据剂量与效应关系得出抗性系数用

以判断成蚊对杀虫剂的抗药性。

2.6

幼虫浸液法immersionmethod

,,

将蚊幼虫浸入含有不同浓度杀虫剂的水溶液中蚊幼虫出现中毒或死亡依据剂量与效应关系得出

,。

抗性系数用以判断蚊幼虫对杀虫剂的抗药性

2.7

区分剂量法dianosticdosaemethod

gg

鉴别剂量法

以99.9%敏感群体的致死剂量LD或致死浓度LC测试该蚊种的其他群体对杀虫剂耐受能力

99.999.9

,。

的方法宜用于蚊虫抗性的初步测定

1

/—

GBT295662013

3测定方法

3.1成蚊接触法

3.1.1试虫

3.1.1.1测试蚊

,,;

野外采集幼虫经实验室养殖一代选择羽化后4d未吸血的雌蚊作为测试对象将野外捕捉到的

,,()

雌蚊分成组分别饲喂小白鼠血和葡萄糖水以胃血消化处于谢拉氏期参见附录或喂

25%Ⅲ~ⅣA

糖水饲养12h后的蚊作为测试对象。

3.1.1.2敏感蚊

、。,

实验室常规养殖未接触过杀虫剂的蚊虫根据测试蚊的吸血情况相应选择饲喂小白鼠血后胃血

()雌蚊或羽化后未吸血的雌蚊作为对照。

消化处于谢拉氏Ⅲ~Ⅳ期参见附录A4d

3.1.1.3雌蚊胃血消化期判断

参见附录A。

3.1.2养殖和测试环境条件

();();。

温度26±1℃相对湿度60±10%光照周期L∶D=14h∶10h

3.1.3器具国家标准ㅤ可打印ㅤ可复制ㅤ无水印ㅤ高清原版ㅤ去除空白页

测定过程所需器具主要为:

)接触筒(标准筒见图);

aWHO1

单位为毫米

)立式图)侧视剖面

ab

说明:

———,,,;

A有机玻璃测定筒筒长125mm内径50mm近隔板端有外螺纹

———,;

B有机玻璃恢复筒规格同A

C———尼龙纱封口;

———,,;

D有机玻璃抽板长110mm开有直径35mm的圆孔

———,、。、,,

白色不透明的有机玻璃方隔板由上下两块合并而成每块隔板长宽均为厚中间有直径

E70mm5mm

()。

50mm的圆孔和高10mm的边圈有内螺纹

图接触筒装置

1

2

/—

GBT295662013

),,;

新华号滤纸长宽

b1160mm125mm

),,;

c白纸长140mm宽80mm

)();

d天平感量为0.0001g

)具备瓶塞的锥形瓶,量筒,刻度烧杯,、、、分度

e50mL100mL100mL0.1mL1mL2mL5mL

移液管;

)吸蚊管;

f

)定时器;

g

)计数器。

h

3.1.4试剂和杀虫剂

;();();();。

5%葡萄糖水白油医用级乙醚分析纯丙酮分析纯测试杀虫剂标准品或经标定的原药

3.1.5测定步骤

3.1.5.1药纸制备的方法

,,

用白油和乙醚按1∶2比例混合制备溶剂按需要量溶解杀虫剂标准品或经标定的原药配制成不

()。,,,

同浓度的溶液见附录B分别吸取2.14mL的溶液均匀滴于不同的滤纸上制备成接触滤纸做好

。。,

杀虫剂及其浓度标记用溶剂制备对照滤纸制备成的接触滤纸室温下放置2h后即可应用应在6h

内使用完。

3.1.5.2试虫与药纸的接触方法

用白纸衬贴于恢复筒内壁上//,国家标准ㅤ可打印ㅤ可复制ㅤ无水印ㅤ高清原版ㅤ去除空白页;,