T/GDSF 0003-2023 罗非鱼无乳链球菌和海豚链球菌双重荧光PCR检测方法
T/GDSF 0003-2023 Double fluorescence PCR detection method for dual detection of Mycoplasma anatis and Phocoenobacterium in tilapia and dolphin
基本信息
发布历史
-
2023年09月
-
2024年06月
研制信息
- 起草单位：
- 东莞市动物疫病预防控制中心、广东加和检测技术服务有限公司、广东加和生物技术有限公司、广东海大畜牧兽医研究院有限公司、东莞市石排镇农业技术服务中心
- 起草人：
- 张险朋、李敏、李小军、吴胜旭、李中圣、胡毅军、袁玲、萧广勇、王伟强、丁文桂、李永福、伍建敏、王自强、黄育浩、龙海鹰、邓海燕、李本旺
- 出版信息：
- 页数：11页 | 字数：- | 开本： -
内容描述
ICS65.150
CCSB50
GDSF
广东水产学会团体标准
T/GDSF0003—2023
罗非鱼无乳链球菌和海豚链球菌双重荧光
PCR检测方法
DuplexReal-timePCRMethodfortheDetectionofStreptococcusagalactiaeand
StreptococcusiniaeinTilapia
2023-9-4发布2023-9-5实施
广东水产学会发布
T/GDSF0003—2023
目次
前言................................................................................III
1范围................................................................................1
2规范性引用文件......................................................................1
3术语和定义..........................................................................1
4缩略语..............................................................................1
5试剂和耗材..........................................................................1
试剂..............................................................................1
引物和探针........................................................................1
6仪器设备............................................................................2
7样品采集与处理......................................................................2
样品采集..........................................................................2
7.1.1采样工具........................................................................2
7.1.2待检样本........................................................................2
7.1.3样品运输........................................................................2
样品前处理........................................................................2
7.2.1池塘水样品前处理................................................................2
7.2.2环境拭子前处理..................................................................2
7.2.3细菌培养物......................................................................2
7.2.4组织样品前处理..................................................................2
8操作方法............................................................................2
DNA提取...........................................................................3
反应体系的配制....................................................................3
加样..............................................................................3
荧光PCR反应......................................................................3
8.4.1上机............................................................................3
8.4.2循环条件设置....................................................................3
8.4.3荧光通道设定....................................................................3
9结果判定............................................................................3
阈值设定..........................................................................3
质控标准..........................................................................3
结果描述及判定....................................................................3
附录A（规范性）溶液配置........................................................5
A.10.01mol/LPBS(pH7.2)溶液的配置..................................................5
A.2阳性对照..........................................................................5
A.3阴性对照..........................................................................5
附录B（规范性）引物、探针的名称、序列和工作浓度................................6
I
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