DB37/T 2385-2013 猪流感诊断技术

ICS65.020.30

B41

DB37

山东省地方标准

DB37/T2385—2013

猪流感诊断技术

DiagnosistechnologyofSwineInfluenza

2013-09-22发布2013-10-30实施

山东省质量技术监督局发布

DB37/T2385—2013

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由山东省动物疫病预防与控制中心负责起草，中国农业大学、中国科学院微生物研究所参加

起草。

本标准主要起草人：刘金华、陈静、毕玉海、田夫林、张进林、王贵升、马慧玲、孙圣福、孔祥华、

于青海、王士荣、李云岗、兰邹然、李玉杰、蔺晓月、徐鸿、徐聪。

I

DB37/T2385—2013

猪流感诊断技术

1范围

本标准规定了猪流感病毒分离与鉴定技术、血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验、酶联免疫吸附试验

等的技术要求

本标准所规定的猪流感病毒分离与鉴定技术适用于H1亚型猪流感病毒、H3亚型猪流感病毒的病原分

离和鉴定；血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验适用于猪流感病毒的血凝素亚型鉴定；酶联免疫吸附试验

适用于H1亚型猪流感病毒、H3亚型猪流感病毒亚型特异性检验。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T18635－2002动物防疫基本术语

GB/T18936－2003高致病性禽流感诊断技术

GB19442－2004高致病性禽流感防治技术规范

《人感染猪流感预防控制技术指南》（2009版试行）

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

鼻拭子noseswab

用采样棉签，采集人或动物鼻腔内液体作为检测用的样品。

3.2

喉拭子throatswab

用采样棉签，采集人或动物喉头内液体作为检测用的样品。

3.3

红细胞凝集试验Hemagglutinationassay，HA

利用流感病毒血凝素蛋白（HA）与红细胞表面相应受体特异性结合而出现凝集现象，用于检测病毒

血凝素、评价病毒活性的方法。

3.4

红细胞凝集抑制试验Hemagglutination-inhibitionassay,HI

1

DB37/T2385—2013

根据流感病毒血凝素蛋白（HA）可分为17个HA血清型，不同HA亚型病毒之间的抗原差异性显著。利

用流感病毒血凝素（HA）具有凝集红细胞的特点，加入型特异性抗体后，使原有的血凝反应被抑制的方

法，常利用此方法检测流感病毒的HA亚型、检测流感病毒的抗原特性等。

3.5

保存液Storagemedium

用于保存样品而配制的特殊溶液。

3.6

运输液transportmedium

用于运输采集样品而配制的特殊溶液。

4临床诊断技术

4.1流行病学特点

4.1.1各个年龄、性别和品种的猪对本病毒都有易感性。

4.1.2传染源主要为病猪和带毒猪，患病痊愈后猪可带毒6～8周。

4.1.3病毒的群间传播主要是以感染猪的咳嗽和喷嚏为媒介，经呼吸道感染。

4.1.4本病的流行有明显的季节性，天气多变的秋末、早春和寒冷的冬季易发生。

4.1.5本病传播迅速，常呈地方性流行或大流行。

4.1.6本病发病率高，死亡率低（4%～10%）。

4.2临床症状

4.2.1本病的发病率高，潜伏期为2～7天，病程1周左右；

4.2.2发病初期病猪体温突然升高至40.3℃～41.5℃，厌食或食欲废绝，极度虚弱乃至虚脱，常卧

地；

4.2.3从眼和鼻流出粘液，鼻分泌物有时带血；

4.2.4病猪挤卧在一起，难以移动，触摸肌肉僵硬、疼痛，出现膈肌痉挛，呼吸顿挫；

4.2.5母猪在怀孕期感染，产下的仔猪在产后2～5天发病很重，有些在哺乳期及断奶前后死亡。

4.3病理变化

4.3.1喉、气管及支气管充满含有气泡的黏液，黏膜充血，肿胀，时而混有血液，肺间质增宽；

4.3.2淋巴结肿大、充血；

4.3.3脾肿大；

4.3.4胃肠黏膜有卡他出血性炎症；

4.3.5胸腹腔、心包腔蓄积含纤维素物质的液体。

5病毒分离和鉴定技术

5.1材料准备

5.1.1样品的采集与保存

2

DB37/T2385—2013

5.1.1.1健康猪只样品

5.1.1.1.1健康猪只采集鼻拭子和/或喉拭子。健康存活猪只的喉试纸一般不容易采集，但被屠宰后的

健康猪只的喉试纸比较方便采集，采集时将棉试子深入喉头慢慢旋转涂取喉头内部的液体性样本；采集

鼻拭子时，将干棉拭子插入鼻孔至上腭并停留片刻，在鼻孔内慢慢旋转后拔出。用同一根棉拭子采两侧

鼻孔的样品，将棉拭子的样品端放入1mL的运输液中，4℃运输。若不能在2d内将样品进行病毒分

离，则应放在－80℃下保存。样品在保存过程中，应避免反复冻融。

5.1.1.1.2保存液和运输液应符合《人感染猪流感预防控制技术指南》和GB19442－2004的规定。

5.1.1.2发病或死亡猪只样品

发病和病死猪鼻、喉拭子采集与保存方法依据5.1.1.1进行；病死猪还需要采集气管、肺脏等脏器。

近期不进行病毒分