GA/T 1623-2019 法庭科学 生物检材中涕灭威检验气相色谱-质谱和液相色谱-质谱法

ICS13.310

A92GA

中华人民共和国公共安全行业标准

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法庭科学生物检材中涕灭威检验

气相色谱-质谱和液相色谱-质谱法

Forensicsciences—Examinationmethodsforaldicarbinbiological

samples—GC-MSandLC-MS

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中华人民共和国公安部发布

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前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任

本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（SAC/TC179/SC1）提出并归口。

本标准起草单位：公安部物证鉴定中心、运城市公安局、山西医科大学。

本标准主要起草人：王瑞花、栾玉静、王爱华、任昕昕、董颖、杜鸿雁、张云峰、黄健、刘彦军，

贠克明、尉志文。

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法庭科学生物检材中涕灭威检验

气相色谱-质谱和液相色谱-质谱法

1范围

本标准规定了法庭科学生物检材（血、尿、肝、肾、胃及胃内容等）中涕灭威的气相色谱-质谱（GC-MS）

定性检验方法和液相色谱-质谱（LC-MS）定性定量检验方法。

本标准适用于法庭科学生物检材中涕灭威的定性分析和定量分析。其他可疑样品中涕灭威的定性分

析和定量分析可参照使用。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GA/T122毒物分析名词术语

3术语和定义

GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。

4原理

以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对生物检材进行提取、净化及浓缩，采用气相

色谱-质谱法定性，液相色谱-质谱法定性定量，以保留时间、质谱特征离子碎片峰和相对丰度比作为定

性判断依据；以峰面积为依据，用外标法进行定量分析。

5试剂和材料

5.1试剂

气相色谱-质谱实验用水应符合GB/T6682中规定的三级水，液相色谱-质谱实验用水应符合GB/T

6682中规定的一级水。除非另有说明，在分析中使用的试剂均为分析纯，试剂包括：

a)甲醇；

b)5%甲醇溶液：移取5mL甲醇，加水稀释至100mL；

c)乙腈（色谱纯）；

d)乙酸乙酯；

e)二氯甲烷；

f)甲酸（色谱纯）；

g)甲酸铵（色谱纯）；

h)2%氨水溶液：移取2mL氨水，加水稀释至100mL；

i)标准溶液：

1）1.0mg/mL标准物质溶液：根据涕灭威标准物质的纯度，称取适量，6用甲醇配制1.0mg/mL

涕灭威标准物质溶液，置于冰箱中冷藏保存。有效期6个月。或采用市售标准溶液；

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2）0.1mg/mL标准工作溶液：移取1.0mg/mL的涕灭威标准物质溶液1.0mL，用甲醇定容至

10mL，混匀，密封，置于冰箱中冷藏保存。有效期3个月。实验中所用其他浓度的标准

工作溶液均由0.1mg/mL标准物质溶液用甲醇稀释得到。

注：特殊情况下可使用对照溶液代替标准溶液。

5.2材料

材料包括：

a)具盖离心管；

b)具塞玻璃试管；

c)固相萃取柱：Oasis®HLB固相萃取柱或等效固相萃取柱，使用前依次用甲醇、水活化；

注：Oasis®HLB柱是Waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产

品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

d)一次性注射器；

e)有机系微孔滤膜：0.22µm。

6仪器和设备

仪器和设备包括：

a)气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源（EI）；

b)液相色谱-质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）和三重四极杆质量分析器；

c)电子天平；

d)离心机；

e)振荡器；

f)移液器。

7操作方法

7.1定性分析

7.1.1样品提取

7.1.1.1沉淀蛋白

移取血液等液体检材样品1.0mL~2.0mL或称取铰碎的肝脏等固体检材样品1.0g~2.0g于具盖离心管

中，加入乙腈2.0mL~4.0mL，振荡10min，8000r/min离心30min，取上清液经0.22μm的有机系微孔滤膜

过滤，供LC-MS分析。

7.1.1.2液液萃取

移取血液等液体检材样品1.0mL~2.0mL或称取铰碎的肝脏等固体检材样品1.0g~2.0g于具盖离心管

中，加入无水乙醇100μL，乙酸乙酯/二氯甲烷（体积比2:1）混合溶剂6mL，振荡10min，8000r/min离心

10min，分离有机相，重复提取一次，合并两次提取的有机相，置于浓缩器上40℃浓缩至干，残留物用

甲醇200L溶解，作为检材样品提取液供GC-MS分析或用0.22μm的有机系微孔滤膜过滤，供LC-MS分析。

7.1.1.3固相萃取

移取血液等液体检材样品1.0mL～2.0mL，或称取绞碎的肝脏等固体检材样品1.0g～2.0g于具盖离心

管中，用4倍体积2%氨水溶液稀释，振荡10min，8000r/min离心20min，取上清液转移至已活化好的固

相萃取柱中，依次用水3mL、甲醇3mL淋洗，弃去淋洗液，挤干水分或离心或真空抽固相萃取柱2min，

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用二氯甲烷3mL洗脱，收集洗脱液并置于浓缩器上浓缩至干，残留物用甲醇200L溶解，作为检材样品

提取液供GC-MS分析或用0.22μm的有机系微孔滤膜过滤，供LC-MS分析。

7.1.1.4质控样品制备

取等量相似基质的空白样品（若无相似基质空白样品可用血液替代）两份于具盖离心管中，一份作

为空白样品，一份添加涕灭威标准物质，作为添加样品（GC-MS添加样品的浓度为1.0µg/mL(g)，LC-MS

添加样品的浓度为10ng/mL(g)），与检材样品平行操作，得到空白样品提取液和添加样品提取液供仪器

检测。

7.1.2仪器检测

7.1.2.1仪器条件

7.1.2.1.1气相色谱-质谱条件

以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：

a)色谱柱：HP-5柱（30m×0.25mm×0.25µm）或等效色谱柱；

注：HP-5柱是Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认

可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

b)色谱柱温程：100℃保持2min，以40℃/min速率升至280℃，保持17.5min；

c)柱流量：1mL/min；

d)进样口温度：280℃；

e)传输线温度：230℃；

f)离子源温度：230℃

g)载气：高纯氮；

h)进样方式：分流进样，分流比10：1；

i)扫描方式：全扫描（SCAN），质量扫描范围40amu~450amu。

7.1.2.1.2液相色谱-质谱条件

以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：

a)色谱柱：ACQUITYUPLCHSST柱，(2.1mm×50m