DB37/T 494-2004 牛胚胎移植技术规程

ICS65.020.30

B43DB37

山东省地方标准

DB37/T494—2004

牛胚胎移植技术规程

TechnicalRegulationsforBovineEmbryoTransplantation

2004-12-23发布2005-01-01实施

山东省质量技术监督局发布

DB37/T494—2004

前言

本标准附录A、B、C、D、E、F、G为规范性附录。

本标准由山东省畜牧办公室、山东省畜牧业标准化技术委员会提出。

本标准由山东省畜禽良种推广中心负责起草。

本标准主要起草人：张志民、刘栋、王建英、胡洪杰。

I

DB37/T494—2004

牛胚胎移植技术规程

1范围

本标准规定了供受体牛的选择标准，牛胚胎移植的超数排卵、胚胎采集、冷冻、解冻、移植的技术

要求。

本标准适用于牛胚胎移植。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的

修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB4143—84牛冷冻精液质量标准

DB37/T309-2002奶牛生产技术规程

DB37/T307-2002肉牛生产技术规程

DB37/T306-2002牛人工授精技术规程

3术语和定义

3.1供体

提供胚胎的母牛。

3.2受体

接受供体胚胎并代之完成妊娠、分娩过程的母牛。

3.3同期发情

是指通过激素药物处理，将群体母牛从不同的发情周期调整到同一进程，使它们在预定的时间内集

中发情。

3.4超数排卵

是在母牛发情周期的某一时期，用激素处理母牛，诱发卵巢比在自然情况下有较多的卵泡发育并排

出多个有受精能力的卵子。

4胚胎生产

4.1供体母牛

4.1.1供体牛选择

符合相应品种标准，谱系清楚，品质优良，具有较高的生产性能；健康无病，繁殖机能正常；发情

周期正常，发情症状明显。

4.1.2饲养管理

奶用供体母牛的饲养管理执行DB37/T309-2002。

肉用供体母牛的饲养管理执行DB37/T307-2002

4.1.3发情观察

至少观察连续2个正常发情周期，每天上午、下午分2次观察发情情况和发情症状，详细记录发情时

间及发情周期天数。

4.2同期发情

1

DB37/T494—2004

具有正常发情周期的牛方可进行同期化发情处理。药品宜采用氯前列烯醇（PGF2α）、孕酮阴道释

放装置（CIDR），同期发情可采用下列方法之一。

4.2.1一次PGF2α注射法

对受体牛进行直肠检查，检查卵巢是否处于黄体期。对处于黄体期的母牛肌注PGF2α。注射后

48h-96h观察发情，详细记录发情情况。

4.2.2二次PGF2α注射法

第一次注射：在任意1d。

第二次注射：在第一次注射后12d-13d。第二次注射后48h-96h,观察发情，详细记录发情情况。受

体牛发情之日计为0d，通常在第7d(6d-8d)进行胚胎移植。

4.2.3CIDR+PGF2α法

选择未处于发情期的供体牛，于任意1d，在阴道内放置CIDR。放置CIDR后第9d肌注PGF2α，24h后

取出CIDR。PGF2α注射后48h-96h观察发情，详细记录发情情况。

4.2.4供受体同期处理

在供体牛超数排卵处理的第2d，对受体牛进行PGF2α处理，可使供、受体牛同期发情。

4.3超数排卵

4.3.1药品

FSH（垂体促卵泡素）,CIDR阴道栓,PGF2α,LRH-A3（促排3号）。

4.3.2超数排卵程序

见附录A。

4.4人工授精

供体牛超排肌注PGF2α后，48h以后观察发情，以母牛稳定站立接受它牛爬跨为发情标准,做好发情

时间记录。供体牛发情后12h进行第一次输精，以后每间隔10-12h输精一次，一般输精2次，每次加倍剂

量输精。冻精质量应符合GB4143—84的规定，人工授精操作应符合DB37/T306-2002的要求。

4.5胚胎采集

4.5.1器材、药品

采卵管、子宫颈扩张棒、黏液去除器、三通管、集卵杯、生理盐水、利多卡因、冲卵液。

4.5.2采卵

通常在供体牛超数排卵发情后的第7d(6d-8d)进行非手术采胚。操作步骤见附录B。

4.6胚胎质量鉴定

4.6.1检卵

将回收的冲卵液立即送入实验室（室温20℃-25℃），用冲卵液冲洗集卵杯内壁，直至液体清亮。

把盛有冲卵液的集卵杯或培养皿（底部划有1cm*1cm方格）放在15-20倍体视显微镜下，从左向右，从上

到下地检查。不可遗漏，将检出的胚胎放入盛有培养液的培养皿中。

4.6.2胚胎的质量鉴定

牛胚胎各发育期的特征和质量分级标准见附录C。1级、2级胚胎可用于鲜胚移植或冷冻保存；3级胚

胎只能用于鲜胚移植；4级胚胎为不可用胚胎。做好胚胎采集记录。

4.7胚胎洗涤

4.7.1只有来自同一头供体的胚胎才能放在一起洗涤。

4.7.2每批胚胎至少洗涤10次,直至将胚胎清洗干净。

4.7.3将胚胎从前一培养液移入下