T/LTIA 18-2022 时空组学 时空转录组样本制备操作规范

范围:本文件提供了时空转录组的组织样本冷冻包埋和石蜡包埋的制备建议。 本文件适用于开展时空组学研究的相关机构; 主要技术内容:石蜡包埋宜采用如下步骤： a) 将融化的石蜡（硬蜡）倒入包埋模具中； b) 将浸蜡后的组织块按切面或指定面朝下，并埋入含有熔蜡的包埋模具中； c) 将组织块平整的置放于包埋模具的底面中央，避免气泡的产生； d) 当蜡块冷却至蜡面出现一层透明蜡膜时，浸入冷水中迅速使其冷却； e) 从包埋模具中取出包埋组织块，将样品编号封于蜡块上，避免混淆； f) 用刀片修正成为规则的正方形或长方形，并可粗视到包埋组织块切面。切片宜采用如下步骤： a) 切片机的使用参照厂商提供的使用方法，组织切片厚度见附录 B； b) 切片机刀口运行方向与包埋组织块切面平行，并根据样本类型和预期要求调整所需切片厚度 后进行切片。切片完整、均匀、无刀痕颤痕、无褶皱开裂和缺损，宜进行镜检； c) 选取合适的石蜡组织切片放入 37 ℃～50 ℃的温水中使其展开后附于载玻片上。附着的过程避 免切片与载玻片之间产生气泡； d) 将载玻片斜置流出多余水分，并进行烘烤； e) 在载玻片一端贴上样本条形码标签，在 HE 染色后进行组织成像