T/CQEEMA 14-2025 土壤和沉积物 17种磺胺类抗生素和甲氧苄氨嘧啶的测定 液相色谱 三重四极杆质谱法

ICS13.080.01

CCSZ.18

团体标准

T/CQEEMA14—2025

土壤和沉积物17种磺胺类抗生素和甲氧

苄氨嘧啶的测定液相色谱–三重四极杆

质谱法

Soilandsediment—Determinationof17sulfonamidesandtrimethoprim—Liquid

chromatography-triplequadrupolemassspectrometry

2025-09-10发布2025-09-10实施

重庆市生态环境监测协会  发布

T/CQEEMA14-2025

目次

前言..............................................................................II

1适用范围............................................................................1

2规范性引用文件......................................................................1

3方法原理............................................................................1

4干扰和消除..........................................................................2

5试剂和材料..........................................................................2

6仪器和设备..........................................................................3

7样品................................................................................3

8分析步骤............................................................................4

9结果计算与表示......................................................................8

10准确度............................................................................11

11质量保证和质量控制................................................................12

附录A.................................................................................13

附录B.................................................................................14

I

T/CQEEMA14-2025

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由重庆市生态环境监测中心提出。

本文件由重庆市生态环境监测协会归口。

本文件起草单位：重庆市生态环境监测中心。

本文件主要起草人：皮宁宁、杨利利、沈冬君、郑璇、邹志芬、吴暄、李菲、吴晓妍、蔡素婷、

郭志顺、孙静、朱明吉、周隐、代沁芸、田竟、马伶俐、张飙为、彭静、陈阳健。

II

i

i

T/CQEEMA14-2025

土壤和沉积物17种磺胺类抗生素和甲氧苄氨嘧啶的测定

液相色谱-三重四极杆质谱法

警告：实验中使用的标准物质和有机溶剂均为有毒化合物，试剂配制和样品前处理过程应在通风

橱内进行；操作时应按要求佩戴防护器具，避免吸入呼吸道或接触皮肤和衣物。

1适用范围

本文件规定了测定土壤和沉积物中17种磺胺类抗生素和甲氧苄氨嘧啶的液相色谱-三重四极杆质

谱法。

本文件适用于土壤和沉积物中磺胺二甲基嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺二甲异恶唑、磺胺甲基嘧啶、

磺胺甲噻二唑、磺胺喹恶啉、磺胺苯吡唑、磺胺嘧啶、磺胺吡啶、磺胺噻唑、磺胺甲噁唑、苯甲酰磺

胺、磺胺多辛、磺胺地索辛、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶和甲氧苄氨嘧啶共18

种目标化合物的测定。

取样量为1g，试样定容体积1mL，进样量2μl时，17种磺胺类抗生素和甲氧苄氨嘧啶方法检出限为

0.3µg/kg~0.7µg/kg，测定下限为1.2µg/kg~2.8µg/kg，详见附录A。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文

