DB51/T 2457-2018 斑点叉尾鮰柱形病诊断技术规程

ICS65.150

B52

DB51

四川省地方标准

DB51/T2457—2018

斑点叉尾鮰柱形病诊断技术规程

2018-04-18发布2018-05-01实施

四川省质量技术监督局发布

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DB51/T2457—2018

目次

前言...............................................................................II

1范围..............................................................................1

2规范性引用文件....................................................................1

3术语和定义........................................................................1

4试剂和材料........................................................................1

5主要设备和器械....................................................................2

6临床检查..........................................................................2

7样品采集..........................................................................2

8细菌分离与纯化....................................................................2

9细菌鉴定..........................................................................2

10结果判定.........................................................................4

11综合判定.........................................................................5

附录A（规范性附录）试剂配方........................................................6

附录B（资料性附录）柱状黄杆菌16SrRNA基因参考性序列（1477bp）....................8

I

DB51/T2457—2018

前言

本标准依据GB/T1.1-2009给出的规定进行编写。

本标准中附录A为规范性附录、附录B为资料性附录。

本标准由四川省农业厅提出并归口。

本标准由四川省质量技术监督局批准。

本标准起草单位：四川农业大学。

本标准起草人：黄小丽、耿毅、陈德芳、欧阳萍、段靖、冯杨。

II

DB51/T2457—2018

斑点叉尾鮰柱形病诊断技术规程

1范围

本标准规定了由柱状黄杆菌（Flavobacteriumcolumnare）引起的斑点叉尾鮰（IetalurusPunetaus）

柱形病的临床症状、病原鉴定方法与结果判定。

本标准适用于由柱状黄杆菌感染导致的斑点叉尾鮰柱形病的诊断。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

GB/T18652致病性嗜水气单胞菌检验方法

GB/T28630.4白斑综合征（WSD）诊断规程第4部分：组织病理学诊断法

SC/T7014水生动物检疫实验技术规范

SC/T7103水生动物产地检疫采样技术规范

SC/T7201.2鱼类细菌病检疫技术规程第2部分：柱状嗜纤维菌烂鳃病诊断方法

SC/T7213鮰嗜麦芽寡养单胞菌检测方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于此文件。

3.1

斑点叉尾鮰柱形病

指由柱状黄杆菌（Flavobacteriumcolumnare）感染引起斑点叉尾鮰（IetalurusPunetaus）发病

或死亡的一种细菌性疾病。

4试剂和材料

4.1试剂、染色液与培养基

检验中所需试剂、染色液与培养基的配制按照GB/T4789.28、GB/T18652、SC/T7014规定执行，

Taq酶、dNTPs、10×PCR缓冲液（无Mg2+）、DNA分子量标准参照物与核酸提取试剂盒选用专业试剂公司

提供的商品化试剂；微生物生化鉴定管可代替相应鉴定培养基或鉴定试剂，上述未提及的见附录A。

4.2水

应符合GB/T6682中一级水的规格。

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DB51/T2457—2018

4.3引物

16SrRNA基因DNA序列扩增引物，P-F：5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’，P-R：5’-GGTTACCTTGTT

ACGACTT-3’，保存引物的使用浓度为20μmol/L，-20℃保存。

5主要设备和器械

超净工作台、高压灭菌锅、恒温培养箱、高速冷冻离心机、水平电泳系统、凝胶成像系统、普通光

学显微镜、PCR扩增仪、电子天平、微量移液器、普通冰箱、解剖盘、剪刀、镊子、手术刀、培养皿、

铂耳丝、酒精灯等。

6临床检查

6.1临床症状

病鱼体色发黑，反应迟钝，靠边、游动迟缓，摄食减少或停止摄食。

6.2体表检查

病鱼可出现不同程度烂尾、烂鳍、烂鳃、皮肤灶性腐烂或体表溃疡灶，部分可在唇部、头部等身体

多个部位出现黄色增生物。

6.3