DB51/T 2905-2022 猪A型塞内卡病毒分离鉴定技术规范

ICS11.220

CCSB41

DB51

四川省地方标准

DB51/T2905—2022

猪A型塞内卡病毒分离鉴定技术规范

TechnicalspecificationforisolationandidentificationforswinesenecavirusA

2022-05-20发布2022-07-01实施

四川省市场监督管理局发布

DB51/T2905—2022

目次

前言.................................................................................II

1范围...............................................................................1

2规范性引用文件.....................................................................1

3术语和定义.........................................................................1

4缩略语.............................................................................1

5试剂与设备.........................................................................1

5.1主要试剂.......................................................................1

5.2主要仪器设备...................................................................2

6样品的采集、保存与运输.............................................................2

6.1样品采集.......................................................................2

6.2保存与运输.....................................................................2

7病毒的细胞分离培养.................................................................2

7.1生物安全措施...................................................................2

7.2样品的处理.....................................................................2

7.3单层细胞制备...................................................................2

7.4样品接种.......................................................................3

7.5病毒收获.......................................................................3

8病毒核酸鉴定.......................................................................3

8.1RT-LAMP和RT-PCR引物...........................................................3

8.2核酸提取和反转录...............................................................3

8.3RT-LAMP反应....................................................................3

8.4RT-PCR反应.....................................................................4

8.5试验结果观察...................................................................4

9结果判定...........................................................................5

9.1RT-LAMP........................................................................5

9.2RT-PCR.........................................................................5

9.3病毒分离鉴定...................................................................5

附录A（规范性）试剂配置.............................................................6

附录B（资料性）猪A型塞内卡病毒VP1蛋白基因LAMP和RT-PCR扩增序列...................7

I

DB51/T2905—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由四川省农业农村厅提出、归口并解释。

本文件主要起草单位：四川省动物疫病预防控制中心、四川农业大学。

本文件主要起草人：陈弟诗、徐志文、陈斌、朱玲、张毅、裴超信、陈冬、邱明双、梁璐琪、李淳、

翁周、谢伟、邱凌、李波、彭晔、陈岗、魏秋霞、李英林、孙贤刚、彭珂楠、鲁令华。

本文件首次发布。

II

DB51/T2905—2022

猪A型塞内卡病毒分离鉴定技术规范

1范围

本文件规定了猪A型塞内卡病毒分离鉴定方法、RT-LAMP及RT-PCR诊断方法。

本文件适用于猪A型塞内卡病毒的病原分离和鉴定、实验室诊断、病毒检测、流行病学调查。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

NY/T541兽医诊断样本采集、保存与运输技术规范

3术语和定义

本文件