GB/T 46526-2025 生物技术 分析方法 生物制造过程中基于风险考虑的微生物快速检测方法选择与确认

ICS07.080

CCSB04

中华人民共和国国家标准

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

生物技术分析方法生物制造过程中

基于风险考虑的微生物快速检测方法

选择与确认

Biotechnology—Analyticalmethods—Risk⁃basedapproachformethod

selectionandvalidationforrapidmicrobialdetectioninbioprocesses

（ISO24190：2023，IDT）

2025⁃10⁃31发布2026⁃05⁃01实施

国家市场监督管理总局

国家标准化管理委员会发布

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

目次

前言…………………………Ⅲ

1范围………………………1

2规范性引用文件…………………………1

3术语和定义………………1

4一般性考量………………5

5微生物污染风险管理……………………6

5.1生产过程中的风险管理……………6

5.2微生物检测的风险管理……………7

6选择合适的检测方法……………………7

6.1通则…………………7

6.2测定选择……………7

6.3试剂盒或系统选择…………………8

6.4各种测试类型的注意事项…………8

6.5用户要求规范………………………9

7确认………………………10

7.1一般概念……………10

7.2确认微生物的选择…………………11

7.3方法确认的质量设计………………11

7.4重新方法确认………………………12

7.5系统确认……………12

7.6在确认中使用标准物质/标准样品………………12

7.7目标确认参数的验收标准…………12

7.8精密度………………13

7.9检出限………………13

7.10准确度……………13

7.11鲁棒性……………13

7.12耐用性……………14

8微生物快速检测的使用和应用…………14

8.114

样品的数量和类型…………………

8.2测试环境……………14

8.314

灵敏度………………

8.4分析特异性（微生物检测）…………14

8.5可比测试数据………………………15

Ⅰ

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

9对阳性无菌结果的调查…………………15

10培训……………………15

11文档……………………16

12测试报告………………16

附录A（资料性）识别微生物污染的典范框架…………17

附录B（资料性）细胞治疗产品相关输入材料的风险分析中的供体选择……………18

附录C（资料性）细胞治疗产品相关输入材料的风险分析中的细胞转化和扩增……19

附录D（资料性）细胞治疗产品相关输入材料的风险分析中的包装、储存和管理…20

附录E（资料性）细胞治疗产品生产监控实践的风险分类……………21

附录F（资料性）微生物快速检测方法的确认…………22

F.1概述…………………22

F.2检出限………………22

F.3鲁棒性………………23

附录G（资料性）用于确认快速微生物检测方法的微生物……………24

附录H（资料性）微生物快速检测方法…………………28

H.1基于序列的方法……………………28

H.2固相细胞仪…………………………28

H.3倾斜纳米阵列………………………28

H.4光谱分析和偏最小二乘法…………28

H.5基于生物发光的测试………………28

H.6质谱技术……………28

H.7流式细胞术…………………………29

H.8液相色谱⁃质谱联用技术…………29

H.9结合亲和力测定……………………29

附录I（资料性）环境监测………………32

参考文献····················································································································33

Ⅱ

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规

定起草。

本文件等同采用ISO24190：2023《生物技术分析方法生物制造过程中基于风险考虑的微生

物快速检测方法选择与确认》。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由全国生化检测标准化技术委员会（SAC/TC387）提出并归口。

