GB/T 45106-2024 动物钩端螺旋体病诊断技术

ICS11220

CCSB.41

中华人民共和国国家标准

GB/T45106—2024

动物钩端螺旋体病诊断技术

Diagnostictechniqueofleptospirosisinanimals

2024-12-31发布2025-07-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T45106—2024

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

缩略语

4……………………1

临床诊断

5…………………1

流行病学

5.1……………1

临床症状

5.2……………2

实验室常规检查

5.3……………………2

剖检变化

5.4……………2

结果判定

5.5……………2

生物安全要求

6……………2

样品采集与保存

7…………………………3

样品采集

7.1……………3

样品保存

7.2……………3

分离培养鉴定

8……………3

器材

8.1…………………3

试剂

8.2…………………3

样品处理与培养

8.3……………………3

结果判定

8.4……………3

9PCR………………………4

器材

9.1…………………4

试剂

9.2…………………4

提取

9.3DNA…………………………4

引物

9.4…………………4

扩增体系

9.5……………4

扩增程序

9.6……………4

扩增产物电泳检测

9.7…………………5

实验成立条件

9.8………………………5

结果判定

9.9……………5

10MAT……………………5

器材

10.1…………………5

Ⅰ

GB/T45106—2024

试剂

10.2…………………5

定性试验

10.3……………5

定量试验

10.4……………6

结果判定

10.5MAT……………………7

综合判定

11…………………7

鉴别诊断

12…………………7

附录规范性试剂溶液的配制方法

A()…………………8

培养基

A.1EMJH………………………8

贮存液

A.250×TAE……………………8

琼脂糖凝胶

A.31%……………………9

缓冲液

A.4PBS…………………………9

附录资料性引物使用说明

B()…………10

附录资料性各血清群标准抗原及阳性血清的制备

C()………………11

各血清群标准抗原的制备

C.1…………11

各血清群标准阳性血清的制备

C.2……………………11

附录资料性结果判定示意图

D()MAT………………13

附录资料性钩体病的鉴别诊断

E()……………………16

犬细小病毒病

E.1………………………16

犬瘟热

E.2………………16

牛羊猪布鲁氏杆菌病

E.3………………16

参考文献

……………………17

Ⅱ

GB/T45106—2024

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出

。

本文件由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本文件起草单位吉林大学吉林省动物疫病预防控制中心公安部南昌警犬基地长春西诺生物科

:、、、

技有限公司上海基灵生物科技有限公司北京中科基因技术股份有限公司青岛立见生物科技有限公

、、、

司杜尔伯特蒙古族自治县畜牧技术服务中心深圳澳东检验检测科技有限公司

、、。

本文件主要起草人曹永国张文龙谢旭峰于钦磊徐黎刘占斌刘伟李杰张淼洁林雨孙学强

:、、、、、、、、、、、

黄显晔张利

、。

Ⅲ

GB/T45106—2024

引言

钩端螺旋体病简称钩体病是由致病性钩端螺旋体Leptospira简称钩体引起的

(Leptospirosis,)(,)

一种广泛传播的自然疫源性人畜共患传染病猪马牛羊犬猫等动物以及人被钩体感染后表现

。、、、、、,,

出黄疸流产肝肾衰竭甚至死亡等症状严重危害了畜牧业的发展和公共卫生安全我国规定钩体病

、、,,,

为三类动物传染病动物钩体病一年四季都有发生以夏秋季为流行高峰

。,、。

钩体病的前期症状不明显很容易跟其他疾病相混淆对钩体病的确诊需要实验室的检测钩体病

,,。

的实验室检测包括病原检测和抗体检测常见的病原检测方法有分离培养和聚合酶链式反应常

,(PCR),

见的检测钩体抗体的方法有酶联免疫吸附试验和显微凝集试验由于方法需

(ELISA)(MAT)。ELISA

要准备待检动物的酶标二抗而本文件涉及的动物种类众多因此本文件中病原检测采用了分离培养和

,,

方法抗体检测采用了方法取消了方法

PCR,MAT,ELISA。

本文件参考了世界动物卫生组织陆生动物诊断试验与疫苗手册给出的部分章节并在

(WOAH)《》,

三类动物疫病防治规范的指导下结合我国相关技术研究新成果制定在技术上与国际先进技术保持

《》,,

一致

。

Ⅳ

GB/T45106—2024

动物钩端螺旋体病诊断技术

1范围

本文件规定了动物钩体病的综合判定技术要求描述了临床诊断分离培养鉴定聚合酶链式反应

,、、

和显微凝集实验的操作方法

。

本文件适用于动物钩体病的临床诊断实验室检测流行病学调查以及检验检疫

、、。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

实验室生物安全通用要求

GB19489

兽医诊断样品采集保存与运输技术规范

NY/T541、

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

脱氧核糖核酸

DNA:(Deoxyribonucleicacid)

显微凝集试验

MAT:(Microscopicagglutinationtest)

磷酸盐缓冲溶液

PBS:(Phosphatebufferedsalinebuffer)

聚合酶链式反应

PCR:(Polymerasechainreaction)

5临床诊断

51流行病学

.

511易感动物

..

猪马牛羊犬猫等动物都可被感染

、、、、、。

512传染源

..

野生啮齿类动物和有袋动物是钩体病的主要传染源其他动物也可作为传染源如猪牛羊犬节

,,、、、、

肢动物和蛙类

。

513传播途径

..

一些野生鼠类感染钩体后并不表现临床症状但其肾脏中会定殖大量的钩体一段时间后这些钩

,,,,

1