DB37/T 3317-2018 鸡白血病多重PCR和斑点杂交检测方法

ICS65.020.30

B45

DB37

山东省地方标准

DB37/T3317—2018

鸡白血病多重PCR和斑点杂交检测方法

Laboratorydetectiontechnologiesofmulti-PCRanddothybridationfordiagnosisof

Avianleukosis(AL)

2018-06-12发布2018-07-12实施

山东省质量技术监督局发布

DB37/T3317—2018

前言

本标准按照GB/T1.1给出的规则起草。

本标准由山东省畜牧兽医局提出。

本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。

本标准主要起草单位：山东农业大学。

本标准主要起草人：成子强。

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DB37/T3317—2018

鸡白血病多重PCR和斑点杂交检测方法

1范围

本标准规定了我省针对禽白血病的诊断检测技术的方法。

本标准适用于企、事业单位禽病诊断实验ALV-A/B和ALV-J的检测,判断鸡群是否患A/B、J亚群白血

病。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T26436禽白血病诊断技术

NY/T680禽白血病病毒p27抗原酶联免疫吸附试验

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1

禽白血病AvianLeukosis，AL

反转录病毒科甲型反转录病毒属禽反转录病毒引起的以禽类造血组织中某些细胞成分过度增生为

主的可传染的肿瘤性疾病，临床症状主要表现为嗜睡、食欲不振、鸡体消瘦、鸡冠和肉髯呈淡紫色，腹

部显著增大，胸骨异常隆起。根据病毒囊膜蛋白的抗原性差异、病毒干扰实验、宿主范围等生物学特性，

将禽白血病肉瘤病毒群分成A-J共10个亚群，其中A、B、C、D、E和J亚群的宿主是鸡，流行于我国禽群

的主要是A、B和J亚群。ALV-J的危害最为严重，目前在鸡群中平均感染率为10%左右，呈现间歇性爆发；

ALV-A/B零星爆发，平均感染率在1%左右。J亚群主要诱发髓细胞性白血病，而A/B亚群主要造成淋巴细

胞性白血病和肉瘤。禽白血病自发现以来，发病率不断呈上升趋势，在世界各地均有发生，呈世界性分

布，是危害养禽业的主要疾病之一。

3.2

多重PCR技术Multiplepolymerasechainreaction，M-PCR

在普通PCR的基础上加以改进,于一个PCR反应体系中加入多对特异性引物，针对多个DNA模板或同一

模板的不同区域扩增多个目的片段的PCR技术。

3.3

斑点分子杂交技术dotblotting

是直接从待检鸡只的组织或血液样品提取DNA,将变性的DNA样品点样于硝酸纤维素膜或尼龙膜上，

然后与制备的特异性探针进行杂交来检测样品中的前病毒DNA。

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DB37/T3317—2018

4试剂或材料

除另有规定外，所有化学试剂均为分析纯。

4.1常规使用的商品化的DNA提取试剂盒。

4.2常规使用的商品化的