T/CRHA 059-2024 基质辅助激光解吸电离飞行时间核酸质谱法体细胞突变检测通则

ICS11.040.01

CCSN54

团体标准

T/CRHA059—2024

基质辅助激光解吸电离飞行时间核酸质谱

法体细胞突变检测通则

Generalrulesformatrix-assistedlaserdesorptionionizationtimeofflightmass

spectrometryfordetectingsomaticmutations

2024-07-05发布2024-07-10实施

中国研究型医院学会 发布

T/CRHA059—2024

目次

前言.................................................................................III

1范围................................................................................1

2规范性引用文件......................................................................1

3术语和定义..........................................................................1

4缩略语..............................................................................1

5原理................................................................................2

6试剂与耗材..........................................................................2

7仪器与设备..........................................................................2

8操作步骤............................................................................3

8.1样本的预处理....................................................................3

8.2核酸提取及要求..................................................................3

8.3PCR反应........................................................................3

8.4SAP消化反应....................................................................3

8.5单碱基延伸反应..................................................................3

8.6核酸质谱法分析..................................................................3

9性能分析............................................................................3

9.1准确度..........................................................................3

9.2检测限..........................................................................3

9.3特异性..........................................................................3

10质量控制...........................................................................4

10.1样品质量控制...................................................................4

10.2设备质量控制...................................................................4

10.3软件质量控制...................................................................4

10.4过程质量控制...................................................................4

10.5记录质量控制...................................................................4

10.6室间质量评价...................................................................4

11结果分析...........................................................................4

11.1质谱图分析.....................................................................4

11.2软件分析.......................................................................5

12结果表述...........................................................................5

12.1检测报告.......................................................................5

12.2检测结果的描述.................................................................5

13实验室要求.........................................................................5

13.1实验室资质.....................................................................5

13.2人员资质和培训.................................................................5

I

T/CRHA059—2024

附录A（资料性）PCR反应液配方表及反应程序...........................................6

附录B（资料性）SAP反应混合液配方表及反应程序.......................................7

附录C（资料性）单碱基延伸反应混合液配方表及反应程序.................................8

参考文献...............................................................................9

II

T/CRHA059—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起

草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中国研究型医院学会临床数据与样本资源库专业委员会提出。

本文件由中国研究型医院学会归口。

本文件起草单位：中国人民解放军总医院、浙江迪谱诊断技术有限公司、北京大学肿瘤医院、火

箭军特色医学中心、迪安诊断技术集团股份有限公司、济南市中心医院。

本文件主要起草人：张春燕、田亚平、张郁、郭惠民、相双红、徐明、徐杰、李志凯、张阳东、张

朋军、王军、纪明宇。

III

T/CRHA059—2024

基质辅助激光解吸电离飞行时间核酸质谱法体细胞突变检测通则

1范围

本文件规定了实验室利用飞行时间核酸质谱法进行肿瘤体细胞突变检测的原理、试剂与耗材、仪器

与设备、操作步骤、质量控制、结果分析、结果表述和实验室要求。

本文件适用于样本类型包括但不限于新鲜肿瘤组织、肿瘤组织石蜡包埋或者细胞石蜡包埋的切片。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6041-2020质谱分析方法通则

GB/T6682—2008分析实验室用水规格和试验方法

GB19489-2008实验室生物安全通用要求

T/ZZB2482—2021飞行时间核酸质谱仪

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

引物primer

结合于模板链上，引导聚合酶进行延伸的起始位点或终止位点的，具有一定长度和顺序的寡核苷酸。

3.2

聚合酶链式反应polymerasechainreaction

一种在体外对模板DNA或RNA的特定片段进行快速扩增的方法，包含变性----退火----延伸三个基本

反应步骤。

3.3

单碱基延伸singlebaseextension