GB 29690-2013 食品安全国家标准 动物性食品中尼卡巴嗪残留标志物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

ICS

G

中华人民共和国国家标准

GB29690—2013

食品安全国家标准

动物性食品中尼卡巴嗪残留标志物残留量

的测定液相色谱-串联质谱法

DeterminationofmarkerresiduesofNicarbazininanimalderivedfood

byLiquidChromatography-tandemMassSpectrometricmethod

（电子版本仅供参考，以标准正式出版物为准）

2013-09-16发布2014-01-01实施

中华人民共和国农业部发布

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

目次

目次I

前言II

动物性食品中尼卡巴嗪残留标志物残留量的测定液相色谱-串联质谱法１

1范围１

2规范性引用文件１

3原理１

4试剂和材料１

5仪器和设备２

6样品的制备与保存３

6.1样品的制备３

6.2样品的保存３

7测定步骤３

7.1提取与净化３

7.2标准曲线的制备３

7.3测定４

7.4空白试验５

8结果计算和表述５

9检测方法灵敏度、准确度和精密度６

9.1灵敏度６

9.2准确度６

9.3精密度６

附录A７

I

前言

本标准的附录A为资料性附录。

本标准系国内首次发布的国家标准。

II

动物性食品中尼卡巴嗪残留标志物残留量的测定

液相色谱-串联质谱法

1范围

本标准规定了动物性食品中尼卡巴嗪残留标志物4,4-二硝基苯缩脲残留量检测的制样和液相色谱-

串联质谱测定方法。

本标准适用于鸡的肌肉组织和鸡蛋中尼卡巴嗪残留标志物4,4’-二硝基均二苯脲残留量的检测。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方

研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T1.1-2000标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

试料中残留的4,4-二硝基苯缩脲，用乙腈提取，正己烷除脂，75％甲醇水溶液萃取，液相色谱-串

联质谱法测定，内标法定量。

4试剂和材料

以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T6682规定的一级水。

4.14,4’-二硝基均二苯脲对照品：含量≥98.0％。

4.24,4’-二硝基均二苯脲-D8对照品：含量≥98.0％。

4.3乙腈：色谱纯。

4.4甲醇：色谱纯。

4.5无水硫酸钠

4.6正己烷

4.7乙酸铵

１

4.8二甲基甲酰胺

4.90.1mol/L乙酸铵溶液：取乙酸铵1.93g，用水溶解并稀释至250mL。

4.1075％甲醇水溶液：取甲醇75mL，用水溶解并稀释至100ml。

4.1175％甲醇水溶液饱和的正己烷取75％甲醇水溶液100mL，加正己烷100mL，摇匀，静置分层，

取上层液。

4.121mg/mL4,4’-二硝基均二苯脲标准贮备液精密称取4,4’-二硝基均二苯脲对照品10mg，于10

mL量瓶内，用二甲基甲酰胺溶解并稀释至刻度，配制成浓度为1mg/mL的4,4’-二硝基均二苯脲标准

贮备液。2～8℃保存，有效期3个月。

4.1310μg/mL4,4’-二硝基均二苯脲标准工作液：精密量取1mg/mL4,4’-二硝基均二苯脲标准贮备液

1.0mL，于100mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配制成浓度为10μg/mL的4,4’-二硝基均二苯脲

标准工作液。-18℃保存，有效期3个月。

4.141mg/mL4,4’-二硝基均二苯脲-D8标准贮备液：精密称取4,4’-二硝基均二苯脲-D8对照品10mg，

于10mL量瓶内，用二甲基甲酰胺溶解并稀释至刻度，配制成浓度为1mg/mL的4,4’-二硝基均二苯

脲-D8标准贮备液。2～8℃保存，有效期3个月。

4.1510μg/mL4,4’-二硝基均二苯脲-D标准工作液：精密量取1mg/mL4,4’-二硝基均二苯脲-D标准

88

贮备液1.0mL，于100mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配制成浓度为10μg/mL的4,4’-二硝基均

二苯脲-D标准工作液。-18℃保存，有效期3个月。

8

5仪器和设备

5.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。

5.2分析天平：感量0.00001g。

5.3天平：感量0.01g。

5.4涡旋振荡器

5.5离心机

5.6氮吹仪

5.7离心管：50mL。

5.8滤膜：0.2µm。

２

6试料的制备与保存

6.1试料的制备

6.1.1鸡蛋

取适量新鲜或冷藏的空白或供试鸡蛋，去壳，并使均质。

——取均质后的供试样品，作为供试试料。

——取均质后的空白样品，作为空白试料。

——取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。

6.1.2鸡肌肉

取适量新鲜或冷冻的空白或供试组织，绞碎，并使均质。

——取均质后的供试样品，作为供试试料。

——取均质后的空白样品，作为空白试料。

——取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。

6.2试料的保存

-20℃以下保存。

7测定步骤

7.1提取与净化

称取试料（2±0.02）g，于50mL离心管中，添加10μg/mL4,4’-二硝基均二苯脲-D标准工作液适

8

量，加无水硫酸钠2g，乙腈8mL，涡旋0.5min，超声5min，5000r/min离心10min，取上清液，于40℃

氮气吹干，加75％甲醇水溶液饱和的正己烷1mL，涡旋10s，再加75％甲醇水溶液1.0mL，充分涡旋

混合，于40℃水浴中静置5min，2000r/min离心5min，取下层清液，滤膜过滤，供液相色谱-串联质

谱测定。

7.2标准曲线的制备

精密量取10μg/mL4,4’-二硝基均二苯脲标准工作液和