T/NAASS 056-2023 规模化肉牛场牛支原体病诊断与防治技术规程

范围:本文件规定了规模化肉牛场牛支原体病诊断与防治技术的术语和定义、诊断、预防和治疗。 本文件适用于规模肉牛场牛支原体病的防治。其他肉牛场参照执行; 主要技术内容:3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。牛支原体病 Mycoplasmosis bovis是指由牛支原体引发牛的一种呈现多种临床表现的传染病。胸膜肺炎样微生物培养基 pleuropnenmonia-like organism medium PPLO即支原体培养基，主要用于多种支原体的分离和培养。4诊断流行病学牛支原体主要感染肉牛和奶牛。长途运输、饲养环境变化、气候变化等因素可诱发牛支原体病的发生。感染牛作为传染源可通过呼吸道、乳汁传播病原。临床症状肺炎型：体温升高、咳嗽、呼吸困难、口鼻有浆液性或脓性分泌物。关节炎型：膝关节肿大、跛行。乳腺炎型，乳房充血、肿大、凝乳。结膜炎型：羞明流泪、结膜发红、角膜和结膜外凸、失明。病理变化胸腔和心包积液增多，肺脏黏连，实质性肉变和灰白色干酪样或化脓性坏死灶。关节腔内有淡黄色或浓稠积液。样本采集肺炎型：按照NY/T 3234执行。乳腺炎、关节炎和结膜炎型分别采集乳汁、关节液、眼部分泌物至无菌试管中，冷藏保存。如果24 h内不能送达实验室，-20 ℃保存。样品解冻时，置于38 ℃～40 ℃水浴解冻。分离培养牛支原体液体培养基配制见附录A.1，牛支原体固体培养基配制见附录A.2，实验用水应符合GB/T 6682规定。肺组织表面消毒后，取一小块病变和正常组织交界处深层肺组织，鼻拭子、乳汁、关节液样品经0.45μm滤膜过滤后，接种牛支原体固体培养基，置于37 ℃、5 % CO2恒温培养箱中培养1 d～2 d后，可观察到“煎蛋样”菌落，见附录B.1。该菌落接种牛支原体液体培养基中，置于恒温摇床中37 ℃，220 r/min培养 1 d～2 d，培养液由红色变成黄色。电镜观察扫描电镜下呈现微小针尖状形态,见附录B.2。透射电镜下呈球形、椭圆形及不规则多边形，菌株胞浆中可见大量的核糖体，菌株表面可见完整清晰的细胞膜，无细胞壁，见附录B中图B.3。PCR鉴别诊断按照NY/T 3234执行。结果判定符合4.1、4.2和4.3的特征判断为疑似病例。同时符合4.4、4.5、4.6或4.7的特征判断为确诊病例。5预防和治疗预防加强饲养及环境卫生管理，定期消毒，定期监测。不从疫区或发病区引