DB45/T 2829-2023 地中海贫血筛查与诊断技术规范

ICS11.020.20

CCSC05

45

广西壮族自治区地方标准

DB45/T2829—2023

地中海贫血筛查与诊断技术规范

Technicalspecificationsforscreeninganddiagnosisofthalassemia

2023-12-26发布2024-02-01实施

广西壮族自治区市场监督管理局  发布

DB45/T2829—2023

目次

前言.................................................................................III

引言..................................................................................IV

1范围................................................................................1

2规范性引用文件......................................................................1

3术语和定义..........................................................................1

4缩略语..............................................................................2

5地中海贫血筛查技术..................................................................2

5.1筛查人群........................................................................2

5.2筛查流程........................................................................2

5.3筛查技术........................................................................2

6地中海贫血基因诊断技术..............................................................5

6.1资质要求........................................................................5

6.2诊断技术........................................................................5

7实验室质量控制.....................................................................10

7.1室内质量控制...................................................................10

7.2室间质量评价...................................................................11

8信息管理...........................................................................11

8.1样本保存.......................................................................11

8.2资料保存.......................................................................11

附录A（规范性）地中海贫血筛查流程图.................................................12

A.1地中海贫血携带者筛查流程.......................................................12

A.2地中海贫血新生儿筛查流程.......................................................13

A.3地中海贫血育龄夫妇筛查流程.....................................................14

附录B（资料性）血细胞分析和血红蛋白组分分析自制质控品质量评价.......................15

附录C（资料性）血红蛋白组分分析报告单...............................................16

附录D（资料性）地中海贫血基因诊断知情同意书.........................................17

附录E（资料性）地中海贫血基因诊断申请单.............................................20

附录F（资料性）地中海贫血基因产前诊断知情同意书.....................................21

附录G（资料性）地中海贫血产前基因诊断申请单.........................................24

附录H（资料性）地中海贫血基因检测报告单.............................................25

附录I（资料性）血红蛋白组分分析室内质量控制程序.....................................26

I.1质控物的选择...................................................................26

I.2均值的建立.....................................................................26

I

DB45/T2829—2023

I.3控制限的设定...................................................................26

I.4质量控制结果的记录和质量控制图的绘制...........................................26

I.5失控判定规则...................................................................26

I.6失控处理.......................................................................27

参考文献..............................................................................28

II

DB45/T2829—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由广西壮族自治区卫生健康委员会提出并宣贯。

本文件由广西卫生标准化技术委员会归口。

本文件起草单位：广西壮族自治区人民医院。

本文件主要起草人：黎君君、覃婷、李友琼、周向阳、刘晓春、袁育林、田矛、梁旭霞、张继红、蓝梅、

温志红、代艳、李含、梁亮、李夏珀、银联立、郑丽红、林中原、阳文辉、张鹏、张秀群、莫伟英、龙

喜贵、伍欣、李颖、白金平。

III

DB45/T2829—2023

引言

广西是中国地中海贫血高发地区。2010年广西在国内率先启动地中海贫血防治计划，建立了地中海

贫血防治体系，全区地中海贫血筛查设施设备和技术方法大幅度改善和提高，群众知识普及程度、接受

度和检测依从性等均有了长足进步。

目前，我国尚无地中海贫血筛查及基因诊断技术的国家、行业标准，地中海贫血筛查与诊断具体技

术操作过程中诸如标本处理、检测方法、结果报告、结果解读、质量控制、信息管理等方面的规范急需

制定。

鉴于此，遵循《母婴保健法》和《产前诊断技术管理办法》等相关法律法规和规范，在充分参考国

际地中海贫血协会推荐方案、国家卫计委《地中海贫血防控试点项目技术服务规范（试行）》2014年版

等文献资料，并与国内多家开展地中海贫血检测的产前诊断机构或实验室共同明确数据的前提下，结合

我区多年开展地中海贫血筛查及诊断技术的实践经验，制定本技术标准。以期达到规范全区地中海贫血

筛查与诊断技术的目的。

IV

DB45/T2829—2023

地中海贫血筛查与诊断技术规范

1范围

本文件界定了地中海贫血筛查与诊断的相关术语和定义，规定了地中海贫血筛查技术、诊断技术、

实验室质量控制、信息管理等要求。

本文件适用于广西壮族自治区行政区域内医疗机构及检验机构对地中海贫血的筛查与诊断。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