件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用

于本文件。

GB17378.3海洋监测规范第3部分：样品采集、贮存与运输

GB17378.5海洋监测规范第5部分：沉积物分析

HJ/T166土壤环境监测技术规范

HJ442.4近岸海域环境监测技术规范第四部分近岸海域沉积物监测

HJ613土壤干物质和水分的测定重量法

HJ783土壤和沉积物有机物的提取加压流体萃取法

3方法原理

土壤和沉积物中的磺胺类抗生素和甲氧苄氨嘧啶经甲醇-柠檬酸盐缓冲溶液提取，固相萃取柱净化、

浓缩定容，用液相色谱-三重四极杆质谱测定。根据保留时间、特征离子丰度比定性，内标法定量。

1

T/CQEEMA14-2025

4干扰和消除

当样品中存在基质效应干扰时，可通过净化样品、优化色谱条件、减少取样量或进样体积等方法

降低或消除干扰。

5试剂和材料

除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为不含目标化合物的蒸馏水

或通过纯水设备制备。

5.1甲醇（CH3OH）：色谱纯。

5.2甲酸（HCOOH）：色谱纯。

5.3柠檬酸一水合物（C6H8O7·H2O）。

5.4柠檬酸钠二水合物（C6H5Na3O7·2H2O)。

5.5柠檬酸溶液：0.1mol/L。

称量21.01g的柠檬酸一水合物（5.3），用水稀释至1L。

5.6柠檬酸钠溶液：0.1mol/L。

称量29.41g的柠檬酸钠二水合物（5.4），用水定容至1L。

5.7柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液

量取80mL的0.1mol/L柠檬酸溶液（5.5）和120mL的0.1mol/L柠檬酸钠溶液（5.6），混合，即

可得pH=5.0的柠檬酸-柠檬酸钠的缓冲溶液。

5.8甲醇-柠檬酸盐缓冲溶液。

量取100mL甲醇（5.1）和100mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液（5.7）混匀。

5.9甲酸溶液：0.1%

移取1ml甲酸（5.2），用水稀释至1L。

5.10磺胺类抗生素和甲氧苄氨嘧啶标准贮备液：ρ=100.0mg/L。

可用标准物质配制，标准物质纯度大于95.0%，用甲醇（5.1）溶解。也可购买有证标准溶液，标

准物质或有证标准溶液参照标准证书推荐的保存条件保存。

5.11磺胺类抗生素和甲氧苄氨嘧啶标准使用液：ρ=1.00mg/L。

移取适量抗生素标准贮备液（5.10），用甲醇配制成各目标化合物质量浓度均为1.00mg/L的标准

使用液，于-18℃以下冷冻、密封、避光保存，保存期为90d。

5.12替代物标准贮备液：ρ=100.0mg/L。

13

替代物为甲氧苄氨嘧啶-C3，亦可选用其他性质相近的同位素物质作替代物，也可直接购买市售

有证标准溶液，贮备液参照产品说明书保存。

5.13替代物标准使用液：ρ=1.00mg/L。

移取适量替代物标准贮备液（5.12），用甲醇配制成各目标化合物质量浓度均为1.00mg/L的替代

物使用液，于-18℃以下冷冻、密封、避光，保存期为90d。

5.14内标贮备液：ρ=100mg/L。

2

T/CQEEMA14-2025

1313

内标物为磺胺甲恶唑-C6，磺胺二甲嘧啶-C6。亦可选用其他性质相近的同位素物质作内标。可

直接购买市售有证标准溶液，贮备液参照产品说明书保存。

5.15内标使用液：ρ=1.00mg/L。

移取适量内标贮备液（5.14），用甲醇稀释，于-18℃以下冷冻、密封、避光，保存期为90d。

5.16硅藻土：粒径250μm~850μm。（20目~60目）

马弗炉中450℃灼烧4h，稍冷却后置于洁净干燥器中备用。

5.17石英砂：粒径150μm～250µm（100目～60目）

马弗炉中450℃灼烧4h，稍冷却后置于洁净干燥器中备用。

5.18固相萃取柱：填料为二乙烯苯和N-乙烯基吡咯烷酮共聚物，规格为500mg/6mL，或其他等效

固相萃取柱。

5.19针头式过滤器：孔径为0.22μm，聚四氟乙烯、聚醚砜或其他等效材质滤膜。

5.20氮气：纯度≥99.99%。

5.21氩气：纯度≥99.999%。

6仪器和设备

6.1采样瓶：棕色，具有聚四氟乙烯衬垫磨口玻璃瓶。

6.2液相色谱-三重四极杆质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI），具备流动相梯度洗脱和质谱多反应监

