WS/T 630-2018 日本血吸虫抗体检测 间接红细胞凝集试验

ICS11.020

C61

WS

中华人民共和国卫生行业标准

WS/T630—2018

日本血吸虫抗体检测间接红细胞凝集试验

DetectionofantibodyagainstSchistosomajaponicum—

Indirecthaemagglutinationtest

2018-09-26发布2019-04-01实施

中华人民共和国国家卫生健康委员会发布

WS/T628—2018

前  言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由国家卫生标准委员会寄生虫病标准专业委员会提出。

本标准起草单位：安徽省血吸虫病防治研究所、中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、浙江

省医学科学院寄生虫病研究所、江苏省血吸虫病防治研究所、江西省寄生虫病防治研究所。

本标准主要起草人：张世清、汪天平、许静、闻礼永、章乐生、郑彬、熊彦红、梁幼生、林丹丹。

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WS/T628—2018

日本血吸虫抗体检测间接红细胞凝集试验

1范围

本标准规定了检测日本血吸虫抗体的间接红细胞凝集试验。

本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对人体血清中日本血吸虫抗体的检测。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

血吸虫病schistosomiasis

由血吸虫寄生于人和其他哺乳动物所引起的疾病，在我国特指日本血吸虫病（schistosomiasis

japonica）。

注：改写GB15976—2015，定义3.1

2.2

间接红细胞凝集试验indirecthaemagglutinationtest

将抗原包被于红细胞表面，成为致敏的载体，然后与相应的抗体结合，通过抗体桥联，出现肉眼可

见的凝集现象，以检测样本中的相应抗体。最常用的红细胞为健康人“O”型红细胞。

2.3

可溶性虫卵抗原solubleeggantigen

血吸虫虫卵经匀浆和超声破碎等处理后离心收集的上清液，含蛋白质、糖蛋白、多糖等多种成分复

合物。

3仪器设备

3.1台式低速离心机

最高转速≥2500r/min，或最大相对离心力≥800g。

3.2平板微量振荡器

最高振动频率2800r/min，最大振幅6mm。

3.3电热恒温水浴箱

控温范围室温+5℃～99.9℃，温度分辨率/波动度0.1℃/±0.5℃。

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WS/T628—2018

3.4微量移液器

量程范围10μL～100μL，增量1μL；量程范围100μL～1000μL，增量5μL。

4试剂材料

4.1冻干致敏红细胞

主要组成成分为日本血吸虫可溶性虫卵抗原、健康人“O”型红细胞和蔗糖，制备方法参见附录A。

4.2阳性对照血清

感染日本血吸虫的兔混合血清，参见附录A。

4.3阴性对照血清

正常兔混合血清，参见附录A。

4.4稀释液

pH7.2磷酸盐缓冲液（PBS），参见附录A。

4.5血凝反应板

“V”型微孔有机玻璃血凝板为宜，操作程序参见附录B。

5检测步骤

5.1样本准备

采集末梢血100μL或静脉血2mL，室温下放置至血块收缩后，800g离心5min，分离出血清后进

行检测，参见附录B。

5.2样本检测

5.2.1待测样本编号，从左到右按1～n号依次排列。

5.2.2阴性对照血清、阳性对照血清各加100μL稀释液，使其充分溶解，移液器吹打数次混匀后备用。

5.2.3取血凝反应板，横向平放纵向使用。于第1列第1孔加稀释液100μL，第1列的第3、4孔各加

稀释液25μL，第2孔不加稀释液。

5.2.4于第1列第1孔加1号待测样本25μL，充分混匀后吸出25μL至第2孔，再从第1孔吸出25μL

至第3孔，充分混匀后吸出25μL至第4孔，充分混匀后吸出25μL弃去。

5.2.5同上操作，依次进行第2～n号样本、阴性对照血清、阳性对照血清的倍比稀释，血凝反应板纵

向4孔的血清稀释度依次为1：5、1：5、1：10、1：20。

5.2.6每支冻干致敏红细胞加1mL稀释