DB15/T 1939-2020 文冠果组织培养育苗技术规程

ICS65.020.20

B05

DB15

内蒙古自治区地方标准

DB15/T1939—2020

文冠果组织培养育苗技术规程

TechnicalRegulationforTissueCultureofXanthocerassorbifolia

2020-07-30发布2020-08-30实施

内蒙古自治区市场监督管理局发布

DB15/T1939—2020

前言

本标准按照GB/T1.1-2020给出的规则起草。

本标准由内蒙古自治区林业和草原局提出并归口。

本标准起草单位：内蒙古自治区林业科学研究院。

本标准主要起草人：张文军、王美珍、黄卫丽、宁静。

I

DB15/T1939—2020

文冠果组织培养育苗技术规程

1范围

本标准规定了文冠果组织培养的术语和定义、环境及器具灭菌、培养基配制、外植体及其灭菌、初

代培养、增殖继代培养、壮苗培养、生根培养、组培瓶苗炼苗移栽和大田培育等基本内容及技术要求。

本标准适用于文冠果组织培养育苗。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

LY/T1882林木组织培养育苗技术规程

DB15/T1588元宝枫组织培养育苗技术规程

3术语和定义

LY/T1882和DB15/1588界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

嫩茎Tenderstem

由腋芽经过初代诱导萌发长出的幼嫩枝条。

3.2

壮苗Strongseedling

组培过程中，嫩茎经再培养后形成的生长健壮、叶片舒展、叶色正常的微弱木质化枝条。

4环境及器具消毒灭菌

4.1准备室消毒

每天用84消毒液等喷洒地面和实验台面，保持室内清洁。

4.2接种室消毒灭菌

接种前用紫外灯照射30min～40min，消毒期间及关闭紫外灯20min内，人员不得进入。

4.3培养室消毒

一个月左右进行1次，在使用前一天用二氧化氯消毒剂进行熏蒸，或用70%-75%酒精擦拭培养架。

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DB15/T1939—2020

4.4超净工作台灭菌

接种前应用紫外灯照射30min-40min，开启无菌风40min后，操作前用70%-75%酒精喷洒台面；

定期清洗超净工作台的过滤膜。

4.5器具灭菌

4.5.1接种工具灭菌

接种前，将接种工具用滤纸包好，置于高温高压灭菌锅灭菌；使用前用酒精灯外焰灼烧20s以上，

或用接种工具灭菌器直接灭菌。

4.5.2污染瓶（皿）灭菌、清洗

将污染瓶用高温高压蒸汽灭菌锅灭菌后，去除污染物，再用洗洁精稀释液浸泡后清洗干净，晾干。

4.6操作人员入室要求

进入接种室前，经风淋门进入缓冲室，穿戴经过消毒的工作服、帽子、口罩等。在操作前，用70%-75%

酒精擦拭手部、臂部。

5培养基配制

5.1基本培养基的选择

选择WPM和MS培养基为基本培养基。

5.2母液的配制和保存

5.2.1母液的配制

MS培养基由几种化合物的混合母液配制。微量元素母液配制1000倍，铁盐和有机元素母液配制100

倍，大量元素母液配制40倍，其中氯化钙和磷酸二氢钾单独配制成100倍母液，植物生长调节物质配制

浓度0.2mg/mL。MS培养基混合母液配制表参见附录A，植物生长调节物质的配制参见附录B。

5.2.2母液的保存

母液配制后，贴标签，置于4℃环境下保存，并在3个月内使用，母液应无结晶无异色。标签需标

明母液名称、倍数、配制时间和配制人等信息。

5.3基本培养基的配制

5.3.1准备

配制前准备好蒸馏水、蔗糖、琼脂和各类母液，同时准备好移液枪、容量瓶、量筒、量杯、天平、

药匙、磁力搅拌器和pH计等器具。

5.3.2琼脂融化

以配制1L培养基为例（下同）。加蒸馏水700mL左右，再加入5.8g琼脂，加热搅拌使琼脂融化。

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DB15/T1939—2020

5.3.3糖溶解

琼脂融化后，加入30g蔗糖，搅拌使糖溶解。

5.3.4加母液和激素

糖溶解后，加入母液，再根据不同培养基要求加入耐高温激素，充分搅拌。不耐高温的激素，如GA3、

IBA、IAA、ABA等应在培养基高温高压灭菌后加入，加入前需过滤灭菌。

5.3.5定容

搅拌均匀后，加蒸馏水定容至1L。

5.3.6pH值测定和调节

充分搅拌后，用pH计测定pH值，用1mol/L的HCl或1mol/L的NaOH调节至pH5.8～6.0。

5.3.7分装

使用培养瓶定量分装，瓶中培养基厚度保持在1.5cm～2.0cm。分装培养基时勿将培养基沾在培养

瓶瓶口。分装后标注培养基种类代