GB/T 21674-2025 猪圆环病毒病诊断技术

ICS11220

CCSB.41

中华人民共和国国家标准

GB/T21674—2025

代替GB/T21674—2008GB/T34745—2017GB/T35901—2018GB/T35910—2018

,,,

猪圆环病毒病诊断技术

Diagnostictechniquesforporcinecircovirusdisease

2025-08-29发布2026-03-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T21674—2025

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

缩略语

4……………………1

临床诊断

5…………………2

样品采集保存与运输

6、……………………3

病毒分离与鉴定

7…………………………3

聚合酶链式反应

8(PCR)…………………5

实时荧光聚合酶链式反应

9(Real-timePCR)……………7

间接酶联免疫吸附试验间接

10(ELISA)………………9

阻断酶联免疫吸附试验阻断

11(ELISA)………………10

免疫组织化学试验

12(IHC)……………11

综合判定

13………………12

附录规范性样品保存病毒分离与鉴定相关溶液的配制

A()、………13

附录规范性相关溶液的配制

B()PCR、Real-timePCR………………14

附录资料性引物探针信息扩增片段序列及检测结果参照图

C()PCR、Real-timePCR、…………15

附录规范性相关试剂的制备

D()ELISA……………17

附录资料性相关抗原与血清的制备

E()ELISA……………………18

附录规范性相关溶液的配制

F()IHC…………………22

Ⅰ

GB/T21674—2025

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件代替猪圆环病毒聚合酶链反应试验方法猪圆环

GB/T21674—2008《》、GB/T34745—2017《

病毒型病毒实时荧光定量检测方法猪圆环病毒型荧

2SYBRGreenⅠPCR》、GB/T35901—2018《2

光检测方法和猪圆环病毒型阻断抗体检测方法本文件以

PCR》GB/T35910—2018《2ELISA》。

为主整合了的内

GB/T21674—2008,GB/T34745—2017、GB/T35901—2018、GB/T35910—2018

容与相比除结构调整和编辑性改动外主要技术变化如下

,GB/T21674—2008,,:

更改了范围见第章年版的第章

———(1,20081);

删除了实验室生物安全要求见年版的第章

———(20082);

增加了缩略语见第章

———(4);

增加了临床诊断见第章

———(5);

更改了样品采集保存与运输见第章年版的

———、(6,20084.1);

增加了病毒分离与鉴定见第章

———(7);

更改了聚合酶链式反应见第章年版的第章第章第章

———(PCR)(8,20083、4、5);

增加了实时荧光聚合酶链式反应见第章

———(Real-timePCR)(9);

增加了间接酶联免疫吸附试验间接见第章

———(ELISA)(10);

增加了阻断酶联免疫吸附试验阻断见第章

———(ELISA)(11);

增加了免疫组织化学试验见第章

———(IHC)(12);

增加了综合判定见第章

———(13);

增加了样品保存病毒分离与鉴定相关溶液的配制见附录

———、(A);

更改了相关溶液的配制见附录年版的附录

———PCR、Real-timePCR(B,2008A);

增加了相关试剂的制备见附录

———ELISA(D);

增加了相关溶液的配制见附录

———IHC(F)。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出

。

本文件由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本文件起草单位中国动物卫生与流行病学中心河南农业大学中华人民共和国上海海关南京农

:、、、

业大学湖南农业大学湖南冠牧生物科技有限公司娄底市动物疫病预防控制中心上海市动物疫病预

、、、、

防控制中心河北农业大学湖南派智生物科技有限公司

、、。

本文件主要起草人董雅琴魏战勇张强白娟崔进魏荣王乃东赵和平王先炜房琳琳杨毅

:、、、、、、、、、、、

马世杰李健姜平杨忠苹谭庆辉杨德全张颜郑兰兰袁万哲周文锋谢昊飞

、、、、、、、、、、。

本文件所代替文件的历次版本发布情况为

:

年首次发布

———GB/T21674—2008,2008;

年首次发布

———GB/T34745—2017,2017;

年首次发布

———GB/T35901—2018,2018;

