T/YNRZ 011-2024 咖啡生豆氨基酸总量测定 分光光度法

范围:本文件规定了咖啡生豆中氨基酸总量测定的术语和定义，原理、仪器和器皿，试剂和溶液、分析步骤，结果计算和检测报告的方法。 本文件适用于咖啡生豆中氨基酸总量的测定; 主要技术内容:1术语和定义下列术语和定义适用于本文件。1.1  咖啡生豆咖啡生豆即未烘焙过的咖啡豆，按GB/T 18007 的5.6规定执行1.2  茚三酮比色法按GB 5009.124规定执行2原理氨基酸在pH8.0的条件下与茚三酮反应，形成紫色络合物，用分光光度法在570 nm的波长下测定其含量。3仪器和器皿3.1  分析天平：感量0.0001 g。3.2  可见光分光光度仪。3.3  安瓿瓶。3.4  陶瓷蒸发皿。3.5  比色管：磨口，50 mL。3.6  比色杯：1 cm。3.7  容量瓶：25 mL、50 mL、100 mL、1000 mL。3.8  酒精喷灯。3.9  研磨机或组织粉碎机。4试剂和溶液除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯（AR），水为蒸馏水。4.1  试剂4.1.1  亮氨酸：纯度≥98%。4.1.2  浓盐酸（HCl）：质量分数≥36%。4.1.3  磷酸氢二钠（Na2HPO4?12H2O）。4.1.4  磷酸二氢钾（KH2PO4）。4.1.5  茚三酮：纯度≥95%。4.1.6  氯化亚锡（SnCl2?2H2O）。4.2  溶液配制4.2.1  6 mol/L盐酸溶液：取500 mL浓盐酸（6.1.2）加水稀释至1000 mL，混匀。4.2.2  pH8.0磷酸盐缓冲液配制4.2.2.1  1/15 mol/L磷酸氢二钠：称取11.9 g十二水磷酸氢二钠（Na2HPO4?12H2O），加水溶解后定容至1000 mL。4.2.2.2  1/15 mol/L磷酸二氢钾：称取经110 ℃烘干2小时的磷酸二氢钾（KH2PO4）0.908 g，加水溶解后定容至100 mL，摇匀备用。4.2.2.3  取1/15 mol/L磷酸氢二钠溶液（6.2.2.1）950 mL和1/15 mol/L磷酸二氢钾溶液（6.2.2.2）50 mL，混匀，该混合溶液pH为8.0。4.2.3  2%茚三酮溶液配制称取茚三酮（纯度≥95%）2 g，加50 mL水和80 mg氯化亚锡（SnCl2?2H2O）搅拌均匀。分次加少量水溶解，放在暗处，静置一昼夜，过滤后加水定容至100 mL容量瓶中，