DB35/T 1672-2017 蜜蜂微孢子虫病诊断方法

ICS65.140.10

B47

DB35

福建省地方标准

DB35/T1672—2017

蜜蜂微孢子虫病诊断方法

ProtocolofdiagnosisforNosemosisofbees

2017-07-03发布2017-10-03实施

福建省质量技术监督局发布

DB35/T1672—2017

目次

前言....................................................................................................................................................................II

1范围..............................................................................................................................................................1

2规范性引用文件..........................................................................................................................................1

3疾病概述......................................................................................................................................................1

4设备、材料和试剂......................................................................................................................................1

5临床诊断......................................................................................................................................................3

6采样..............................................................................................................................................................3

7实验室诊断..................................................................................................................................................3

8综合判定......................................................................................................................................................5

附录A（规范性附录）试剂配制................................................................................................................6

附录B（资料性附录）微孢子虫图片........................................................................................................8

附录C（资料性附录）参考序列..............................................................................................................10

附录D（资料性附录）核酸扩增电泳图...................................................................................................11

I

DB35/T1672—2017

前言

本标准按照GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。

本标准由福建出入境检验检疫局提出并归口。

本标准起草单位：福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心、福建农林大学、吉林出入境检验检疫

局、北京出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：张体银、郑腾、黄少康、白泉阳、宋战昀、王武军、张志灯、张伟、于师宇。

II

DB35/T1672—2017

蜜蜂微孢子虫病诊断方法

1范围

本标准规定了蜜蜂微孢子虫病疫病概述、设备、材料和试剂、临床诊断、采样、实验室诊断和综合

判定。

本标准适用于蜜蜂微孢子虫病的诊断和蜜蜂微孢子虫、东方蜜蜂微孢子虫的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682—2008分析实验室用水规格和试验方法

3疾病概述

3.1病原学

蜜蜂微孢子虫病又名蜜蜂微粒子病，是世界上养蜂国家重要的检疫性病害。目前发现并确认的蜜蜂

微孢子虫有2种，一种是蜜蜂微孢子虫（Nosemaapis），另一种是东方蜜蜂微孢子虫（Nosemaceranae）。

前者寄生西方蜜蜂A.mellifera，后者寄生东方蜜蜂Acernan、西方蜜蜂A.mellifera和沙巴蜂

A.koschevnikovi。

3.2流行病学

微孢子虫病是目前蜜蜂病害中最引人关注、研究最广的一种病，该病在世界范围内存在。水平传播

是蜜蜂微孢子虫病的的主要方式，孢子在蜂群中的传播主要通过粪便—口腔途径，蜜蜂个体间的食物交

换、蜜蜂个体取食受污染的食物、迷巢蜂和盗蜂均可引起该病在蜂群间的传播。微孢子虫病既能感染蜂

王，导致蜂王卵巢发育不良；也可感染工蜂成年蜂、幼虫和蛹，造成蜂群的营养不良、体质下降、寿命

缩短、产量下降等危害，不仅造成蜂群衰亡，使生产和繁殖均受影响，而且因授粉能力下降而带来的农

业损失难以估量。如果与其他蜜蜂病原共同感染，引发并发症，其损失更加严重。

4设备、材料和试剂

4.1设备

4.1.1培养箱（37℃±1℃）。

4.1.2高速冷冻离心机。

4.1.3生物安全柜。

4.1.4冰箱（2℃～8℃和-20℃）。

4.1.5微量可调移液器。

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4.1.6梯度PCR仪。

4.1.7电泳仪。

4.1.8紫外凝胶成像系统。

4.1.9光学显微镜。

4.2材料和试剂

4.2.1试验用水：应符合GB/T6682—2008所规定的一级水要求