GB/T 29584-2013 黄瓜黑星病菌检疫鉴定方法

ICS65.020.01

B16

中华人民共和国国家标准

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GBT295842013

黄瓜黑星病菌检疫鉴定方法

DetectionandidentificationofCladosoriumcucumerinumEll.etArthur

p

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2013-07-19发布2013-12-06实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

发布

中国国家标准化管理委员会

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GBT295842013

前言

本标准按照/—给出的规则起草。

GBT1.12009

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Ⅰ

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GBT295842013

黄瓜黑星病菌检疫鉴定方法

1范围

本标准规定了黄瓜黑星病菌、

CladosoriumcucumerinumEll.etArthur以植株症状病原菌形态

p

特征为依据的检疫鉴定方法。

、。

本标准适用于黄瓜及其他葫芦科植物的种子秧苗上黄瓜黑星病菌的检疫和鉴定

2规范性引用文件

。,

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,()。

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

/进出境植物苗木检疫规程

SNT1157

/进出境植物种子检疫规程

SNT1809

3黄瓜黑星病菌基本信息

:。

中文名称黄瓜黑星病菌

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学名:。

CladosoriumcucumerinumEll.etArthur1889

p

异名:;

ScolecotrichummelohthorumPrill.&Delacr1891

p

MacnosoriummelohthorumPostru1893;

ppp

CladosoriumcucumerisFrank1893;

p

CladosoriumscabiesCooke1903。

p

病害英文名:。

cucumberscab

,。

属于真菌界Funi有丝分裂孢子真菌Mitosoricfuni该病菌的有性型为子囊菌门球腔菌科

gpg

、。,

Mcoshaerellaceae球腔菌属McoshaerellaJohanson在传统分类上该菌属于半知菌亚门Deu

ypyp-

、、、、

teromcotina丝孢纲Hhomcetes丝孢目Hhomcetales暗色孢科Dematiaceae枝孢属Clados

yypyypy-

porium。

黄瓜黑星病菌的其他信息参见附录A。

4方法原理

、,、、

通过现场检查植株症状实验室检验利用病原菌在寄主植株上的症状病原菌的形态学特征致病

性测定等依据进行鉴定。

5仪器及用具

5.1体视解剖镜。

5.2生物显微镜。

5.3高压灭菌锅。

1

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5.4生物培养箱。

5.5超净工作台。

5.6H计。

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5.7电子天平。

5.8冰箱。

、、、、、。

5.9培养皿镊子解剖刀载玻片盖玻片酒精灯

6试剂和培养基

6.1次氯酸钠。

6.2葡萄糖。

6.3琼脂。

6.4酒精。

:,,。,,

6.5PDA培养基马铃薯200葡萄糖20琼脂17~20马铃薯切块煮沸10min纱布过滤加

gggg

、,,,,。

入葡萄糖琼脂pH值至6~8加水定容至1000mL121℃高压灭菌20min分装备用

7现场检测

7.1现场植株症状检查

按照/规定执行。

SNT1157

、,、、

现场检查中根据黄瓜黑星病在秧苗瓜条下的症状将具有典型症状及疑似症状的叶片茎蔓果实

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,。

用塑料袋装好加贴标识后送实验室进行病原菌分离和鉴定

7.2种子抽样

按照/规定执行。

SNT1809

8实验室检测

8.1植株病组织检测

从现场检疫中采集的感病植物组织上挑取灰黑绿色霉层或用刀片于叶背病斑处刮取病菌子实体,

移,,。

于载玻片中央的水滴中盖上盖玻片进行显微镜检观察

8.2种子检测

8.2.1PDA培养基培养法

,,

取试验样品种子400粒经3%~5%次氯酸钠消毒5min~15min将以上处理的种子按每皿

,,,

粒粒摆放于平板上置于恒温箱中培养待长出菌落后挑选典型

10~15PDA20℃~22℃7d~11d

,,。

菌株接种在PDA培养基上进行纯化培养待形成子实体后进行显微镜检观察

8.2.2致病性测定

(),

选用黄瓜感病品种如津杂号在温室培养至长出两片真叶的幼苗将待测菌株制备成孢子悬浮

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2

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