T/GXAS 492-2023 水质 2种林可酰胺类和4种大环内酯类抗生素的测定 高效液相色谱-串联质谱法

ICS13.060.50

CCSZ16

GXAS

团体标准

T/GXAS492—2023

水质2种林可酰胺类和4种大环内酯类抗

生素的测定高效液相色谱-串联质谱法

Waterquality—Determinationof2lincosamidesand4macroliedsbyhigh

performanceliquidchromatography—tandemmassspectrometrymethod

2023-05-18发布2023-05-24实施

广西标准化协会发布

目次

前言.................................................................................II

1适用范围...........................................................................1

2规范性引用文件.....................................................................1

3术语和定义.........................................................................1

4方法原理...........................................................................1

5干扰和消除.........................................................................1

6试剂和材料.........................................................................2

7仪器和设备.........................................................................2

8样品...............................................................................2

9分析步骤...........................................................................3

10结果计算及表示....................................................................5

11精密度和正确度....................................................................6

12质量保证和质量控制................................................................6

13废物处置..........................................................................6

附录A（规范性）方法的检出限和测定下限...............................................7

附录B（资料性）精密度和正确度.......................................................8

前言

本文件参照HJ168-2020《环境监测分析方法标准制订技术导则》和GB/T1.1—2020《标准化工作

导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由广西环境科学学会提出、归口并宣贯。

本文件起草单位：广西壮族自治区生态环境监测中心、广电计量检测（南宁）有限公司、广西新桂

环保科技集团有限公司、广西润测检测技术有限公司、广西壮族自治区分析测试研究中心。

本文件主要起草人：黄宁、王锦、梁丽霞、陈德翼、王晓飞、李义辉、肖艳、甘惠云、黄红、田艳、

蒙宏培、陈蓓、谢佳凝、陆强、刘佳、温丽玲、李仕锋、黄廷俊、许向阳、陈琰、黄远来、温志玲、陆

康宁、张宇昕、廖金玉、黄纯钦、石铖德、闭道军、邓敏军、叶开晓、梁晓曦、欧小辉、刘小萍、范磊、

黄红铭、彭靖恺、孙英云、潘艳坤、梁杰生、欧铭、李柳毅。

水质2种林可酰胺类和4种大环内酯类抗生素的测定高效液相

色谱-串联质谱法

警告：实验操作过程使用的有机溶剂具有较强的挥发性，试剂配制和样品前处理过程时应在通风橱

内进行操作。操作时应按要求佩戴防护器具，避免直接接触皮肤和衣物。

1适用范围

本文件描述了使用高效液相色谱-串联质谱法测定水中2种林可酰胺类和4种大环内酯类抗生素的方

法。

本文件适用于地表水、生活污水中林可霉素（Lincomycin）、克林霉素（Clindamycin）、竹桃霉

素（Oleandomycin）、泰乐霉素（Tylosin）、吉他霉素（LeucomycinA5）和交沙霉素（Josamycin）

共2种林可酰胺类和4种大环内酯类抗生素的测定，其他林可酰胺类和大环内酯类化合物经适用性验证可

参照执行。

当进样体积为5.0µL时，直接进样法的方法检出限为1.1µg/L～1.6µg/L，测定下限为4.4µg/L～

6.4µg/L；当富集样品体积为200mL时，浓缩后定容体积为1.0mL，进样体积为5.0μL时，固相萃取法

的方法检出限为2.4ng/L～9.7ng/L，测定下限为9.6ng/L～38.8ng/L。详见附录A。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