本文件起草单位：中国测试技术研究院生物研究所、成都中科奥格生物科技有限公司、成都奇璞生

物科技有限公司、北京市科学技术研究院分析测试研究所（北京市理化分析测试中心）、兰州百源基因

技术有限公司、迈克生物股份有限公司、华域生物科技（天津）有限公司、四川新生命干细胞科技股份有

限公司、深圳市易瑞生物技术股份有限公司、四川大学、广州质量监督检测研究院、成都世联康健生物

科技有限公司、四川省细胞库有限公司、四川省天府细胞质量检测与评价中心有限公司、常州药物研究

所有限公司、广州盛安医学检验有限公司、湖南光琇高新生命科技有限公司、百仑生物科技（江苏）有限

公司、四川振兴检测科技股份有限公司。

本文件主要起草人：周李华、潘登科、龚曼琳、邢向阳、王炳志、杨恒钰、叶德萍、罗旭锦、冉丹、宋磊、

牟春琳、田卫东、龙腾镶、何国山、杜美红、车团结、杨超、吴康莉、付辉、汤颖峰、王西丽、代施施、张静怡、

鞠东花、文妍、李青松、耿文鑫、李艳、程腊梅、王治、朱连明、张莉。

Ⅲ

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

生物技术分析方法生物制造过程中

基于风险考虑的微生物快速检测方法

选择与确认

1范围

本文件为生物制造过程中微生物快速检测方法选择和确认提供了指导、框架体系及基于风险考虑

的方法。

本文件提供了一个灵活的基于风险的框架，用于检测生物制造过程中的微生物污染。

本文件规定了细胞治疗产品生产相关的通用要求及风险，同时具备灵活性，能适应每种独特细胞

治疗产品在具体生产工艺上的差异。

本文件适用于细胞治疗产品生产中的无菌测试，也适用于其他细胞衍生治疗产品的生产。

本文件重点介绍用于过程中和最终产品测试的快速微生物测试方法（RMTM）。

本文件不适用细胞治疗产品生产中的病毒检测内容。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

ISO和IEC维护的用于标准化的术语数据库网址如下：

——ISO在线浏览平台：https：///obp

——IEC电子百科：https：///

3.1

验收标准acceptancecriteria

数值限制、范围或满足所述测定的预定义性能的其他属性或变量。

注：验收标准由用户要求规范（3.30）指定。

3.2

准确度accuracy

测量准确度

被测量的测得值与其真值间的一致性。

注1：“测量准确度”的概念不是一个数量，也没有给出一个数值。当测量误差较小时，测量被认为较准确。

注2：术语“测量准确度”不用于表示测量正确度，术语测量精密度也不用于表示“测量准确度”，然而，它与这两个概

念相关。

注3：“测量准确度”有时被理解为赋予被测量的测得值之间的一致程度。

[来源：ISO16140⁃1：2016，2.2]

1

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

3.3

分析灵敏度analyticalsensitivity

测量指示的变化与被测量值的相应变化的商。

注：分析灵敏度不用于表示检出限（3.8）或定量限，也不与诊断灵敏度（3.9）相混淆。

[来源：ISO18113⁃1：2022，3.2.4，有修改]

3.4

分析特异性analyticalspecificity

测量系统采用特定测量程序时，针对一个或多个被测物提供互不依赖且不受被测系统中其他量值

影响的测量结果的能力。

注1：缺乏分析特异性称为干扰分析。

注2：分析特异性不与诊断特异性（3.10）相混淆。

注3：ISO/IECGuide99：2007使用术语选择性来表示此概念，而不是特异性。

[来源：ISO18113⁃1：2022，3.2.5，有修改]

3.5

无菌aseptic

用于排除微生物污染的条件和程序。

[来源：ISO18362：2016，3.3，有修改]

3.6

细胞治疗产品cellulartherapeuticproduct

含有细胞作为活性物质的产品。

示例：细胞和基因治疗产品、组织工程产品、药品。

注1：用于基因治疗的细胞生产的产品包含在细胞治疗产品的定义中，因为细胞不一定是所有基因治疗的活性物质。

注2：重组蛋白不包括在细胞治疗产品的定义中。

[来源：ISO20399：2022，3.9，有修改]

3.7

设计鉴定designqualification；DQ

验证（3.32）流程所提议的检测设施、设备或系统规范满足用户要求规范（URS）（3.30）的期望。

[来源：ISO11139：2018，3.220.1，有修改]

3.8

检出限detectionlimit；limitofdetection

通过给定测量程序获得的测量量值，规定假阳性概率为α，假阴性概率为β。

注1：IUPAC建议α和β的默认值等于0.05。

注2：有时会使用缩写LOD。

注3：“检出限”不鼓励使用术语“灵敏度”。

[来源：ISO/IECGuide99：2007，4.18]

3.9

诊断灵敏度diagnosticsensitivity

体外诊断检查程序识别与特定疾病或病症相关的目标标志物存在的能力。

注1：也定义为已知存在目标标志物的样本中的阳性百分比。

注2：诊断灵敏度以百分比（分数乘以100）表示，计算方法为100×真阳性值（TP）数量除以真阳性值（TP）数量与假阴

性值（FN）数量之和，或100×TP/（TP+FN）。该计算基于一项研究设计，其中每个受试者仅抽取一个样本。

注3：对于微生物检测，诊断灵敏度代表被正确检测到的目标微生物的比例。

[来源：ISO18113⁃1：2022，3.2.17，有修改]

