DB22/T 2782-2017 犬瘟热病毒检测 荧光定量RT-PCR方法

ICS11.220

B41

DB22

吉林省地方标准

DB22/T2782—2017

犬瘟热病毒检测荧光定量RT-PCR方法

DetectionofcaninedistempervirusFluorescencequantitativeRT-PCRmethod

2017-12-11发布2018-04-01实施

吉林省质量技术监督局发布

DB22/T2782—2017

前言

本标准按照GB/T1.1—2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。

本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。

本标准起草单位：吉林省动物疫病预防控制中心。

本标准主要起草人：柴方红、于钦磊、穆国冬、吴丹、白翠、刘冬冬、孙亮、卢松岩、付瑶。

I

DB22/T2782—2017

犬瘟热病毒检测荧光定量RT-PCR方法

1范围

本标准规定了犬瘟热病毒荧光定量RT-PCR检测方法。

本标准适用于犬瘟热诊断。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3缩略语

下列缩略语适用于本文件。

PBS:磷酸盐缓冲液(PhosphateBufferedSolution)

RT-PCR：反转录聚合酶链式反应（ReverseTranscriptionPCR）

PCR：聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction）

HSTaqDNA：热启动脱氧核糖核酸聚合酶（HotStartThermosAquaticusDeoxyribonucleicAcid）

Ct：循环阈值（CycleThreshold）

RNA：核糖核酸（RibonucleicAcid）

dNTPs：脱氧核苷三磷酸（DeoxynucleotideTriphosphates）

DEPC：二乙基焦磷酰胺（DiethylPyrocarbonate）

AMV：鸟类成髓细胞白血病病毒反转录酶（AvianMyeloblastosisRetrovirusReverse

Transcriptase）

4原理

采取TaqMan方法，以犬瘟热病毒F基因为靶基因设计一对保守的特异性引物和一条特异性的荧

光双标记探针。探针的结合部位位于目的扩增片段内部。其中5'端标记FAM荧光素为报告荧光基团（R），

3'端标记的TAMRA