DB45/T 1532-2017 铁皮石斛种苗组培快繁技术规程

ICS65.020.20

B9999B

DB45

广西壮族自治区地方标准

DBDB1532—201745/T

铁皮石斛种苗组培快繁技术规程铁皮石斛种苗组培快繁技术规程

TechnicalregulationsforrapidpropagationpropagationrapidforregulationsTechnicalDendrobiumofseedlingsculturetissueof

candidum

2017-05-10发布2017-06-10实施

广西壮族自治区质量技术监督局发布

DB45/T1532DB45/T—2017

目次

前言................................................................................II................................................................................前言

11..............................................................................范围

21....................................................................规范性引用文件

31........................................................................术语和定义

41..........................................................................场所要求

52................................................................仪器设备及化学试剂

62..................................................................组织培养生产流程

74......................................................................建立生产档案

附录A（规范性附录）组培常用化学试剂5................................................

附录B（规范性附录）Murashige和Skoog（MS）培养基配制7...............................

参考文献.............................................................................9.............................................................................参考文献

I

DB45/T1532DB45/T—2017

前前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。1.1—2009给出的规则起草。本标准按照GB/T

本标准由广西壮族自治区农业科学院提出。

本标准由广西壮族自治区农业厅归口。

本标准起草单位：广西壮族自治区农业科学院农产品加工研究所、南宁市元敬本草堂生物科技有

限公司。

本标准主要起草人：张娥珍、何全光、辛明、淡明、张向军、马荣刚、黄茂康、黄振勇。

III

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铁皮石斛种苗组培快繁技术规程铁皮石斛种苗组培快繁技术规程

11范围

本标准规定了铁皮石斛种苗组培快速繁育技术的术语与定义、场所要求、仪器设备及化学试剂、

组织培养生产流程、建立生产档案。

本标准适用于广西境内铁皮石斛种苗的组培快繁技术。

22规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB3095—2012环境空气质量标准环境空气质量标准3095—2012GB

GB4285（所有部分）农药安全使用标准4285（所有部分）GB

GB5084—2005农田灌溉水质标准农田灌溉水质标准5084—2005GB

《中华人民共和国药典》2015年版一部《中华人民共和国药典》2015年版一部

国家药品监督管理局令[2012年第32号]《中药材生产质量管理规范》（试行）国家药品监督管理局令[2012年第32号]《中药材生产质量管理规范》（试行）

33术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.13.1

铁皮石斛蒴果dendrobiumcandidumcapsulecapsulecandidumdendrobium铁皮石斛蒴果

由合生心皮的复雌蕊发育成的果实，子房多室，每室有多粒种子，含大量无胚乳的淡黄色种子。

3.23.2

原球茎protocormprotocorm原球茎

铁皮石斛种子在组培中诱导产生的球状原胚。

44场所要求

4.14.1环境条件

应有专用的组培室,组培室所使用的水源应符合GB5084—2005中二级标准要求，达到去离子水标

准；组培室周围环境的空气质量应符合GB3095—2012中要求。二级或以上

4.24.2组培室

4.2.14.2.1周边环境

组培室周围环境必需干燥、洁净，不允许有垃圾或其他污染源，四周通风良好。

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DB45/T1532DB45/T—2017

4.2.24.2.2功能区划分

应分更衣室，配料室，储存室，接种室，培养室，消毒灭菌室，隔离带等。

4.2.34.2.3功能区标准

各区应达到其相应的控制指标，更衣室、培养基储存室、接种室、培养室需达到30万级以上洁净

度。

55仪器设备及化学试剂

5.15.1组培仪器

仪器设备应包括灭菌设备、培养设备和无菌操作台。

5.25.2组培器具

组培所需的玻璃器皿及器材包括盛装器皿（烧杯、试剂瓶等）、计量器皿（量筒、容量瓶等）、接

种器具、组培瓶等。

5.35.3常用试剂

常用化学试剂包括组培苗生产所用基本培养基所需的无机盐类和有机物类，应符合附录A的要求。

66组织培养生产流程

6.16.1工艺流程

6.1.16.1.1人员要求

组织培养操作人员应身体健康，无传染性疾病，技能娴熟，进入组培室前需洗手换鞋，经过缓冲

带后方可进入。操作时不应随意谈话、说笑，以减少污染。

6.1.26.1.2操作准备

6.1.2.16.1.2.1操作人员洗手后，用75％的酒精喷手于操作台内吹干，勿双手互擦。更换拖鞋、穿白大褂（或

接种服），戴上帽、口罩。

6.1.2.26.1.2.2接种前应准备好酒精灯或电热灭菌器、酒精或新洁尔灭、无菌脱脂棉或纱布以及接种器械、

培养基、接种用苗等。

6.1.2.36.1.2.3超净工作台用75％的酒精或0.1％新洁尔灭仔细擦一遍，提前30min开机通风，同时打开操

作间、更衣室的紫外灯20min～30min，关掉紫外灯15min～20min后人员才可进入室内。接种器械用

棉布或纸包好，用高压灭菌锅在1.1kg/cm2～1.2kg/cm2下，121℃灭菌20min～30min。

6.1.36.1.3接种

6.1.3.16.1.3.1把消毒过的培养瓶摆放在工作台左边，取一个消毒过的接种盘放在面前，取一瓶待接的苗瓶，

用泡了酒精的纱棉或方巾擦拭瓶子外部，左手握瓶，培养瓶要拿成斜角，右手持镊子，小心把组培苗夹

出，放在接种盘里。

6.1.3.26.1.3.2放下空瓶子，