2

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

3.10

诊断特异性diagnosticspecificity

体外诊断检查程序识别不存在与特定疾病或病症相关的目标标志物的能力。

注1：也定义为已知不存在目标标志物的样本中的阴性百分比。

注2：诊断特异性以百分比（分数乘以100）表示，计算方法为100×真阴性值（TN）数量除以真阴性值（TN）数量与

假阳性值（FP）数字的总和，或100×TN/（TN+FP）。该计算基于一项研究设计，其中每个受试者仅抽取一

个样本。

[来源：ISO18113⁃1：2022，3.2.18，有修改]

3.11

假阴性falsenegative

检测方法显示结果为阴性（3.15），但随后被证明含有目标微生物。

[来源：ISO13843：2017，3.14，有修改］

3.12

假阳性falsepositive

检测方法显示结果为阳性（3.19），但随后被证明不含目标微生物。

[来源：ISO13843：2017，3.15，有修改］

3.13

满足要求fitforpurpose

符合预期用途的要求。

[来源：ISO20387：2018，3.24，有修改］

3.14

安装鉴定installationqualification；IQ

通过客观证据确定化验仪器安装的工艺设备和辅助系统的所有关键方面均符合已批准的用户要

求规范（URS）（3.30）的过程。

[来源：ISO11139：2018，3.220.2，有修改］

3.15

阴性negative

根据方法程序的规定，表示在特定测试部分中不存在被分析物的测试结果。

[来源：ISO16140⁃1：2016，2.43，有修改］

3.16

核酸扩增技术nucleicacidamplificationtechniques；NAT

从一个原始模板体外合成多份DNA或RNA的生物化学和分子生物学方法。

注1：NAT的特点是存在反转录、扩增方法和测定类型（定性或定量）。

注2：扩增方法的例子有聚合酶链式反应（PCR）和等温扩增[核酸扩增反应（NEAR）、转录介导的扩增（TMA）、环

介导等温扩增（LAMP）、依赖解旋酶的扩增（HAD）、成簇的规律间隔的短回文重复序列（CRISPR）、链置换扩

增（SDA）]。

3.17

运行鉴定operationalqualification；OQ

获取并记录证据，以证明已安装的设备在按照其操作程序使用时，能在预定限度内运行的过程。

[来源：ISO11139：2018，3.220.3]

3.18

性能鉴定performancequalification；PQ

通过客观证据确认，在预期条件下，该检测过程能持续产生符合所有预定用户要求规范（URS）

3

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

（3.30）结果的过程。

[来源：ISO11139：2018，3.220.4，有修改］

3.19

阳性positive

根据方法程序的规定，表示在特定测试部分中存在被分析物的测试结果。

注：当参照方法或替代方法提供的初步阳性检测结果需要进一步检测来确认时，该检测结果被视为推定阳性检测

结果。如果该方法的程序所规定的进一步检测证实检测结果确实呈阳性，则该检测结果被视为确证阳性检测

结果。

[来源：ISO16140⁃1：2016，2.50，有修改］

3.20

精密度precision

在特定条件下，对相同或相似的物体进行重复测量所获得的指示值或测量值之间的一致程度。

注1：测量精密度通常用数字表示，如标准偏差、方差或特定测量条件下的变异系数。

注2：例如，“特定条件”是重复性测量条件、中间精度测量条件或再现性测量条件（见ISO5725⁃1）。

[来源：ISO/IECGuide99：2007，2.15，有修改]

3.21

鉴定qualification

为证明设施、设备和方法适合其预期用途并能正常运行而开展的活动。

注：设备或工艺或两者的鉴定一般包括安装鉴定（3.14）、运行鉴定（3.17）和性能鉴定（3.18）。

[来源：ISO11139：2018，3.18，有修改］

3.22

微生物快速检测方法rapidmicrobialtestmethod；RMTM

与使用直接接种和培养板的传统目视观察法相比，能使用户更快获得微生物检测结果的分析方法。

注：一般是指与传统方法相比时间大大缩短（如几小时或几天）。

3.23

标准物质referencematerial

标准样品

参考物质

参照规定的特性，具有足够的均匀性和稳定性，经确定适合用于测量或检查标称特性的材料。

[来源：ISO/IECGuide99：2007，5.13，有修改］

3.24

风险评估riskassessment

风险识别、风险分析和风险评价的全过程。

3.25

风险控制riskcontrol

通过制定决策和实施措施将风险降低或维持在规定水平的过程。

[来源：ISO14971：2019，3.21]