GB39707医疗废物处理处置污染控制标准

WS/T405血细胞分析参考区间

WS/T779儿童血细胞分析参考区间

WS/T641临床检验定量测定室内质量控制

3术语和定义

WS/T641界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

非输血依赖型地贫non-transfusiondependentthalassemia

一组不需要定期输血就能维持生命或者仅在感染、手术、妊娠、生长发育迟缓等特殊情况下需要输

血的地中海贫血类型。

3.2

输血依赖型地贫transfusiondependentthalassemia

需要定期输血才能存活，或没有足够的输血支持，将出现数种并发症并导致生活质量下降或生存时

间缩短的地中海贫血类型。

3.3

血红蛋白H病hemoglobinHdisease

由2-3个α-珠蛋白等位基因缺失或功能缺陷所造成，患者仅能合成少量α-肽链，多余的β-肽链聚

合为β四聚体（HbH）。

3.4

产前诊断prenataldiagnosis

对可疑出生缺陷的胎儿在出生前应用各种检测手段，产前诊断又称宫内诊断或出生前诊断。

示例：如影像学、生物化学、细胞遗传学及分子生物学等技术，全面评估胎儿在宫内的发育情况，对先天性和遗传

性疾病做出诊断，为胎儿宫内治疗（手术、药物、基因治疗等）及选择性流产提供依据，并提出医学建议。

1

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4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

Hb：血红蛋白（Hemoglobin）

HbA2：血红蛋白A2（HemoglobinA2)

HbA：血红蛋白A(HemoglobinA)

HbF：血红蛋白F(HemoglobinF)

DNA：脱氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAcid)

PCR：聚合酶链反应（PolymeraseChainReaction）

MCV：红细胞平均体积（MeanCorpuscularVolume）

MCH：红细胞平均血红蛋白量（MeanCorpuscularHemoglobin）

SOP：标准操作程序（StandardOperationProcedure）

NMPA：国家药品监督管理局(NationalMedicalMedicalProductsAdministration)

EDTA：乙二胺四乙酸（EthyleneDiamineTetraaceticAcid）

PT：能力验证(ProficiencyTesting)

5地中海贫血筛查技术

5.1筛查人群

全人群均可筛查，重点筛查人群包括：婚前、孕前、产前的夫妇及新生儿、疾病查因人群等。

5.2筛查流程

地中海贫血筛查流程见附录A。

5.3筛查技术

5.3.1血细胞分析

5.3.1.1标本处理

用含EDTA抗凝剂的真空采血管，静脉采血2 ml，轻轻混匀，避免标本溶血，采样后及时送检，4h

内完成检测。

5.3.1.2试剂和仪器

使用经国家注册批准、性能良好的试剂及仪器设备。

5.3.1.3检测方法

使用血细胞计数仪采用自动检测方法。MCV、MCH可通过间接计算或直接检测得到，按公式（1）、

公式（2）计算：

·······················································(1)

式中：𝑀�=��

MCV——红细胞平均体积，单位为分升（fL）；

A——每升血液中血细胞比容，单位为百分比（%）；

B——每升血液中红细胞数，单位为1012每升（1012/L)。

2

DB45/T2829—2023

·······················································(2)

