GB/T 23476-2009 松材线虫病检疫技术规程

囝亘

中华人民共和国国家标准

GB／T

松材线虫病检疫技术规程

Technicalonforthewiltdisease

regulationquarantinepine

2009-04-02009—09—0

1发布1实施

丰瞀鳃紫瓣警矬瞥翼发布中国国家标准化管理委员会仪1”

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GB／T

刖昌

本标准的附录F为规范性附录，附录A、附录B、附录C、附录D、附录E、附录G为资料性附录。

本标准由国家林业局提出。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会归口。

本标准负责起草单位：国家林业局森林病虫害防治总站、江苏省森防站。

本标准主要起草人：熊惠龙、李海燕、徐克勤、赵宇翔。

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松材线虫病检疫技术规程

1范围

本标准规定了松材线虫病的检疫技术规程。

本标准适用于松材线虫寄主植物及其加工制品等检疫工作。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB／T23478--2009松材线虫普查监测技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3．1

wiltdiseasecausedwoodnematode

松材线虫病pinebypine

由松材线虫寄生在松树体内引起松树迅速死亡的一种毁灭性林木病害。又称松树萎蔫病、松材线

虫萎蔫病、松树枯萎病。

3．2

et

Buhrer)Nickle

松材线虫Bursaphelenchusxylophilus(Steiner

(Bursaphelenchus)。

3．3

检疫quarantine

为了保护一个国家或一个地区人民的身体健康和农林牧业的生产安全，根据国家和地方政府颁布

的检疫法规，由法定的专门机构，对那些主要通过人为活动而远距离传播的流行性疫病所采取的检疫检

验和严格的检疫处理措施。

3．4

diseasedwood

疫木the

感染松材线虫病的寄主植物及其制品。主要为松属(Pinus)植物及其制品，包括松木包装材料、电

缆盘等。

3．5

检疫检验quarantineinspection

对检疫法规所规定应施检疫的森林植物及其产品，通过一定的技术手段检查、检验是否带有害

生物。

3．6

insect

媒介昆虫intermediary

将松材线虫由罹病树中携带而出，通过补充营养或产卵时造成的创口又将其传染到其他寄主松树

上的昆虫，是松材线虫病发生不可缺少的条件，是松材线虫病侵染循环的组成部分之一。松材线虫病媒

】

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介昆虫必须具备以下三个条件：一是生活史与松材线虫的生活史相吻合；二是具有一定的种群密度}三