3.26

基于风险的方法risk⁃basedapproach

根据先前的数据分析并按照生物安全等级确定活动优先次序的方法。

3.27

鲁棒性robustness

衡量一种测试方法不受方法参数微小变化影响的能力，并显示其在正常使用过程中的可靠性。

4

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

[来源：ICHQ2（R1）]

3.28

保质期shelflife

产品生产后，在规定条件下存放时仍能保持其特定性能的一段时间。

[来源：ISO1382：2020，3.485，有修改］

3.29

无菌（状态）sterility

无存在活的微生物的状态。

注：在实践中，无法证明不含微生物的绝对声明。

[来源：ISO11139：2018，3.274］

3.30

用户要求规范userrequirementspecifications；URS

用户的特定要求或通用要求未涵盖的要求。

3.31

确认validation

通过提供客观证据，认定已满足特定预期用途或应用的要求。

[来源：ISO9000：2015，3.8.13，有修改]

3.32

验证verification

通过提供客观证据，确认特定要求已得到满足。

[来源：ISO9000：2015，3.8.12，有修改］

3.33

活的微生物viablemicroorganism

样品中至少有一个属性是活的（如新陈代谢活跃、能够繁殖、拥有完整的细胞膜，并有能力恢复这

些功能）微生物。

4一般性考量

在患者给药之前，宜对细胞治疗产品进行微生物污染测试。许多此类产品依赖活细胞的活性来产

生治疗效果。活细胞不能最终灭菌，需依靠无菌技术和封闭系统制造的结合来确保最终产品的无菌。

选择快速微生物检测方法（RMTM）时，宜考虑以下因素：

a）样品的保质期；

b）可用于测试的样品体积；

c）待测样品数量；

d）采集样品的步骤；

e）得出结果的时间；

f）待检测的微生物；

g）如何区分活的微生物和非活的微生物；

h）区分样品中已鉴定微生物的能力。

此外，还需考虑测试所需资源的可获得性，如经过培训的人员和所需的仪器。

注1：取样可能会将微生物污染引入制造过程。

注2：能用于测试的材料数量可能有限，特别是对于自体细胞治疗产品。在某些情况下，能生产平行细胞治疗产品

来评估微生物污染。

5

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

注3：测试方法的实施与分析需要特定的培训和经验。

宜考虑添加细胞上清液（如培养液、洗涤液、冷冻原液）替代细胞悬液进行无菌检测，以解决细胞产

品因样品量小而不能取样检测的问题。

5微生物污染风险管理

5.1生产过程中的风险管理

宜采用基于风险的方法来确定细胞治疗产品生产过程中微生物污染的检测方法。这种方法宜考

虑到细胞起始材料的来源和收集方法。

细胞治疗产品微生物污染的潜在来源包括但不限于细胞起始材料、原材料和耗材以及生产环境。

血液制品是细胞起始材料最常见的来源。微生物污染的来源可能与皮肤消毒不彻底、用于收集和

储存血液制品的工具包及包装袋出现无菌故障、技术人员或操作人员操作失误相关。捐献者菌血症也

可能成为细胞疗法产品的污染源。

ISO20399提供了试剂、辅助（原材料）材料中的微生物污染和传染性病毒以及对辅助材料的建议。

消耗品宜预先灭菌并一次性使用，以降低微生物污染的风险。

细胞加工/制造宜在封闭系统或适当的洁净室（如ISO6级~ISO7级）中进行，以防止微生物污染。

注：开放式或台式工艺会增加空气和可能未经充分清洁或消毒的表面污染的风险。

附录A描述了微生物快速检测方法（RMTM）风险评估中需要考虑的一般因素。在需要进行风险

评估的细胞治疗产品生产中使用RMTM的一些关键决策中需要考虑的详细要点在附录B、附录C、附

录D和附录E中找到。

环境控制最大限度地减少微生物污染的风险。环境控制的示例包括：

——消毒程序；

——高效颗粒空气过滤和气流；

——更衣程序；

——无菌技术；

——洁净室程序和等级（见ISO14644⁃1）。

制定风险控制时要考虑的要点包括但不限于以下方面。

a）输入材料：

1）收集过程和捐献者选择（见附录B）；

2）自体或同种异体，新鲜或冷冻；

3）条件。

b）符合ISO20399的辅助材料和耗材（预灭菌、一次性使用等）。