测功能。

6.3色谱柱：填料粒径为1.7μm，柱长为100mm，内径为2.1mm的C18液相色谱柱，或其他等效色

谱柱

6.4萃取池：34mL或其他规格。

6.5冷冻干燥仪。

6.6提取装置：加压流体萃取仪等性能相当的设备。

6.7浓缩装置：旋转蒸发仪、氮吹仪或其他同等性能的设备。

6.8固相萃取装置：自动或手动，流速可调节。

6.9进样瓶：棕色玻璃瓶，2mL。

6.10样品筛：不锈钢材质，孔径为250μm（60目）。

6.11一般实验室常用仪器和设备。

7样品

7.1样品采集和保存

分别按照HJ/T166、HJ442.4、GB17378.3的相关要求采集和保存土壤和沉积物样品。样品应置

于洁净的采样瓶（6.1）中，4℃以下避光、冷藏保存，7d内完成提取，30d内完成上机测定。

7.2样品的制备

除去样品中的异物（枝棒、叶片、石子等），自然阴干或冷冻干燥后，研磨、均质、过样品筛（6.10）。

3

T/CQEEMA14-2025

7.3水分的测定

土壤样品干物质含量测定按照HJ613执行，沉积物样品含水率测定按照GB17378.5执行。

7.4试样制备

7.4.1提取

称取1g试样（可根据试样中待测化合物浓度适当增加或减少取样量），加入10μl替代物（5.13）

混匀后，置于萃取池（6.4）中，将萃取池（6.4）置于提取装置（6.6）中，以甲醇-柠檬酸盐缓冲溶液

（5.8）为提取溶剂，按以下参考条件进行提取：提取温度为60℃，提取压力为10.34MPa，静态提

取时间为15min，淋洗体积为60%池体积，氮气（5.20）吹扫时间为120s，循环次数为2次，收集提

取液，并用实验用水稀释至500mL，待净化。

7.4.2净化

将固相萃取柱（5.18）固定在固相萃取装置（6.8）上，依次用10mL甲醇（5.1）、10mL水活化

固相萃取柱（5.18）。将提取液（7.4.1）以8ml/min～10ml/min的流速通过固相萃取柱后，用10mL

水淋洗固相萃取柱（5.18），然后用真空泵抽气干燥小柱或用氮气（5.20）吹干小柱。再用10mL甲

醇（5.1）以1ml/min～3ml/min的流速洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。

7.4.3浓缩定容

用浓缩装置（6.7）将洗脱液（7.4.2）浓缩至近干，用甲醇（5.1）定容至1.0mL，加入10.0µl内

标使用液（5.15），混匀后经针头式过滤器（5.19）过滤至进样瓶（6.9）中，密封、避光，-18℃以下

冷冻保存，30d内完成分析。

7.5空白试样制备

用石英砂（5.17）代替样品，按照与试样制备（7.4）相同步骤制备空白试样。

8分析步骤

8.1仪器参考条件

8.1.1液相色谱参考条件

流动相A：甲酸溶液（5.9）；流动相B：甲醇（5.1）；参考梯度洗脱程序见表1；流速为0.3mL/min；

进样体积：2µl；柱温：40ºC。

表1梯度洗脱程序

时间（min）流动相A（%）流动相B（%）流速（ml/min）

0.09550.3

1.09550.3

2.080200.3

5.040600.3

4

T/CQEEMA14-2025

时间（min）流动相A（%）流动相B（%）流速（ml/min）

5.25950.3

7.05950.3

7.19550.3

10.09550.3

8.1.2质谱参考条件

离子源：电喷雾离子源（ESI），正离子模式；监测方式：多反应监测（MRM）；离子化电压：5500V；

离子源温度：500℃；雾化气压力：50psi；辅助加热气压力：50psi；气帘气压力：35psi；多反应监测

条件参见表2。

表2质谱多反应监测条件

母离子子离子锥孔电压碰撞能量

序号目标化合物定量内标

（m/z）（m/z）（V）（V）

92*30

13

1磺胺吡啶250.0730磺胺二甲嘧啶-C6

15616

92*24

13

2磺胺嘧啶251.0630磺胺二甲嘧啶-C6

15615

92.1*28

13

3磺胺甲恶唑254.0620磺胺二甲嘧啶-C6

