T/GDCA 016-2022 化妆品舒缓功效的评价 斑马鱼胚胎法

ICS71.100.70

CCSY42

团体标准

T/GDCA016-2022

化妆品舒缓功效的评价斑马鱼胚胎法

EvaluationofSoothingEfficacyofCosmeticsMethodofZebrafishEmbryos

2022-12-30发布2023-01-30实施

广东省化妆品学会发布

T/GDCA016—2022

目次

前言..................................................................................II

1范围................................................................................1

2规范性引用文件......................................................................1

3术语和定义..........................................................................1

4缩略语..............................................................................1

5斑马鱼行为学分析法..................................................................1

原理............................................................................1

材料与试剂......................................................................2

仪器设备........................................................................2

试验准备........................................................................2

预试验..........................................................................2

正式试验........................................................................3

结果评价........................................................................3

试验有效性的条件................................................................4

6斑马鱼炎症评价法....................................................................4

原理............................................................................4

材料与试剂......................................................................4

仪器设备........................................................................4

试验准备........................................................................5

预试验..........................................................................5

正式试验........................................................................5

结果评价........................................................................6

试验有效性的条件................................................................6

附录A（资料性）斑马鱼胚胎自旋运动....................................................7

附录B（资料性）缓冲水配制参考配方....................................................8

B.1Holt-Buffer配制方法.............................................................8

B.2E3培养液配制方法................................................................8

B.3十二烷基硫酸钠（500μM造模剂）配制方法..........................................8

B.4十二烷基硫酸钠（100μM造模剂）配制方法..........................................8

B.5甘草酸二钾溶液（阳性对照试剂）..................................................8

附录C（资料性）斑马鱼胚胎正常生长阶段图..............................................9

附录D（资料性）斑马鱼胚胎死亡及畸形图...............................................10

附录E（资料性）中性粒细胞富集区域...................................................11

附录F（资料性）化妆品舒缓功效评价-斑马鱼胚法试验记录表..............................12

参考文献..............................................................................13

I

T/GDCA016—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由广东省化妆品学会提出。

本文件由广东省化妆品学会归口。

本文件起草单位：广州山海生物科技有限公司、水中银（国际）生物科技有限公司、伯德创研（广

州）生物科技有限公司、杭州环特生物科技股份有限公司、广东轻工职业技术学院、无限极（中国）有

限公司、美出莱（杭州）化妆品有限责任公司、广东华轻质量检测服务中心有限公司、广东立创检测技

术服务有限公司、广州艾卓生物科技股份有限公司、广州慈康生物科技有限公司、广州番禺职业学院、

广州广妆生物科技有限公司、广州暨创医美生物科技有限公司、广州市娇兰化妆品有限公司、广州流行

美时尚商业股份有限公司、曼秀雷敦（中国）药业有限公司、完美（广东）日用品有限公司、深圳市药

品检验研究院、深圳市萱嘉生物科技有限公司、山东花物堂生物科技有限公司、珠海美逸生物科技有限

公司、广州质量监督检测研究院、广东工业大学、珠海市大美湾化妆品创新研究院、珠海市大美湾科技

有限公司。

本文件主要起草人：赵海山、何健华、陈雪平、林启盛、周示玉、郑丹阳、张振华、韩婕珺、侯大

海、李彬、冼宝仪、张俐、徐梦漪、范玉菡、蒋平顺、褚观年、张浩、金学迎、丰时运、王平、王进美、

廖雅、孟欣、陈红英、李培宁、杜志云、杨露、张蓝月。

II

T/GDCA016—2022

化妆品舒缓功效的评价斑马鱼胚胎法

1范围

本文件规定了用斑马鱼行为学评价法和斑马鱼炎症评价法对化妆品舒缓功效评价的方法。

本文件适用于能溶于水、在一定条件下能溶于水或能在水中形成均匀分散的悬浮液的化妆品原料及

产品的舒缓功效测试。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T603化学试剂试验方法中所用到制剂及制品的制备

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

DB32/T3979-2021实验用斑马鱼饲养技术条件

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

舒缓soothingefficacy

有助于改善皮肤刺激等状态。

自旋运动spontaneousrotatingmovement

胚胎在卵膜内呈自发旋转运动，可参考附录A。

受精后小时数hourspost-fertilization

斑马鱼受精后的小时数（hpf）。

无可观察效应浓度noobservedeffectconcentration

与对照组相比，对试验生物未产生显著性效应的最高受试物浓度。

斑马鱼胚胎zebrafishembryos

0hpf-120hpf，胚胎靠卵黄提供营养的阶段。

斑马鱼胚胎死亡deathofzebrafishembryos

0hpf-48hpf出现卵凝结，48hpf内无法观察到心跳。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

hpf：受精后小时数（hourspost-fertilization）

NOEC：无可观察效应浓度（noobservedeffectconcentration）

5斑马鱼行为学分析法

原理