DB21/T 3074-2018 花生抗网斑病鉴定技术规程

ICS65.020.01

B15

DB21

辽宁省地方标准

DB21/T3074—2018

风沙半干旱区玉米/花生防蚀增效

花生抗网斑病鉴定技术规程

Ruleforevaluationofresistancetowebblotchinpeanut

2018-12-25发布2019-01-25实施

辽宁省市场监督管理局发布

DB21/T3074—2018

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由辽宁省农村经济委员会提出并归口。

本标准由辽宁省农业科学院负责起草。

本标准主要起草人：臧超群、林英、谢瑾卉、于舒怡、梁春浩、刘晓舟、安福涛、张海东、金桂华。

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DB21/T3074—2018

花生抗网斑病鉴定技术规程

1范围

本标准规定了花生抗网斑病（PhomaarachidicolaMarasasPauer&Boerema）鉴定技术的病原物分

离、接种体制备、室内抗性鉴定、田间抗性鉴定、病情调查、抗性评价、鉴定记载方法等。

本标准适用于花生（ArachishypogaeaL.）品种及种质资源对花生网斑病抗性的室内、田间鉴定及

评价。

2规范性引用文件

下列文件对本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T2391农作物品种区域试验与鉴定规程花生

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3试剂、材料与仪器设备

本标准所用试剂在未加说明时均采用分析纯试剂。实验室用水应符合GB/T6682中规定的三级水要

求。

3.1PDA培养基

称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加入1000mL水，煮沸20min—30min，纱布过滤，补水至1000mL，

再加入18g琼脂和18g葡萄糖，搅拌均匀，高压灭菌（121℃，20min）。

3.2OA培养基

称取燕麦粉15g，加入水1000mL，煮沸30min，加入琼脂10g，pH自然，高压灭菌（121℃，20min）。

3.3恒温培养箱：（28+2）℃。

3.4显微镜：物镜头10倍-100倍。

3.5电子天平：感量0.01g。

3.6超净工作台。

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DB21/T3074—2018

3.7高压灭菌器。

3.8冷藏箱（-4℃）。

3.9低温冰箱：最低温度-40℃

4病原物分离与接种体制备

4.1病原物分离

从具有典型症状的花生叶片病斑处挑取花生网斑病菌分生孢子器置于无菌水中震荡3min，将分生孢

子悬浮液涂布于水琼脂平板上，用接种针挑取单孢置于马铃薯葡萄糖（PDA）培养基上，26℃培养箱中

暗培养，经观察菌落和孢子形态结合ITS序列比对，鉴定为花生茎点霉菌(P.arachidicolaMarasas.

Pauer&Boerema)，致病性测定后确定为供接种用菌株。于4℃条件下保存，或20%甘油中-40℃条件下

长期保存，备用。

4.2接种体制备

接种前15d~30d，将病菌接种于马铃薯葡萄糖（PDA）培养基平板上25℃恒温培养5d，利用5mm打

孔器从菌落边缘制取菌饼，置于燕麦琼脂（OA）培养基平板上25℃、近紫外灯