DB35/T 1938-2020 饲料中沙门菌和沙雷菌二重实时荧光PCR检测方法

ICS65.120

B46

DB35

福建省地方标准

DB35/T1938—2020

饲料中沙门菌和沙雷菌二重实时荧光PCR

检测方法

Duplexreal-timePCRassayforSalmonellaandSerratiainfeeds

2020-09-29发布2020-12-29实施

福建省市场监督管理局发布

DB35/T1938—2020

目次

前言................................................................................II

1范围..............................................................................1

2规范性引用文件....................................................................1

3缩略语............................................................................1

4检测原理..........................................................................1

5主要仪器..........................................................................2

6培养基和试剂......................................................................2

7样品的采集和制备..................................................................2

8操作步骤..........................................................................2

9检测过程中防止交叉污染的措施......................................................4

附录A（规范性附录）培养液的配制....................................................5

I

DB35/T1938—2020

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由中华人民共和国福州海关提出并归口。

本标准起草单位：福州海关技术中心、海口海关技术中心、福建农林大学动物科学学院、厦门瑞德

利校准检测技术有限公司。

本标准主要起草人：王武军、张体银、吴山楠、阮靖华、郑腾、俞道进、郑晶、白泉阳、王莹莹、

张志灯、于师宇、林杰。

II

DB35/T1938—2020

饲料中沙门菌和沙雷菌二重实时荧光PCR检测方法

1范围

本标准规定了饲料中沙门菌和沙雷菌二重实时荧光PCR检测方法有关的检测原理、主要仪器、培养

基和试剂、样品的采集和制备、操作步骤、检验过程中防止交叉感染的措施。

本标准适用于饲料中沙门菌和居泉沙雷菌的快速检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T13091饲料中沙门氏菌的测定

GB19489实验室生物安全通用要求

3缩略语

下列缩略语适用于本文件。

Real-timePCR：荧光PCR（Real-timePolymeraseChainReaction）

DNA：脱氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAcid）

Ct值：每个反应管内的荧光信号量达到设定的荧光阈值时所经历的循环数（CycleThresholdValue）

4检测原理

4.1用非选择性液体培养基预增菌

将饲料样品接种到缓冲蛋白胨水，在36℃±1℃条件下培养16h～20h。

4.2在选择性培养基上增菌

将4.1中的培养物接种到亚硒酸盐胱氨酸培养基和氯化镁-孔雀绿培养基中，分别于36℃±1℃、

42℃±