年首次发布

———GB/T35910—2018,2018。

Ⅲ

GB/T21674—2025

引言

猪圆环病毒病又称为猪圆环病毒相关疾病

(Porcinecircovirusdisease,PCVD),(Porcine

是由猪圆环病毒型感染猪

circovirus-associateddisease,PCVAD),2(Porcinecircovirustype2,PCV2)

引起的一系列疾病的总称有不同的临床表现包括猪圆环病毒型系统性疾病

。PCVD,2(PCV2sys-

猪圆环病毒型繁殖性疾病猪皮炎

temicdisease,PCV2-SD)、2(PCV2reproductivedisease,PCV2-RD)、

与肾病综合征及亚临床感染过去称为断奶后

(Porcinedermatitisandnephropathysyndrome,PDNS)。

多系统衰竭综合征的疾病以及引起的

(Postweaningmultisystemicwastingsyndrome,PMWS)PCV2

呼吸道和肠道相关疾病已被证明是的一部分属于圆环病毒科圆环病

PCV2-SD。PCV2(Circoviridae)、

毒属Circovirous单股环状病毒感染猪后可导致免疫抑制易与其他病毒或细菌引起混合感

()DNA,,

染造成猪只生长发育受阻免疫系统受损等与猪繁殖与呼吸综合征病毒

,,。PCV2(Porcine

猪流感病毒副猪

reproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV)、(Swineinfluenzavirus,SIV)、

格拉瑟菌猪肺炎支原体等病原的共感染往往会诱发或促进的发生在全球范围内广泛

、PCVD。PCVD

流行各日龄和品种的猪均可发生其中仔猪和母猪受到的危害相对较重该病因其发病率高流行较

,,。、

广易引起免疫抑制等特点给养猪业造成了较重的经济损失在我国现行一二三类动物疫病病种

、,。《、、

名录中该病为三类动物疫病

》,。

本文件诊断技术内容包括临床诊断病原学诊断和血清学诊断结合我国相关技术研究新成果

、,

修订

。

Ⅳ

GB/T21674—2025

猪圆环病毒病诊断技术

1范围

本文件描述了猪圆环病毒病的临床诊断病毒分离与鉴定聚合酶链式反应实时

(PCVD)、、(PCR)、

荧光聚合酶链式反应间接酶联免疫吸附试验间接阻断酶联免疫吸附试验

(Real-timePCR)、(ELISA)、

阻断免疫组织化学试验等方法

(ELISA)、(IHC)。

本文件适用于的诊断检疫检测监测和流行病学调查

PCVD、、、。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

兽医诊断样品采集保存与运输技术规范

NY/T541、

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

氨基乙基咔唑

AEC:3--9-(3-Amino-9-Ethylcarbazole)

牛血清白蛋白

BSA:(BovineSerumAlbumin)

循环阈值

Ct:(CycleThreshold)

二氨基联苯胺

DAB:(Diaminobenzidine)

二脒基苯基吲哚

DAPI:4',6--2-(4',6-Diamidino-2-Phenylindole)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(DiethyPyrocarbonate)

脱氧核糖核酸

DNA:(DeoxyribonucleicAcid)

乙二胺四乙酸

EDTA:(EthyleneDiamineTeraaceticAcid)

酶联免疫吸附试验

ELISA:(EnzymeLinkedImmunosorbentAssay)

异硫氰酸荧光素

FITC:(FluoresceinIsothiocyanate)

辣根过氧化物酶

HRP:(HorseradishPeroxidase)

间接免疫荧光试验

IFA:(IndirectImmunofluorescenceAssay)

免疫组织化学试验

IHC:(ImmunohistochemicalAssay)

免疫过氧化物酶单层细胞试验

IPMA:(ImmunoperoxidaseMonolayelAssay)

最低限度必需氨基酸营养液

MEM:(MinimumEssentialMedium)

光密度

OD:(OpticalDensity)

磷酸盐缓冲液

PBS:(PhosphateBufferedSaline)

聚合酶链式反应

PCR:(PolymeraseChainReaction)

1