c）环境因素。

d）设备。

e）工艺步骤：

1）封闭式或开放式工艺步骤；

2）细胞库；

3）培养或扩增；

4）纯化；

5）最终产品。

f）控制策略（见附录C）。

g）监测（见附录C）。

6

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

h）储存、包装和管理（见附录D）。

i）过程中和最终放行测试（见附录E）。

5.2微生物检测的风险管理

在细胞治疗产品生产过程中使用风险评估方法进行微生物快速检测，限制微生物快速检测系统确

认的风险。基于风险的方法能用于为预期用途建立最合适的快速微生物检测机制，这通常以确定用户

要求规范（URS）为基础。

注：以下文件讨论了风险评估，并就如何在生产过程中实施风险评估提供了一般指导：

——ISO31000；

——ISO13022。

6选择合适的检测方法

6.1通则

明确用户要求规范，理解检测方法预期用途，能指导设计具有生物学相关性且具备足够性能（如分

析灵敏度、分析特异性、精密度、准确度、鲁棒性）的检测方法，从而为后续决策（是否符合预期用途或适

用性）提供支持。

为了确定或开发适当的检测方法来检测细胞治疗产品中的微生物污染，宜建立并记录测试目标。

例如，测试与定量。如果需要进行测试来检测和识别“每种”细菌或真菌污染物，则宜使用测序方法。

如果仅需对某些参考微生物或有限数量的药典微生物进行分类或数量测定，则多重聚合酶链式反应

（PCR）或类似的靶向方法是最合适的。

适当的测试设计应包含检测方法的规格和确保测量质量与结果再现性的策略。包括重复测量、使

用样本随机化以减少偏差，以及纳入适当的测量控制。

适当的测试设计还应包含确保适当的分析灵敏度以及确定和记录检出限的方法。还宜确定并记

录测量不确定度。

该测定应对测量目标具有较高的特异性，而免受细胞制剂中其他成分的显著干扰。

测定的预期用途宜指导测量的适用要求，宜考虑测量的不确定度。

为了确定适当的检测方法，用户应评估测试所需微生物的数量和种类问题。应确定识别所需的范

围。应评估是否需要确定活微生物细胞和非活微生物细胞。

测试宜足够稳定，以便结果不会受到用户为预期目的定义的测量过程中的微小变化（如温度波动、

微小的样品处理波动）的显著影响。

该测定对于测量目标宜足够稳定，以便结果不会受到细胞制剂其他成分（如血清浓度、保存剂的存

在）的微小变化的显著影响。当使用非药典方法时，替代方法宜产生与药典方法相同或更好的结果。

6.2测定选择

选择方法时要考虑的要点包括但不限于以下要求：

a）基于合理的基本科学原理；

b）能检测出所有需要检测的微生物；

c）能按照所需的分类水平识别所有此类微生物；

d）如有必要，能重复地定量此类已鉴定的微生物；

e）能检测出目标浓度范围内的分析物；

f）对于预期用途具有足够的分析特异性和分析灵敏度；

7

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

g）能满足特定的方法性能标准；

h）具有充分的质量保证（QA）和质量控制（QC）；

i）能使用现成的设备进行；

j）使用适当的资源；

k）具有足够的鲁棒性；

l）解决所需的专业知识水平（如技术敏感领域，需要专门培训）；

m）包含保证质量的必要方面（如校准设备、培养基质量、培养条件、扩增子质量、序列数据质量）；

n）解决生物安全问题（如处理测试病原体的特定生物安全实践的必要性）；

o）满足预期用途的特定要求（如对于含有来自无法通过生产过程灭菌的起始材料中的细菌的材

料的适当测试参数）；

p）考虑患者群体内的临床状况和自然细胞变异；

q）是通用微生物检测方法或特定微生物检测方法；

r）适合检测细菌、真菌和支原体；

s）能区分活微生物和非活微生物。

6.3试剂盒或系统选择

能参考执行测试或进行确认的实验室或试剂盒或系统的供应商。在放行测试中，宜对试剂盒或系

统供应商进行适当的质量评估，并遵循测试试剂盒制造商的指南或ISO13485（如果适用）。试剂盒或

系统宜附有适用的确认文件和服务。

如果制造商使用RMTM的外部试剂盒或系统供应商，则在选择试剂盒或系统供应商时宜考虑以

下几点：

a）所需的试剂盒或系统供应商的QA认证；

b）试剂盒或系统供应商采用的QA标准（如ISO9001）；