式中：𝑀�=��

MCH——红细胞平均血红蛋白量，单位为匹克（pg)；

B——每升血液中红细胞数，单位为1012每升（1012/L)；

C——每升血液中红细胞血红蛋白量，单位为克每升（g/L)。

5.3.1.4质控物

具体如下：

——宜使用配套质控物，若选择非配套质控物时应评价其质量和适用性；

——应有低值、中值、高值3个水平的质控物。

5.3.1.5参考区间

28天～18岁儿童参考区间按WS/T779执行，成年人参考区间按WS/T405执行。

5.3.2血红蛋白分析

5.3.2.1标本处理

5.3.2.1.1检测样本不受饮食和采血时间的影响。

5.3.2.1.2按照适用于临床实验室检测的常规方法采集静脉血或脐带血。

5.3.2.1.3采用含有EDTA或柠檬酸盐抗凝剂的采血管。

5.3.2.1.4全血样本采集后应及时送检，如未能及时检测应4 ℃储存，宜1周内完成检测。

5.3.2.1.5转院运送的样本，可常温运送，当室外温度大于30 ℃时，宜采用冷藏温度4 ℃～8 ℃运

送。

5.3.2.2检测方法学

血红蛋白组分分析有多种检测方法，主要包括琼脂糖凝胶电泳、高效液相色谱法、毛细管区带电泳

和毛细管等电聚焦电泳等。

5.3.2.3检测系统

5.3.2.3.1应选用有NMPA认证的分析系统（仪器和试剂）。

5.3.2.3.2不同分析系统干扰因素有差异，实验室工作人员应知晓所选分析系统可能存在的干扰因素。

5.3.2.3.3实验室启用/更换一个新的分析系统检测临床样本前，应该对系统性能进行验证。

5.3.2.3.4试剂的性能验证方法宜参考CNAS-GL037进行，仪器的验证方法宜参考CNAS-GL040。

5.3.2.3.5仪器应定期校准，或者维修后应进行校准。

5.3.2.4质控物

5.3.2.4.1质控物应有良好的长期稳定性，宜选择商品制品，或自制。

5.3.2.4.2宜选用冻干粉或冰冻全血质控物，质控物复溶后，分管冻存。检测时，取出平衡至室温，

混匀后进行测定。质控物不宜反复冻融。

5.3.2.4.3实验室自制新鲜冰冻全血质控物，原料为足量的混合新鲜全血，采用冻存管分装，并对均

匀性进行考察评价，评价参见附录B，存储于-20 ℃或更低温度，可以稳定半年。

5.3.2.4.4应有2个水平的质控物（正常值及病理值）。

5.3.2.5测定

3

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5.3.2.5.1所用试剂、耗材应按说明书要求存放，在有效期内使用完毕。

5.3.2.5.2实验室应制定标准操作程序，包含但不限于以下内容：项目名称、检测原理、样本采集及

存储、室内质量控制程序、室间质量控制程序、测定标准程序、仪器维护保养程序、参考区间、干扰影

响因素、校准程序（可由仪器厂家实施）、结果审核及报告。

5.3.2.5.3血液样本及质控物实验完成后，处理样本应符合GB39707的规定。

5.3.2.6报告

5.3.2.6.1以百分比（％）为单位，结果保留1位小数点。

5.3.2.6.2报告单宜提供方法学，以利于临床医生判断结果。

5.3.2.6.3如条件允许，宜提供电泳图谱/色谱图。

5.3.2.6.4异常血红蛋白，宜以血红蛋白组别归属进行报告（如HbJ、HbE等）。

5.3.2.6.5存在图谱异常或检测结果异常，应提供结果描述和检测建议，以利于临床医生判断结果。

5.3.2.6.6血红蛋白分析报告单参见附录C。

5.3.2.7参考区间

5.3.2.7.1根据不同年龄设定参考区间。

5.3.2.7.2产前样本脐带血，尚无参考区间。

5.3.2.7.30天～6个月，尚无参考区间。新生儿期宜参考新生儿脐带血参考区间；1～6月，宜参考6

个月～2岁的参考区间。

5.3.2.7.4血红蛋白组分在小于2岁以内的年龄段，其组分含量波动较大，因此，这个年龄段的血红

蛋白组分参考区间制定较为困难，其可靠性低于年龄≥2岁组的参考区间。

5.3.2.7.5宜根据检测方法学设定不同年龄参考区间。

示例：以毛细管电泳capillarys2FlexPiercing为例，参考《现代蛋白电泳筛查和诊断的临床应用》，见表1。

表1不同年龄段参考区间

年龄参考区间

新生儿脐带血12％≤HbA≤40％60％≤HbF≤90％0％≤HbA2≤1.0％

6个月～2岁83％≤HbA≤95％0％≤HbF≤13％0.8％≤HbA2≤3.0％

≥2岁96.4％≤HbA≤97.9％0％≤HbF≤5％2.4％≤HbA2≤3.5%

5.3.3阳性结果不同年龄段参考区间

5.3.3.1具有以下至少一项实验室检测结果可判断为成人地中海贫血筛查阳性：

——MCV＜82fl；

——MCH＜27pg；

——HbA2≥3.5%；