DB13/T 1420-2011 马铃薯晚疫病菌抗药性检测技术规程

ICS65.020.20

B05

DB13

河北省地方标准

DB13/T1420—2011

马铃薯晚疫病菌抗药性检测技术规程

Technologicalrulesfordetectingfungicideresistance

inPhytophthorainfestansonpotato

2011-07-07发布2011-07-17实施

河北省质量技术监督局发布

DB13/T1420—2011

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准河北省质量技术监督局提出并归口。

本标准起草单位：河北省农林科学院植物保护研究所。

本标准主要起草人：王文桥、张小风、马志强、韩秀英、孟润杰、赵建江。

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DB13/T1420—2011

马铃薯晚疫病菌抗药性检测技术规程

1范围

本标准规定了马铃薯晚疫病菌抗药性检测的术语和定义及检测方法。

本标准适用于马铃薯晚疫病菌对杀菌剂的抗性检测。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

2.1

抗药性fungicideresistance

一种杀菌剂当用其标签推荐的剂量防治作物病害时，即使重复试验也无法达到所期望的防治效果，

该靶标病菌群体的敏感性下降的遗传变化称为抗药性。

2.2

敏感基线sensitivitybaseline：

在同类作用方式的杀菌剂使用之前，靶标病菌群体中不同菌株对一种药剂的敏感性(EC50值)分布曲

线，常用平均值及95%置信限表示。

2.3

敏感型sensitivitytype：

根据菌株对药剂的敏感性(EC50值)或抗性水平，或在区分剂量下药剂对菌株的抑制程度，将菌株划

分成敏感、低抗、中抗、高抗等不同类型。

2.4

菌丝生长速率法

马铃薯晚疫病菌菌丝体在含药培养基平板上培养而生长受到抑制的毒力测定方法，适用于检测马铃

薯晚疫病菌对能显著抑制其菌丝生长的苯基酰胺类、QoI类、羧酸酰胺类、乙酰胺类、氨基甲酸酯类、

苯甲酰胺类等杀菌剂的抗药性。

2.5

叶盘漂浮法

马铃薯晚疫病菌孢子囊接触漂浮于药液上的叶盘背面而萌发受到抑制的毒力测定方法，适用于马

铃薯晚疫病菌对具有内吸性的苯基酰胺类、QoI类、羧酸酰胺类、乙酰胺类、氨基甲酸酯类、苯甲酰胺

类等杀菌剂的抗药性检测。

3测定方法

3.1菌丝生长速率法

适用于检测马铃薯晚疫病菌对能明显抑制其菌丝生长的甲霜灵、精甲霜灵、噁霜灵、嘧菌酯、吡唑

醚菌酯、烯酰吗啉、氟吗啉、双炔酰菌胺、霜脲氰、霜霉威、氟吡菌胺、氰霜唑、氟啶胺、代森锰锌、

百菌清及其混剂的抗性。

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DB13/T1420—2011

3.1.1供试菌株的采集、分离及保存

田间采集感染晚疫病的马铃薯新鲜叶片，夹入洗净蘸干的马铃薯块茎中，做好标记，带回实验室，

16~18℃培养2～3d。在无菌条件下，将块茎上霉状物用接种针挑至含100µg/mL氨苄青霉素、20µg/mL

利福平及100µg/mL五氯硝基苯的黑麦琼脂培养基(Ryeagar,RA)平板上，18~20℃培养4~5d，将未受

杂菌污染的菌丝转接到新的RA平板上，18~20℃培养7～10d后转至试管中RA斜面上，培养至菌丝长

满，在10℃条件下保存，每3个月转接1次。

3.1.2供试药剂的收集及保存

收集杀菌剂原药，保存于避光、低温（0-4℃）及干燥条件下。

3.1.3含药培养基的制作

称取适量的原药，用有机溶剂（如丙酮、二甲亚砜等）溶解，以无菌水稀释成母液（丙酮含量应低

于总体积的1%），再加入无菌水稀释成系列浓度的药液，按照药液与培养基体积比1:9分别加入溶化

的RA中，混匀，泼碟，配制成含不同浓度药剂的RA平板。对照仅加入适量DMSO或丙酮等溶剂。

3.1.4接种及培养

将菌株在RA平板上培养10d，从菌落边缘以直径0.5cm打孔器打菌饼，用接种针挑取菌饼接在

含药RA平板（直径9cm)中央，以不含药RA平板为对照，每皿接1个菌饼