c）审核历史和计划（即监管机构、制药公司或认证机构的审核）；

d）试剂盒或系统供应商的经济可行性；

e）测试方法可信度的参考文献（即当前用户列表、科学出版物或认证）；

f）试剂盒或系统供应商提供的技术支持服务；

g）试剂盒或系统供应商提供的文件（即评估和确认文件）。

6.4各种测试类型的注意事项

微生物测试是基于风险的，因此用户能根据其预期用途选择最优技术，并平衡各种相互竞争的

URS，包括获得结果的时间、特异性、检出限、样本量和产品属性。

微生物污染检测选项的推荐方法包括：

a）完成批次后，记录包括无菌操作的步骤（如手动补充细胞培养基），宜取样以筛查微生物污染

（即过程中测试）情况；

b）宜在最后步骤之前取样，取样时间反映所采用的筛选方法，如放行前48h~72h进行基于生

长的污染检查，或更短时间进行更快速的微生物测试（即替代成品测试）；

c）最终产品能接受药典方法或基于生长的微生物测试，并在测试完成之前放行，如果测试结果

呈阳性，则通知负责治疗患者的临床医生（即传统的成品测试）；

d）最终产品宜使用快速微生物测试进行微生物污染测试，并在成功完成测试后放行（即实时成

品测试）。

表1给出了结合测试方法选项，对这些不同的放行测试策略进行说明。

8

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

有关各种RMTM类型规范的更多信息和指南，见附录H。

表1放行测试策略和检测选项

技术测试依据测试选项可行与否

革兰氏染色法细菌细胞的差异染色法最终产品测试否

在大豆酪蛋白消化液和硫代乙

USP〈71〉无菌测试最终产品测试是

酸盐培养基中生长

过程监控、定期放行前测试、最

微生物呼吸监测技术专有有氧呼吸产生CO是

2终产品测试

核酸法核酸扩增最终产品的快速放行测试否

流式细胞术活体染色最终产品的快速放行测试是

固相细胞数术活体染色最终产品的快速放行测试是

大豆酪蛋白消化液和硫代乙酸过程监控、定期放行前测试、最

三磷酸腺苷（ATP）生物发光是

盐培养基中会产生ATP终产品测试

6.5用户要求规范

6.5.1通则

宜确定与RMTM相关的URS。URS取决于第4章中考虑的因素。附录B~附录G提供了有关

需要考虑的因素的信息。

6.5.2检测时间

在对患者给药之前，应对细胞治疗产品进行适当的微生物污染测试。所选方法宜在适当的时间范

围内提供结果，通常与细胞治疗产品的保质期相关。这样可进行充分的测试审查，而不会延迟细胞治

疗产品的放行。

在3d~4d或更短时间内获得结果的微生物测试优于7d~14d获得结果的测试。

注1：对于非冷冻细胞产品，无菌测试通常会在1d内得出结果。

注2：对于冷冻细胞产品，能接受的确认方法可能需要7d~14d。

注3：对于典型的冷冻复苏细胞产品，首选测试时间为1h以内。

注4：对于产品罐装之前的细胞培养过程，首选测试时间为1d内。

6.5.3样品体积

样本按每项检测分别制备，取样频率要求基于污染的可能性。可用于微生物测试的样品量根据生

产批量大小/体积和每个产品单元的体积而变化。选择的测试方法宜考虑可用于测试的样品量。细胞

治疗产品通常为单批或小批量，因此只有少量可用于微生物测试。

6.5.4过程中与最终放行测试

对过程中样品和最终产品样品进行的测试可能会因所采用生产工艺的时长不同而有差异。由于

使用直接接种、膜过滤和培养平板的传统目视观察方法的周期时间长，微生物测试可能很难作为过程

控制进行。用于过程中测试和最终放行测试的URS可能有所不同。宜使用基于风险的方法来定义过

程中测试和最终产品测试的要求。过程中测试应作为任何变更控制程序的一部分进行（如培养基交换

或添加生长因子后）。

9

GB/T46526—2025/ISO24190：2023

6.5.5特异性

应明确区分表征与微生物存在或不存在相关的能力的分析特异性和与测量中物种鉴定相关的分

析特异性。

诊断特异性按公式（1）计算：

=(+)1

RTNNTNC/NTNCNTPI…………（）

式中：

RTN——真阴性率；

NTNC——实际为阴性且被正确检测为阴性的样本数；

NTPI——实际为阴性且被错误检测为阳性的样本数。

微生物学方法的诊断特异性传统上是通过使用阳性和阴性对照培养物来证明的。宜仔细选择适

当的靶标和非靶标对照培养物。

在开发任何新的微生物方法时，应定义适当的目标和非目标对照培养物或用于确认和常规