DB5304/T 059-2023 动物疫病监测采样技术规范

ICS11.220

CCSB41

5304

玉溪市地方标准

DB5304/T059—2023

动物疫病监测采样技术规范

2023-04-20发布2023-07-19实施

玉溪市市场监督管理局发布

DB5304/T059—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由玉溪市动物疫病预防控制中心提出。

本文件由玉溪市农业农村局归口。

本文件起草单位：玉溪市动物疫病预防控制中心

本文件主要起草人：杨耀兰、吕嵘、宋诗雅、罗晓燕、杨秋楠、李晶、徐聪、张晓舟、赵明丽、吴

明伟、荚洪涛、杨曦、魏建宏。

I

DB5304/T059—2023

动物疫病监测采样技术规范

1范围

本文件规定了动物疫病监测样品的采样原则、采样准备、样品采集与处理、样品记录、样品保存、

样品运送与包装、废弃物无害化处理等技术内容。

本文件适用于兽医诊断、疫情监测、畜禽疫病防控和免疫效果评价等动物疫病实验室检测所需样品

（病料）的采集、保存和运送。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

动物疫病监测

调查动物群体中某种疫病或病原的存在情况。

3.2

样品

取自动物或环境，拟通过检测反映动物个体、群体或环境有关状况的材料或物品。

3.3

采样

按照规定的程序和要求，从动物或环境取得一定量的样本，并经过适当的处理，留做待检样品的过

程。

4采样原则

——急性死亡的患畜，怀疑患有炭疽时，先排除炭疽后，再进行解剖取样。

——诊断或被动监测时，根据不同疫病或检测目的，采集1～3头（只）病死或濒死动物相应样品，

病料必须具有代表性（见附录A）。

1

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——用于流行病学调查、抗体监测、动物群体健康评估等样品，数量、种类、分布等要满足流行

病学调查和生物统计学的要求。

——采集死亡动物病料，应于动物死亡后2小时内采集；无法完成时，夏天不得超过6小时，冬

天不得超过24小时。

——采样过程应注意无菌操作，所需器具均应事先严格灭菌。

——活体动物采样时，应避免过度刺激或损害动物。

——做好个人安全防护、环境消毒和病害肉尸的无害化处理。

5采样准备

5.1人员准备

采样人员应熟练掌握采样工作程序和采样操作技术，做好个人安全防护。

5.2器械和物品

5.2.1保定器械

保定器（绳）、牛鼻钳、口笼等。

5.2.2工具物品

采样箱（或冷藏箱）、解剖刀、手术剪、镊子、钢锯、骨剪、探杯、酒精灯、酒精棉、注射器、一

次性采血针、离心管、试管、试管架、平皿、样品袋、玻片、无菌棉拭子、冰袋、封条、废弃物袋等。

5.2.3防护用品

防护服、防护帽、口罩、手套、胶鞋、护目镜、消毒药、喷壶等。

5.2.4记录用品

采样单、记号笔、签字笔、不干胶标签、记录本等。

5.3保存液

25%～50%甘油生理盐水（加双抗）、阿氏液、PBS液等（附录C）。

6样品采集与处理

6.1血液样品

6.1.1采血部位

——猪：前腔静脉、耳缘静脉、股静脉、前肢隐静脉采血；

——禽类：翅静脉、心脏、颈静脉采血；

——牛、羊、马：颈静脉、尾静脉、耳缘静脉、乳房静脉采血；

——犬、猫：前臂头静脉、颈静脉采血；

——兔：耳背静脉、颈静脉或心脏采血；

——啮齿类动物：尾尖采血、眼窝内的血管丛采血。

2

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6.1.2血样处理

6.1.2.1血清样品

分离血清的样品不加抗凝剂，采集全血3~5mL置于采血管中，在室温（20℃~25℃）静置，待血液

凝固，血清自然析出或进行离心分离，收集备用。若需长时间保存，应将血清置-20℃以下保存，且应

避免反复冻融。

6.1.2.2全血样品

采样前样品容器中加入抗凝剂，充分摇匀，低温备用。抗凝剂可用乙二胺四乙酸（EDTA，PCR检测

血样首选抗凝剂）、0.1%肝素钠、阿氏液（见附录C.1，2份阿氏液可抗1份血液）、3.8%～4%枸橼酸钠

溶液（0.1mL可抗1mL血液）等。全血样品采集3~5mL。

6.1.2.3血浆样品

样品容器内先加入抗凝剂（同全血样品），采集全血3~5mL后摇匀，然后静置，待红细胞自然下沉

或离心沉淀后，取上清液即为血浆。

6.2组织样品

6.2.1病原分离样品

以无菌技术采集淋巴结、肝脏、肾、脾、胰腺、心、肺等组织样品（大约2cm3～5cm3），分别放入

灭菌容器或样品袋内。

6.2.2组织病理学样品

选取典型、明显的病变部位，连同健康组织一同切下，立即放入不低于10倍于组织块的10%福尔

马林溶液（见附录C.7）中固定。固定器具避免使用金属材质，组织块厚度不超过0.5cm，体积在2cm3～

3cm3。组织块切忌挤压、刮摸和用水洗。如作冷冻切片用，则将组织块放在0℃～4℃容器中，尽快送往

实验室。

6.2.3猪扁桃体样品

用开口器打开猪口腔，将活体采样器的采样钩紧靠扁桃体，扣动扳机取出扁桃体组织2g。

6.2.4皮肤组织及其附属物样品

6.2.4.1上皮组织或水泡皮

无菌采集2g病变的上皮组织或水泡皮（坏死组织、痂皮、丘疹、结节、脓包等）置于25%～50%甘油

生理盐水缓冲液（加双抗）（见附录C.6）。未破裂的水泡，用灭菌注射器或其他器具抽取水泡液，装

入灭菌容器中送检。若水泡皮表面有污物，用清水清洗，切忌使用酒精、碘酒等消毒剂消毒、擦拭。

6.2.4.2毛发和绒毛样品

拔取毛发或绒毛样品，用于检查体表的螨虫、跳蚤和真菌感染。用解剖刀片沿边缘刮取的表层皮屑

2g用于检查皮肤真菌，深层皮屑（刮至皮肤轻微出血）可用于检查疥螨。

6.2.5脑、脊髓样品

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较小动物，取整个头部，无菌纱布包裹并密封待用；较大动物，采取开颅无菌取样、用采样勺从延

脑腹侧插入枕骨大孔取样（疯牛病和羊痒病样品）、用内径0.5cm塑料吸管插入枕骨大孔取样（犬脑组

织样品）等方法，脑、脊髓样品采集不少于10g，浸入30%甘油盐水缓冲液（见附录C.2）保存。

6.2.6骨、骨髓样品

——骨：将附着的肌肉和韧带等全部除去，表面撤上食盐，然后用浸过5%石炭酸溶液的纱布包裹，