DB12/T 1019-2020 猪德尔塔冠状病毒 RT-PCR 检测方法

DB12/T 1019-2020 Pig Delta coronavirus RT-PCR detection method

天津市地方标准 简体中文 废止 页数:7页 | 格式:PDF

基本信息

标准号
DB12/T 1019-2020
标准类型
天津市地方标准
标准状态
废止
中国标准分类号(CCS)
国际标准分类号(ICS)
发布日期
2020-12-28
实施日期
2021-02-01
发布单位/组织
天津市市场监督管理委员会
归口单位
-
适用范围
-

发布历史

研制信息

起草单位:
起草人:
出版信息:
页数:7页 | 字数:- | 开本: -

内容描述

ICS65.020.30

B41

DB12

天津市地方标准

DB12/T1019—2020

猪德尔塔冠状病毒RT-PCR检测方法

RT-PCRassayfordetectionofporcinedeltacoronavirus

2020-12-28发布2021-02-01实施

天津市市场监督管理委员会发布

DB12/T1019—2020

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则编写。

本标准由天津市农业农村委员会提出并归口。

本标准起草单位:天津市畜牧兽医研究所。

本标准主要起草人:李秀丽、鄢明华、郑丽、路超、田向学、张莉、李富强、江珊、任卫科、董志

民。

I

DB12/T1019—2020

猪德尔塔冠状病毒RT-PCR检测方法

1范围

本标准规定了猪德尔塔冠状病毒(porcinedeltacoronavirus,PDCoV)RT-PCR检测方法的原理、

仪器设备与试剂、样品对照、方法步骤和结果判定等技术内容。

本标准适用于猪肠内容物、粪便以及细胞培养物中PDCoV核酸的检测。

2缩略语

下列缩略语适用于本文件。

PDCoV:猪德尔塔冠状病毒(porcinedeltacoronavirus)

PCR:聚合酶链式反应(polymerasechainreaction)

RT-PCR:反转录聚合酶链式反应(reversetranscription-polymerasechainreaction)

RNA:核糖核酸(ribonucleicacid)

DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid)

cDNA:互补脱氧核糖核酸(complementaryDNA)

PK-15细胞:猪肾细胞(porcinekidneycell)

DEPC:焦炭酸二乙酯(diethylpyrocarbonate)

Taq酶:TaqDNA聚合酶(TaqDNApolymerase)

dNTP:脱氧核糖核苷三磷酸(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)

M-MLV:莫洛尼氏鼠白血病病毒(moloneymurineleukemiavirus)

PBS:磷酸缓冲液(phosphatebuffersolution)

TAE:Tris-乙酸电泳缓冲液(trisacetate-EDTAbuffer)

3原理

PDCoV是一种RNA病毒。RNA反转录产生的cDNA可作为PCR模板进行扩增。根据PDCoVM基因保守基因

序列设计一对引物,在DNA聚合酶催化下,以母链DNA为模板,以引物为延伸起点,通过变性、退火和延

伸,体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA。依据PCR试验结果,判断样品中是否含有PDCoV。

4主要仪器设备

生物安全柜、组织研磨机、涡旋振荡器、台式低温高速离心机、PCR

定制服务

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