DB21/T 3061-2018 饲用微生物制剂中粪肠球菌的检测方法

ICS65.120

B46

DB21

辽宁省地方标准

DB21/T3061—2018

饲用微生物制剂中粪肠球菌的检测方法

MethodfordetectionofEnterococcusfaecalisinfeedingmicrobialpreparations

2018-10-30发布2018-11-30实施

辽宁省市场监督管理局发布

DB21/T3061—2018

前言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。

本标准由辽宁省畜牧兽医局提出并归口。

本标准起草单位：辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心。

本标准主要起草人：李欣南、武凤娇、韩镌竹、高铎、田晓玲。

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DB21/T3061—2018

饲用微生物制剂中粪肠球菌的检测方法

1范围

本标准规定了饲用微生物制剂中粪肠球菌的检验方法。

本标准适用于含有益微生物粪肠球菌的各种饲料添加剂中粪肠球菌的检测和计数。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定

GB/T14699.1饲料采样

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T20195动物饲料试样的制备

3稀释液、培养基及试剂

实验用水的电导率在25℃时不应超过25μS/cm(相当于电阻率≥0.4ΜΩcm)，除非另有规定要求。水的

微生物污染不超过103CFU/mL。应按GB4789.2执行，采用平板计数琼脂培养基，在36℃±1℃培养48h±2

h进行定期检查微生物污染。

3.10.85%灭菌生理盐水。

3.2粪肠球菌琼脂培养基：见附录A中A.1。

3.3哥伦比亚血琼脂培养基：见附录A中A.2。

3.4革兰氏染色液：见附录A中A.3。

3.5革兰氏阳性菌鉴定卡或生化鉴定试剂。

3.6PCR鉴定试剂盒。

4标准菌株粪肠球菌ATCC29212。

5设备和玻璃器皿

5.1恒温培养箱：精度36℃±1℃。

5.2高压灭菌锅：使用温度为121℃。

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DB21/T3061—2018

5.3微生物鉴定仪。

5.4涡旋仪：0r～2500r/min。

5.5麦氏比浊仪：量程0MCF～5MCF。

5.6显微镜：放大倍数400以上。

5.7无菌采样袋/瓶。

5.8天平：0.00g～410.00g。

5.9冰箱：2℃～8℃。

5.10离心管：装量为50mL。

5.11玻璃或塑料平皿：直径为90mm。

5.12L形玻璃或塑料涂布棒。

5.13吸管或移液器：容量为0.1mL、1mL、10mL。

5.14广口瓶或三角瓶：容量为500mL。

6采样

实验室样品具有真实性和代表性。采样人应佩带无菌手套和口罩。采样工具，如铲