T/ZHCA 016-2022 化妆品舒缓功效评价 斑马鱼幼鱼中性粒细胞抑制率法

ICS7110070

Y42..

团体标准

T/ZHCA016—2022

化妆品舒缓功效评价

斑马鱼幼鱼中性粒细胞抑制率法

Soothingeffectevaluationofcosmetics—

Methodforinhibitionrateofneutrophilinzebrafishlarvae

2022-01-25发布2022-03-15实施

浙江省健康产品化妆品行业协会发布

T/ZHCA016—2022

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由杭州环特生物科技股份有限公司提出

。

本文件由浙江省健康产品化妆品行业协会归口

(ZHCA)。

本文件主要起草单位杭州环特生物科技股份有限公司云南贝泰妮生物科技集团股份有限公司

:、、

浙江养生堂天然药物研究所有限公司

。

本文件参与起草单位国珍健康科技北京有限公司杭州百芮生物科技有限公司杭州睿道医药

:()、、

科技有限公司杭州希科检测技术有限公司华测检测认证集团股份有限公司纳爱斯浙江科技有限公

、、、

司片仔癀上海生物科技研发有限公司完美广东日用品有限公司浙江方圆检测集团股份有限公

、()、()、

司浙江雅露生物科技有限公司

、。

本文件主要起草人周示玉程紫莹王飞飞呼谧允刘晶朱智杰李海龙徐美芬陶竞越蔡国强

:、、、、、、、、、、

赵晓石飞胡丹张立发

、、、。

Ⅰ

T/ZHCA016—2022

化妆品舒缓功效评价

斑马鱼幼鱼中性粒细胞抑制率法

1范围

本文件规定了一种用于评价化妆品舒缓功效的方法

。

本文件适用于化妆品及其原料舒缓功效的评价

。

本文件仅适用于能溶于水或能均匀分散成悬浮水溶液的受试物

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

化学品鱼类延长毒性天试验

GB/T2180814

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

受精后天数daypost-fertilizationdpf

;

斑马鱼受精卵受精后的天数

。

32

.

最大耐受浓度maximumtoleratedconcentrationMTC

;

的斑马鱼幼鱼未出现任何死亡无心跳和其他毒性效应心包水肿躯干弯曲对机械刺激无

3dpf()(、、

反应肌肉纹理不清晰等的最高浓度

、)。

4方法原理

十二烷基磺酸钠能诱发表皮炎症细胞浸润导致皮肤出现红斑瘙痒疼痛等症状暴

(SLS),、、。SLS

露于斑马鱼皮肤表面能同样诱导炎症反应导致中性粒细胞发生免疫应答向皮肤表面增殖和迁移

,,,。

使用转基因中性粒细胞绿色荧光品系斑马鱼进行实验通过图像分析方法可对中性粒细胞进行计数

,。

将受试物暴露于斑马鱼皮肤表面后与对照组相比计算受试物对斑马鱼中性粒细胞的抑制率从而评

,,,

价其舒缓功效

。

5材料和试剂

除非另有说明所用试剂均为分析纯实验用水应符合对水质的要求

,。GB/T21808。

51斑马鱼幼鱼使用转基因中性粒细胞绿色荧光品系斑马鱼的幼鱼

.:[Tg(mpx:EGFP)]。

52甲基纤维素

.(methylcellulose,CAS:9004-67-5)。

1

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53甲基纤维素称取甲基纤维素缓慢加入到沸水中边加边搅拌完全溶解

.3%:3.0g(5.2),97.0g,,

后停止加热继续搅拌冷却至室温用铝箔纸密封烧杯口放在冰箱保存

,,,,4℃。

54标准稀释水按附录中描述的方法配制

.:A。

55十二烷基磺酸钠纯度

.(sodiumlaurylsulfonate,SLS,CAS:2386-53-0,≥98%)。

56甘草酸二钾纯度

.(dipotassiumglycyrrhizinate,CAS:68797-35-3,≥95%)。

57造模剂十二烷基磺酸钠称取加入助溶剂溶解后用标准稀

.(60μg/mL