是能够携带一定数量的松材线虫。

3．7

woodandwoodenware

松木及制品pine

松属原木、锯材和用于承载、包装、铺垫、支撑、加固货物的木质材料，如木板箱、木条箱、木托盘、木

框、木桶、木轴、木楔、垫木、枕木、衬木等。经人工合成或经加热、加压等深度加工的包装木质材料，如胶

合板、纤维板等除外。

3．8

松墨天牛Monochamusalternatus

Hope

天牛属(Monochamus)，是松材线虫病的主要媒介昆虫。又名松褐天牛、松天牛。

3．9

blue-stain

木材蓝变wood

由于蓝变菌(或称青变菌)的存在而导致木材变为蓝灰色。它是松材线虫病木取样的一个辅助而非

必要依据。

3．10

larvae

分散型3龄幼虫(LⅢ)dispersalthird—stage

夏末初秋，松材线虫病枯死木中出现与增殖期3龄幼虫不同的另一类型3龄幼虫，从形态上表现出

内含物显著增加，它可以抵抗不良环境条件如冬季寒冷和木材失水，被称为分散型3龄幼虫。

3．11

larvae

持久型4龄幼虫(LⅣ)dauer

由分散型3龄幼虫蜕变而来，除虫体角质膜较厚外，它没有口针，食道退化，头圆丘形，尾端明显指

状，体表覆盖保护性的胶粘物。易于附着在媒介昆虫的体上，以利于媒介昆虫的携带和传播。

3．12

批batch

应检验对象的抽样单位。“批”是指同一地点、同一日期、同一品名和同一运输工具运载的应检验

物品。

3．13

抽样sampling

为确定应检验对象是否感染松材线虫，根据检疫技术规程要求而抽取一定数量样本的过程。

4应施检疫的植物及其产品

来自国内外疫情发生区的松属、雪松属、冷杉属、云杉属和落叶松属等植物的苗木、接穗、插条、盆景

等生长繁殖材料；来自国内外疫情发生区的上述植物的木材、枝桠、根桩、木片以及它们的制品；来自非

发生区违规调运或不具备合法手续的松木及制品等；带有松材线虫及其传播媒介昆虫活体的货物、包装

材料、铺垫材料及运输工具。自然界感染松材线虫病的寄主植物和通过人工接种感染此病的植物名录

见附录A。

5现场检疫

5．1产地检疫

5．1．1直观检验

产地检疫的直观检验主要通过现场踏查的方法进行。用目测方法查找有无死树或针叶褪色和黄

化、枯萎变成红褐色并整齐地挂在松枝上，树脂分泌减少直至停止，近期死亡等典型症状的松树，选择抽

2

GB／T23476--2009

样对象。

5．1．2抽样

5．1．2．1抽样的对象

按照GB／T23478--2009中4．5．1．3执行(参见附录B)。

5．1．2．2抽样时考虑的因素

23478

按照GB／T2009中4．5．1．4执行(参见附录B)。

5．1．2．3抽样的数量

按照GB／T23478--2009中4．6．1执行(参见附录B)。

5．2调运检疫

5．2．1现场直观检验

5．2．1．1直接观察和借助锯、斧等工具检查应施检疫的松木或其加工制品等是否干枯；重量是否明显

减轻；木质部是否有蓝变；松脂味是否消失；有无媒介昆虫栖居的痕迹，如侵入孔、蛀道、蛹室等。

5．2．1．2检查松树及其枝条是否有天牛危害、补充营养取食痕迹。

5．2．2抽样

5．2．2．1抽样比例

按照GB／T23478--2009中4．8．1执行(参见附录B)。

5．2．2．2抽样方法

按照GB／T23478--2009中4．8．2执行(参见附录B)。

5．3复检

按照5．2调运检疫执行。

6取样方法

23478

按照GB／T2009中4．7执行(参见附录B)。

7松材线虫的室内鉴定

7．1松材线虫的分离

一般采取贝尔曼漏斗法、浅盘分离法、改进型线虫分离器分离(参见附录C)。

7．2松材线虫的镜检

7．2．1当在解剖镜下观察培养皿中的线虫分离液，发现线虫时，挑出(挑取时可选用500pL移液枪挑

取)做成临时水玻片(参见附录D)；或用尖头吸管吸取沉淀管底部分离液1～3滴，滴于载玻片上，在解

剖镜下观察，发现有线虫时制成临时水玻片。

7．2．2将临时水玻片置于显微镜下观察、测量。

7．3松材线虫的培养

当只分离到幼虫或雌、雄成虫数量极少时，可以采用疫木保温保湿或真菌单异括体培养方法快速培

养松材线虫(参见附录D)。不具备松材线虫真菌培养基质制作的检疫单位可以委托有无菌培养条件的

单位制作。真菌培养基质4℃冰箱冷藏备用。

7．4松材线虫的形态学鉴定

7．4．1形态鉴定

根据松材线虫成虫的形态特征为鉴定依据对松材线虫进行鉴定。松材线虫成虫形态特征参见附录E。

松材线虫的繁殖型幼虫、分散型幼虫和持久型幼虫作为鉴定的辅助特征。

7．4．2检验记录

有关检验情况和鉴定结果填人《松材线虫病检验记录表》(见附录F)。

3

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7．5松材线虫的分子生物学鉴定

分子生物学鉴定不受松材线虫龄期的影响，无须培养即可对松材线虫幼虫进行鉴定。PCR技术作

为形态学鉴定的辅助手段，对于鉴定那些形态特征不够典型的松材线虫或拟松材线虫以及幼虫有很大

的帮助。具体方法参见附录G。

8检疫结果

——被检样品中未发现松材线虫的，作为签发“植物检疫证书”的依据。

——被检样品中发现松材线虫的，作为签发“检疫处理通知单”的依据。

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附录A