DB13/T 2596-2017 苹果组培苗繁育技术规程

ICS65.020.01

B61

DB13

河北省地方标准

DB13/T2596—2017

苹果组培苗繁育技术规程

2017-11-22发布2017-12-22实施

河北省质量技术监督局发布

DB13/T2596—2017

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由河北农业大学提出。

本标准起草单位：河北农业大学。

本标准主要起草人：师校欣、杜国强、高仪、杨丽丽、许建锋、王燕霞、张莹、刘婉君、成晓华。

I

DB13/T2596—2017

苹果组培苗繁育技术规程

1范围

本标准规定了苹果品种和砧木（Malusspp.）组织培养繁育过程中的术语和定义、苹果组培苗生

产设施、培养基制备、组培室消毒灭菌、苹果组培苗生产、组培苗质量标准、包装、标签和运输等方

面的操作规程。

本标准适用于苹果品种和砧木组织培养繁育苗木。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB9847苹果苗木

LY/T1882-2010林木组织培养育苗技术规程

NY/T1085-2006苹果苗木繁育技术规程

NY/T2306-2013花卉种苗组培快繁技术规程

NY/T2719-2015苹果苗木脱毒技术规范

3术语和定义

LY/T1882-2010、NY/T2306-2013等界定的以及下列术语和定义适用于本文件。为便于使用，以

下重复列出了LY/T1882-2010、NY/T2306-2013中的某些术语和定义。

3.1

植物组织培养planttissueculture

在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体，在人工培养基和人工控制的环境

中，使其再生新植株的过程和技术。

[LY/T1882-2010，定义3.2]

3.2

茎尖培养meristemculture

以植物茎尖为外植体，通过组织培养的方式获得完整植株的一种生物技术。一般用来进行脱毒种

苗的生产，以获得不含检疫及影响植物正常生长的病毒的植株。

[NY/T2306-2013，定义3.4]

3.3

培养基medium

根据植物营养原理和植物组织培养的要求，人工配制的营养基质。

[LY/T1882-2010，定义3.4]

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DB13/T2596—2017

3.4

培养基母液mediumstocksolution

按试剂种类和性质分别配制的高于培养基配方浓度的溶液。

[LY/T1882-2010，定义3.5]

3.5

灭菌sterilization

通过物理、化学及一些理化方法，杀灭一切微生物（包括孢子等）的过程。

[NY/T2306-2013，定义3.5]

3.6

消毒disinfection

通过物理、化学方法去除物体表面大部分有害病原微生物（孢子除外）的过程。

[NY/T2306-2013，定义3.10]

3.7

外植体explant

从自然生长的活体植物上获取的用于建立植物组培快繁体系的起始材料。

[NY/T2306-2013，定义3.8]

3.8

接种inoculation

在无菌条件下将消毒后的外植体或继代、生根组培材料接入培养基的过程。

注：改写NY/T2306-2013，定义3.3。

3.9

初代培养explantculture

采集外植体并对其进行消毒接种，将其置于适宜的培养条件下，启动生长、获得最初的无菌培养

材料的过程。

3.10

继代培养subculture

外植体经初代培养后，再次以及以后各次接种于新培养基继续培养的过程。

[LY/T1882-2010，定义3.7]

3.11

丛梢shootclump

在适宜条件下，外植体的顶芽或腋芽萌发形成的嫩梢会长出新的腋芽，腋芽又不断萌发出嫩梢，

此过程重复发生而形成的多芽多梢的集合体。

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DB13/T2596—2017

3.12

试管苗plantletinvitro

通过组织培养方法获得的培养容器中的培养材料。包括外植体初代培养、继代培养、生根培养各

阶段的组培材料。

注：改写NY/T2306-2013，定义3.7。

3.13

组培苗plantpropagatedviatissueculture

利用植物组织、器官或细胞等作为起始材料，通过植物组织培养方式生产获得的植株。

[NY/T2306-2013，定义3.12]

4苹果组培苗生产设施

苹果组培苗繁育实验室或组培生产工厂应包括培养基制备室、洗涤室、灭菌室、接种室、培养室、

制水室、储存室（仓库）、温室或大棚等部分，面积可视工作（生产）规模确定。

5培养基制备

5.1培养基配方

5.1.1基本培养基采用MS培养基或C17培养基，具体成分分别见附录A中的表A.1和附录B中的表

B.1。

5.1.2外植体初代培养基

新红星等元帅系品种：C17+6-苄基腺嘌呤（6-BA）0.5mg/L+吲哚丁酸（IBA）0.2mg/L+水

解酪蛋白（CH）300mg/L+蔗糖30g/L+固化剂（能使培养基凝固的最低用量，视固化剂种类确定）。

除元帅系外的其它苹果品种和砧木：MS+6-BA0.5mg/L～1.0mg/L+萘乙酸（NAA）0.05mg/L

+蔗糖35g/L+固化剂（能使培养基凝固的最低用量，视固化剂种类确定）。

5.1.3继代培养基：基本培养基MS（C17）+6-BA1.0mg/L～3.0mg/L+NAA0.05mg/L+蔗糖35g/L

+固化剂（同5.1.2）。

5.1.4生根培养基：1/2MS（1/2C17）+IBA0.3mg/L~0.6mg/L+吲哚乙酸（IAA）1.0mg/L+蔗

糖25g/L+固化剂（同5.1.2）。

5.1.5不同苹果品种或砧木组织培养时，培养基中生长调节物质的浓度可根据以上配方给出的浓度范

围适当调整。

5.1.6为降低成本，蔗糖可用等量食用白砂糖代替。

5.2母液配制

5.2.1母液配制选用化学纯以上纯度的化学试剂，使用蒸馏水或去离子水。

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DB13/T2596—2017

5.2.2根据附录A中表A.1和附录B中表B.1的基本培养基配方成分分组和浓度扩大倍数，分别配制

大量元素（50倍）母液、钙元素（50倍）母液、微量元素-1（200倍）母液、微量元素-2（500倍）

母液、铁元素（100倍）母液和有机物（100倍）母液。

5.2.3植物生长调节物质配制成单一成分母液，浓度以方便使用为原则，一般为0.1mg/ml～0.5

mg/ml。

5.2.4培养基母液试剂瓶分别贴上标签，标注母液名称、配制倍数和日期，置于冰箱冷藏保存。有机

物母液、铁元素母液和植物生长调节物质母液应储存在棕色试剂瓶中。