DB32/T 3487-2018 黄瓜绿斑驳花叶病毒苗期检测技术规程

ICS65.020.20

B16

备案号：DB32

江苏省地方标准

DB32/T3487—2018

黄瓜绿斑驳花叶病毒苗期检测技术规程

TechnicalSpecificationfortheSeedlingDetectionofCucumberGreenMottle

MosaicVirus

2018-11-9发布2018-11-30实施

江苏省质量技术监督局发布

DB32/T3487—2018

前言

本标准按GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构及编写》的规定编写。

本标准由江苏省农业科学院提出并归口。

本标准起草单位：江苏省农业科学院。

本标准主要起草人：程兆榜、任春梅、季英华、杨柳、缪倩、周益军。

I

DB32/T3487—2018

黄瓜绿斑驳花叶病毒苗期检测技术规程

1范围

本标准规定了苗床期瓜苗黄瓜绿斑驳花叶病毒的检测条件、检测技术、结果判定和结果记载。

本标准适用于苗床期症状尚未表现的瓜类作物上黄瓜绿斑驳花叶病毒的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的的修改单）适用于本文件。

GB/T35335黄瓜绿斑驳花叶病毒病监测规范

SN/T2964植物病毒检测规范

3检测条件

3.1主要试剂

磷酸氢二钠（Na2HPO4）、磷酸二氢钾（KH2PO4）、氯化钾（KCl）、氢氧化钠（NaOH）、碳酸氢二

钠（Na2HCO3）、氯化钠（NaCl）、叠氮化钠（NaN3）、PVP-400、鸡卵清蛋白、无水亚硫酸钠（Na2SO3）、

吐温-20、焦碳酸二乙酯（DEPC）、溴百里酚蓝、乙二醇、Tris碱、Tris-HCl、硼酸、EDTA、无水乙醇、

琼脂糖、DIGDNALabelingKit、CGMMV抗体。PCR试剂和检测过程中所需溶液配方，参见附录A。

除另有规定外，所用试剂均为分析纯或生化试剂。

3.2用具及仪器

用具耗材：移液器、一次性手套、牛皮纸袋、标签纸、记号笔等

仪器设备：高压灭菌锅、培养箱、高速冷冻离心机（规格：-6℃~20℃、最高转速12000转/分以上）、

电泳仪（规格：电压50~120V、电流10~800mA）、PCR仪、凝胶成像系统、超纯水仪。

4检测技术

4.1采样方法

4.1.1采样时间

待检材料为嫁接或未嫁接的黄瓜、西瓜、甜瓜、南瓜等瓜类作物幼苗，采样时间为出厂定植前3

天~7天植株处于2片~4片真叶期。

4.1.2采样部位

植株最上部半展开-展开的心叶，心叶未达要求时取位于心叶下部一张完全展开叶。

4.1.3取样方法

五点法取样，一株为一个样本，不同品种或同一品种不同时间播种的为不同批次，每批次样本数量

不小于200株或同批次苗的0.1%。样本采集时使用一次性手套单株采集并临时保存在一次性手套中。