DB45/T 2034-2019 甘蔗茎尖脱毒组培苗繁育技术规程

ICS65.020.01

B3434B

DB45

广西壮族自治区地方标准

DBDB2034—201945/T

甘蔗茎尖脱毒组培苗繁育技术规程甘蔗茎尖脱毒组培苗繁育技术规程

Technicalspecificationforsugarcanevirus-freetissuecultureseedlingfromshoottiptipshootfromseedlingculturetissuevirus-freesugarcaneforspecificationTechnical

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2019-12-05发布2019-12-30实施

广西壮族自治区市场监督管理局发布

DB45/T2034—20192034—2019DB45/T

前前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。1.1—2009给出的规则起草。本标准按照GB/T

本标准由广西壮族自治区糖业办公室提出并监督实施。

本标准由广西糖业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：广西壮族自治区农业科学院甘蔗研究所。

本标准主要起草人：刘丽敏、刘红坚、李松、何为中、刘俊仙、翁梦苓、卢曼曼、何毅波、张伟珍。

I

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甘蔗茎尖脱毒组培苗繁育技术规程甘蔗茎尖脱毒组培苗繁育技术规程

11范围

本标准规定了甘蔗茎尖脱毒组培苗繁育技术的术语和定义、缩略语、实验室仪器设备试剂、培养基

的配方及配置、茎尖培养、脱毒检验、继代增殖培养、生根培养、假植、假植苗质量要求及检验方法和

假植苗包装、销售与运输。

本标准适用于广西境内甘蔗茎尖脱毒组培苗的繁育技术。

22规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求实验室生物安全通用要求19489GB

GB/T22278良好实验室规范原则良好实验室规范原则22278GB/T

GB/T36829甘蔗宿根矮化病菌实时荧光PCR检测方法实时荧光PCR检测方法甘蔗宿根矮化病菌36829GB/T

NY/T1796甘蔗种苗1796NY/T

NY/T1804甘蔗花叶病毒检测技术规范1804NY/T

33术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.13.1

甘蔗茎尖脱毒shootapexvirus-freevirus-freeapexshoot甘蔗茎尖脱毒

利用甘蔗茎尖顶端分生组织及其周缘部分培养组培苗，而使其脱除花叶病、宿根矮化病等病原菌的

方法。

3.23.2

外植体explantexplant外植体

从甘蔗腋芽苗中切取下来进行培养获得无菌苗的茎尖分生组织称为外植体。

44缩略语

MS：MS培养基（Murashige&Skoog(1962)）Skoog(1962)）&MS：MS培养基（Murashige

PVP：聚乙烯吡咯烷酮（PolyvinylpyrroliPVP：聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinyldone）

ScMV：甘蔗花叶病(Sugarcanemosaicdisease)

SrMV：高梁u花叶病(Sorghmmosaicvirus)

RSRaD：甘蔗宿根矮化病(tsoontuntingdisease)

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55实验室、仪器设备、试剂

5.15.1实验室

应符合22278规定。19489和GB/TGB

5.25.2仪器设备

主要的仪器设备如下:压力蒸汽灭菌器、恒温水浴锅、空调、超净工作台、体视显微镜（双筒解剖

镜）、接种针、接种刀、长柄枪型镊子、封口机等。

5.35.3试剂

甘蔗茎尖脱毒组培苗繁育常用化学试剂见附录A。

66培养基的配方及配制

6.16.1配方

使用的培养基配方如下：

a)诱导分化培养基：MS＋6-BA1.0mg/L＋NAA0.1mg/L＋核黄素15mg/L～30mg/L＋蔗糖3％；

b)继代增殖培养基：MS＋6-BA0.5mg/L～1.5mg/L＋NAA0.05mg/L～0.10mg/L＋蔗糖3％；

c)生根培养基：MS＋NAA5mg/L～10mg/L＋蔗糖3％～7％。

6.26.2配制

6.2.16.2.1诱导分化培养基的配置

培养基的各个成分按6.1中a)的配方量取后，加水定容，用1mol/LNaOH或HCl将培养基的pH值调节

在5.8～6.0，折长宽各4cm的四层滤纸放入培养瓶内，将培养基按每瓶10mL的量