HJ91.1污水监测技术规范

HJ91.2地表水环境质量监测技术规范

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4方法原理

样品经过滤后直接进样或经固相萃取柱富集和净化后进样，用液相色谱—串联质谱仪进行检测。根

据保留时间和特征离子峰定性，外标法定量。

5干扰和消除

5.1当样品中存在基质干扰时，可通过优化色谱条件、稀释样品、减少进样体积以及对样品进行前处

理等方式降低或消除。采用固相萃取法时，还可以通过减少取样体积或增加试样的稀释倍数降低基质干

扰。

5.2当样品中存在同分异构体干扰测定时，可通过改变色谱条件提高分离度或选择不同的二级质谱子

离子消除干扰。

5.3当样品中存在余氯等氧化性物质时，可在样品采集（见8.1）时加入硫代硫酸钠（见6.8）消除干

扰。

6试剂和材料

除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水应符合GB/T6682中一级水的

要求。

6.1乙腈（CH3CN）：色谱纯。

6.2甲醇（CH3OH）：色谱纯。

6.3甲酸（HCOOH）：ρ（HCOOH）=1.22g/mL。

6.4硫酸（H2SO4）：ρ（H2SO4）=1.84g/mL。

6.5氢氧化钠（NaOH）。

6.6乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)。

6.7氢氧化钠溶液：ρ（NaOH）=0.4g/mL。称取40g氢氧化钠（见6.5）溶于水中，定容至100mL。

6.8硫代硫酸钠(Na2S203)。

6.9甲酸溶液：1+2000。取1mL甲酸（见6.3）加入2000mL水中。

6.10甲酸/甲醇混合溶液：1+1000。取1mL甲酸（见6.3）加入1000mL甲醇（见6.2）中。

6.11林可酰胺类和大环内酯类抗生素标准贮备液：ρ=100µg/mL（甲醇介质）。可直接购买有证标准

溶液，组分包括林可霉素、克林霉素、竹桃霉素、泰乐霉素、吉他霉素和交沙霉素。贮备液在-18℃以

下避光保存或参照制造商的产品说明。使用时应恢复至室温，并摇匀。

6.12林可酰胺类和大环内酯类抗生素标准使用液：ρ=1.0µg/mL（参考浓度）。将林可酰胺类和大环

内酯类抗生素标准贮备液（见6.11）按需要用甲醇（见6.2）稀释。标准使用液现配现用。

6.13微孔滤膜:13mm×0.22µm，尼龙、聚四氟乙烯材质或相当者。

6.14滤膜：0.45µm玻璃纤维滤膜，或相当者。

6.15氮气：纯度≥99.99％。

7仪器和设备

7.1采样瓶：250mL或500mL具磨口塞的棕色玻璃瓶。

7.2液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾电离源（ESI），具备流动相梯度洗脱和质谱多反应监测功能。

7.3色谱柱：填料为3.5µmODS，柱长10cm，内径2.1mm的反相色谱柱或其他等效C18反相液相色谱

柱。

7.4固相萃取装置：自动或手动，流速可调节。

7.5固相萃取柱：填料为二乙烯苯和N-乙烯基吡咯烷酮共聚物或等效萃取柱，规格为200mg/6mL，或

相当者。

7.6浓缩装置：旋转蒸发装置或K-D浓缩器、氮吹浓缩仪等性能相当的设备。

7.7pH计：带玻璃电极和适当的参比电极，精度为0.01pH，具有温度补偿功能。

7.8微量注射器或移液枪：10µL、50µL、100µL、250µL、1000µL。

7.9一般实验室常用仪器和设备。

8样品

8.1样品采集

8.1.1污水样品采集按照HJ91.1的规定执行，地表水样品采集按照HJ91.2的规定执行。

8.1.2用预先洗涤干净并干燥的采样瓶（见7.1）采集水样，采样前应使用水样润洗采样瓶，采样瓶

应完全注满不留气泡。若水中有残余氯存在，应在每500mL样品中加入40mg硫代硫酸钠（见6.8）除

氯。

8.2样品保存

水样4℃冷藏、避光保存，3d内完成分析或萃取。

8.3试样制备

8.3.1直接进样法

取适量水样经微孔滤膜（见6.13）过滤，弃去至少lmL初滤液后，移取1.0mL过滤后的样品于进样

瓶中避光保存，待测。

8.3.2固相萃取法

分别用10mL甲醇（见6.2）和10mL水活化固相萃取柱（见7.5），在活化过程中应确保萃取柱中填

料表面不露出液面。量取200mL水样，加入0.5gEDTA-2Na（见6.6），使用硫酸（见6.4）或氢氧化钠

溶液（见6.7）调节水样的pH值至3.0±0.1，水样以约5mL/min的流速通过固相萃取柱。再用10mL水淋

洗萃取柱，去除杂质。之后用氮气（见6.15）吹干萃取柱。用3mL甲酸/甲醇混合溶液（见6.10）洗脱

富集后的萃取柱，再用3mL甲酸/甲醇混合溶液（见6.10）浸泡萃取柱5min，用6mL甲酸/甲醇混合溶液

（见6.10）以1mL/min的速度洗脱样品，收集全部洗脱液。用浓缩装置（见7.6）将上述洗脱液浓缩至

1.0mL以下，用甲醇（见6.2）定容至1.0mL，混匀后过微孔滤膜（见6.13），置于进样瓶中，待测。

注：基体复杂的样品经0.45µm滤膜（见6.14）过滤后进行固相萃取。

8.4空白试样的制备

8.4.1实验室空白

以实验用水代替样品，按照与试样制备（见8.3）相同操作步骤，进行实验室空白试样的制备。

8.4.2全程序空白

采样前按照样品采集（见8.1样品保存（）和见8.2）方法，以实验用水代替样品，在采样现场制备

全程序空白样品。

9分析步骤

9.1仪器调试

9.1.1液相色谱条件

9.1.1.1流动相：流动相A甲酸溶液（见6.9），流动相B乙腈（见6.1），梯度洗脱程序见表1。

表1液相色谱流动相梯度洗脱程序

时间AB

min％％

09010

7.07525

7.13565

12.02080

12.19010

14.09010

9.1.1.2流速：0.5mL/min。

9.1.1.3柱温：25℃。

9.1.1.4进样体积：5.0µL。

9.1.2质谱条件

9.1.2.1电喷雾离子源（ESI），正离子模式。

9.1.2.2毛细管电压：4.0kV。

9.1.2.3干燥气温度：350℃。

9.1.2.4干燥气流速：11L/min。

9.1.2.5雾化气气压：1.72×105Pa（25psi）。

9.1.2.6林可酰胺类和大环内酯类抗生素的多反应监测条件见表2。

表2林可酰胺类和大环内酯类抗生素的多反应监测条件

母离子子离子驻留时间碰撞电压碰撞能量

化合物名称

m/zm/zsVeV

126.0*14030

林可霉素407.00.1

359.014015

126.0*14030

克林霉素425.0