15616

92*24

13

4磺胺噻唑256.0230磺胺二甲嘧啶-C6

15615

92*26

13

5磺胺甲基嘧啶265.0830磺胺二甲嘧啶-C6

15615

92*28

13

6磺胺二甲异噁唑268.0830磺胺甲恶唑-C6

15616

92*28

13

7磺胺甲噻二唑271.0330磺胺甲恶唑-C6

15612

92*24

13

8苯甲酰磺胺277.0630磺胺二甲嘧啶-C6

15617

124.1*20

13

9磺胺二甲基嘧啶279.0935磺胺二甲嘧啶-C6

18617

5

T/CQEEMA14-2025

表2质谱多反应监测条件

母离子子离子锥孔电压碰撞能量

序号目标化合物定量内标

（m/z）（m/z）（V）（V）

92*28磺胺二甲嘧啶

10磺胺对甲氧嘧啶281.0730

15622-13C6

92*26磺胺二甲嘧啶

11磺胺甲氧哒嗪281.0730

15615-13C6

92*35磺胺二甲嘧啶

12磺胺间甲氧嘧啶281.0735

15622-13C6

92*28磺胺二甲嘧啶

13磺胺氯哒嗪285.0224

15614-13C6

123*27磺胺二甲嘧啶

14甲氧苄氨嘧啶291.14630

261.128-13C6

92*30磺胺二甲嘧啶

15磺胺喹噁啉301.0830

15616-13C6

92*30磺胺二甲嘧啶

-13C6

16磺胺地索辛311.08130

15616磺胺二甲嘧啶

-13C6

磺胺邻二甲氧嘧92*30磺胺二甲嘧啶

17311.08130

啶15615-13C6

158.2*28磺胺二甲嘧啶

18磺胺苯吡唑315.0930

16022-13C6

162*14

19磺胺甲恶唑-13C6260.175-

11430

磺胺二甲嘧啶185.9*7521

20-13C6285.1-

16232

甲氧苄氨嘧啶231.2*32磺胺二甲嘧啶

21294100

-13C3123.131-13C6

*为定量离子对

6

T/CQEEMA14-2025

8.1.3质谱仪调谐

按照仪器使用说明书调谐仪器并确认仪器性能，仪器性能正常后测定样品。

8.2校准

8.2.1标准系列的配制

分别移取适量的磺胺类抗生素和甲氧苄氨嘧啶标准使用液（5.11）、替代物使用液（5.13），于进

样瓶（6.9）中，用甲醇（5.1）配制不少于5个浓度点的标准系列，目标化合物和替代物的质量浓度分

别为1.0µg/L、2.0µg/L、5.0µg/L、10.0µg/L、20.0µg/L、50.0µg/L、和100µg/L（此为参考浓度）。

1mL标准系列中加入10µL内标使用液（5.15），混匀，待测。

8.2.2标准系列的测定

按照仪器参考条件（8.1），由低浓度到高浓度依次对标准系列溶液进行测定。记录各目标化合物、

提取内标、进样内标的保留时间和定量离子峰面积。各总离子色谱图见图1。

8.9.10

3

13.14

1620

517

26.718

41221

111

19

15

1-磺胺嘧啶；2-磺胺噻唑；3-磺胺吡啶；4-磺胺甲基嘧啶；5-磺胺对甲氧嘧啶；6.-磺胺二甲基嘧啶；

1313

7-磺胺二甲基嘧啶-C6（内标1）；8-甲氧苄氨嘧啶；9-甲氧苄氨嘧啶-C3（替代物）；10-磺胺甲噻二

13

唑；11-磺胺甲氧哒嗪；12-磺胺氯哒嗪；13-磺胺甲噁唑；14-磺胺甲噁唑-C6（内标2）；15-磺胺间甲

氧嘧啶；16-磺胺多辛；17-磺胺二甲异噁唑；18-苯甲酰磺胺；19-磺胺苯吡唑；20-磺胺喹噁啉；21-磺胺

地索辛。

图1各目标化合物、替代物及内标物的总离子流图

7

T/CQEEMA14-2025

8.2.3用最小二乘法绘制标准曲线

以标准系列溶液中目标化合物的质量浓度为横坐标，以其对应峰面积与内标物峰面积的比值和内标

物浓度的乘积为纵坐标，建立标准曲线。

8.2.4平均相对响应因子计算

标准系列中第j点目标化合物i的相对响应因子（RRFij），按照公式（1）计算。

A，ρ